溴甲酚绿探针吸收光谱法测定大观霉素庞向东，杜少敏，江虹*（长江师范学院化学化工学院，重庆408100）摘要：在酸性条件下，溴甲酚绿与大观霉素反应生成具有正、负吸收峰的离子缔合物，最大正吸收波长位于580nm，最大负吸收波长位于449nm，表观摩尔吸光率(ε)分别为3.41×104和2.86×104L·mol-1·cm-1，大观霉素在0.6～9.2mg·L-1(正吸收)和0.6～11.1mg·L-1(负吸收)范围内遵从比尔定律。当用双波长叠加测定时，灵敏度可提高到6.26×104L·mol-1·cm-1。方法用于市售大观霉素药物中大观霉素含量的测定，结果满意。关键词：溴甲酚绿；大观霉素；吸收光谱法中图分类号：O657.3文献标识码：AAbsorptionSpectraMethodfortheDeterminationofSpectinomycinwithBromocresolGreenasProbePANGXiang-dong,DUShao-min,JIANGHong*(CollegeofChemistryandChemicalEngineering,YangtzeNormalUniversity,Chongqing408100)Abstract:Inaciditycondition,bromocresolgreenreactswithspectinomycintoformanionassociationcomplexeswithobviouspositiveabsorptionpeakandnegativeabsorptionpeak.Themaximumpositiveabsorptionwavelengthwasat580nmandmaximumnegativeabsorptionwavelengthwasat449nm,theirapparentmolarabsorptivity(ε)were3.41×104and2.86×104L·mol-1·cm-1respectively.Beer’slawisobeyedintherangeof0.6～9.2mg·L-1(positiveabsorption)and0.6～11.1mg·L-1(negativeabsorption)spectinomycin.Whenthedual-wavelengthoverlappingabsorptionspectrometrywasusedtodeterminethespectinomycin,theapparentmolarabsorptivitywasadvanced6.26×104L·mol-1·cm-1.Themethodwasappliedtodeterminethecontentofspectinomycininmedicamentwithsatisfactoryresults.Keywords:Bromocresolgreen;Spectinomycin;Absorptionspectramethod盐酸大观霉素是治疗淋病的特效药物，临床上常用其盐酸盐。目前，测定大观霉素的方法主要有：微生物法[1]，高效液相色谱法[2-3]，气相色谱法[4]，高效毛细管电泳法[5-6]，分光光度法[7]，酶联免疫吸附法[8]，核磁共振法[9]等。微生物法操作费时、繁琐、条件要求苛刻，不适于急检的需要；高效液相色谱法和气相色谱法仪器较贵，不易普及；其它方法研究不多。本文以溴甲酚绿作探针，研究了大观霉素的光度分析检测方法。实验发现，在酸性条件下，溴甲酚绿与大观霉素反应，生成具有两个明显正吸收峰和一个负吸收峰的离子缔合物，最大和次大正吸收波长分别位于580nm和643nm，最大负吸收波长位于449nm。在这几个波长处，大观霉素的浓度在一定范围内与吸光度的绝对值呈良好的线性关系，服从比尔定律，且灵敏度比文献[7]高。方法用于实际样品的测定，结果满意。1实验部分1.1仪器和试剂U-3010型紫外-可见分光光度计（日本，日立）。基金项目：重庆市教委科技基金资助项目（KJ121321）作者简介：庞向东(1962—)，男，四川南充人，副教授，主要从事分析化学教学及科研工作。*通讯联系人：江虹，E-mail:jianghongch@163.compH计（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）。大观霉素（Spectinomycin，SPM；重庆药检所提供)标准溶液：储备液浓度1.0×10-3mol·L-1，操作液浓度1.0×10-4mol·L-1，40.00mg·L-1。溴甲酚绿(Bromocresolgreen,BROG；上海化学试剂三厂)溶液：1.0×10-3mol·L-1。Tris-HCl缓冲溶液：用0.1mol·L-1HCl和0.2mol·L-1Tris（三羟甲基氨基甲烷）适当混合，用酸度计检测，配成一系列不同pH的缓冲溶液。试剂均为分析纯，试验用水为二次蒸馏水。1.2试验方法于10mL比色管中，准确加入一定量的1.0×10-4mol·L-1大观霉素（SPM）标准溶液，0.5mLpH=5.02的Tris-HCl缓冲溶液和2.0mL1.0×10-4mol·L-1溴甲酚绿（BROG）溶液，用水稀至刻度，摇匀，10min后以试剂空白为参比，在最大正、负吸收波长处用1cm比色皿测其吸光度。2结果与讨论2.1吸收光谱由图可见，SPM在400～700nm范围几乎无吸收(谱线1)。在酸性介质中，BROG在可见光区产生强烈吸收，最大吸收波长为440nm，吸光度为1.803（谱线2）。当在SPM溶液中加入BROG溶液后，由于BROG在溶液中以阴离子形式存在，而大...