中医内科学专业优秀论文醒脑健神胶囊对实验性大鼠脑出血急性期血浆和脑组织Nse，S100B蛋白水平及mRNA的影响关键词：醒脑健神胶囊中药制剂急性脑出血神经元特异性烯醇化酶S-100B蛋白实验药理摘要：目的：主要内容为总结、继承全国名老中医任继学教授辨治脑出血急性期的经验，并从分子水平角度研究其代表组方醒脑健神胶囊治疗急性脑出血的机制。急性脑出血一直以来就是威胁人类健康的主要杀手，预后较差，因此寻求一种有广泛应用前景的救治急性脑出血的中药势在必行。中医药治疗急性脑出血有较大的优势，值得我们进一步挖掘和探索。任继学教授是我国著名的中医急症专家，尤擅长治疗急性脑血管疾病。任继学教授主持的“八五”攻关项目，中医药治疗急性出血性中风的实验与临床研究己获得国家科技进步三等奖，实验研究已经证实在脑出血应激条件下，醒脑健神胶囊(任继学教授组方)对脑细胞膜及血脑屏障的保护方面具有较强的作用；并能提高脑组织SOD活性，纠正自由基代谢紊乱，改善离子分布，具有抗脑水肿形成的作用。虽然醒脑健神胶囊用于治疗急性出血性中风的实验研究获得阶段性成功并取得显著的临床疗效，但是全面认识其治疗上述疾病的作用机制尚待深入研究。近年来国内外研究表明，脑损伤后神经组织蛋白S100(S100B蛋白，主要存在于神经胶质细胞)和神经元特异性烯醇化酶(NSE，主要存在于神经元)的血清、脑脊液值呈动态变化，研究多集中在二者变化与出血量，神经功能缺损，预后的关系方面。研究表明与脑损害的程度呈正相关，已作为敏感的神经生化标志物，用于评价脑损伤的程度和预后。但脑出血后血清，脑脊液NSE,S100B水平的变化是单纯的脑组织损伤渗出所致，还是存在基因调控水平的变化，国内外研究较少。此外，尚未见以血清或脑脊液S-100B蛋白和NSE水平作为指标来评价醒脑健神胶囊对中枢神经系统损伤是否有治疗作用的文献。本研究着重继承导师治疗急性脑出血的学术经验，阐明其独特的理论体系，并以实验性大鼠血清和脑组织NSE(神经元的特异性标志酶)，S100B(神经胶质细胞的特异性标志蛋白)作为研究对象，在此理论基础上，运用酶联免疫，免疫组化ABC法，RT-PCR技术，通过观察在实验性大鼠脑出血急性期不同组，不同时间点NSE，S100B及各自mRNA在脑组织、血清蛋白水平的变化，以期从分子水平探讨醒脑健神胶囊对急性脑出血的作用机制。其目的在于：一是系统继承传统中医的理论，以此作为指导临床和科研的准则；二是继承名老中医的宝贵经验，开阔学术视野、提高我们的临床疗效，以期进一步提高这一疑难病症的疗效。三是从分子水平进一步探讨醒脑健神胶囊治疗急性脑出血的机制。方法：72只健康wistar大鼠随机分成治疗组，对照组，假手术组三组，每组24只大鼠，治疗组造模前3天给药，给药方式口服，剂量30mg/100g，每日两次；对照组造模后0.9％Nacl(2ml)腹腔注射，每日两次；假手术组造模后正常喂食。脑出血模型通过注射自体血于右侧尾壳核而成模。假手术组操作方法同对照组，但是不向大脑注射血液。模型成功的评分判断参照Zea-longa方法进行。手术后各组分别于1，3，7，14d四个时点宰杀动物，每个时点6只大鼠，同时分别于上述四个时点进行下列实验指标的检测。(1)、造模后和宰杀前分别进行一次神经功能缺损的评分。(2)、NSE和S-100B血清值通过ELISA检测；(3)、运用RT-PCR检测NSE和S-100B各自：mRNA在脑组织的表达；(4)、免疫组化ABC法检测。NSE和S-100B在脑组织的阳性表达，阳性细胞染色呈棕黄色；(5)、运用LSCM在400倍物镜下，每张玻片连续取10个高倍视野，计数各高倍视野内阳性细胞数，然后计算均数。结果：本实验表明：(1)、手术后，治疗组和对照组神经功能缺损评分无明显差异(p>0.05)；与假手术组相比，各个时点治疗组和对照组神经功能缺损评分均增加，有极显著差异(p<0.01)；各组组内相比无明显差异(p>0.05)。但是从3d开始，治疗组与对照组相比，评分均下降，有明显差异(p<0.05)，7d～14d，评分继续下降，与对照组相比，有极显著差异(p<0.01)；(2)、与假手术组相比，1d～7d，对照组S100B血清水平，在各个时点均呈现增加趋势，有明显差异(p<0.05)，在3d时达到高峰，有极显著差异(p<0.01)...