聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌作用研究试验单位（盖章）：南京农业大学地址：江苏省南京市卫岗1号委托单位及地址：深圳市安多福动物药业有限公司；深圳市盐田区盐田北山工业区首席专家（签名）：江善祥试验负责人（签名）：季辉试验参与人（签名）：张冠军试验日期：2014年3月联系人：季辉联系电话：025-84395573原始资料保存地点：南京农业大学动物医学院药理组聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌作用研究一、目的意义本试验目的是研究聚维酮碘口服液（万金水）在体外条件下，对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌作用，为其在兽医生产中的合理使用提供理论依据。二、试验时间与地点2014年3月，南京农业大学动物医学院药理实验室。三、试验人员试验负责人：季辉，南京农业大学动物医学院基础兽医系，邮箱jihui1019@163.com。试验设计人：季辉。参加者：张冠军，南京农业大学动物医学院基础兽医系。四、试验菌株猪大肠杆菌2株：ED115、ED117，南京农业大学动物医学院药理组保存；禽沙门氏菌2株：F3、F5，安徽农业大学动物科技学院馈赠。五、试验药物：兽药名称：聚维酮碘口服液（万金水）生产厂家：深圳市安多福动物药业有限公司提供规格：0.5%，500mL/瓶生产日期：2013-01-10生产批号：13011004六、试验试剂MH培养基：上海盛思生化科技有限公司，130101；LB肉汤培养基：上海盛思生化科技有限公司，130801；LB琼脂培养基：上海盛思生化科技有限公司，130901。七、试验方案本试验应用试管稀释法进行聚维酮合碘口服液（万金水）的实验室微生物杀灭试验，测定聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌的杀灭作用。7.1细菌繁殖体悬液制备：以无菌操作方式开启菌种管，用毛细吸管加入适量营养肉汤培养基，轻柔吹吸数次，使菌种融化分散。取含5.0mL～10.0mL营养肉汤培养基试管，滴入少许菌种悬液，置37℃培养18h～24h。用接种环取第1代培养的菌悬液，划线接种于营养琼脂培养基平板上，置37℃培养18h～24h。挑取上述第2代培养物中典型菌落，接种于营养营养肉汤，置37℃培养18h～24h，即为第3代培养物。7.2聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌的杀灭作用测定试验采用试管稀释法测定(3重复)。试验时，取对数生长期的细菌（109cfu/mL）用生理盐水稀释到106cfu/mL供试验用，取10支灭菌试管编号，每管加入1mL稀释后的菌液，然后取浓度为80、40、20mg/L的聚维酮碘溶液1mL各加入三支试管中混匀，则试验浓度分别为40、20、10mg/L，另一只试管中加入1mL生理盐水作为阳性对照。作用10min后，每管分别取0.1mL用生理盐水按10倍比稀释，再取稀释后样品0.1mL进行平板计数，计算聚维酮碘口服液（万金水）的杀菌率。八结果体外抗菌活性通过试验分别测定了聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌、沙门氏菌的杀菌作用，具体结果见表1、2。由表可见，聚维酮碘口服液（万金水）三个浓度（40、20、10mg/L）分别与大肠杆菌、沙门氏菌作用10min后即可将细菌全部杀灭，细菌计数结果为0。表1聚维酮碘口服液（万金水）与大肠杆菌作用10min后细菌数（cfu/mL）浓度（mg/L）菌株号ED115ED117400020001000阳性对照2.64×1067.7×105表2聚维酮碘口服液（万金水）与沙门氏菌作用10min后细菌数（cfu/mL）浓度（mg/L）菌株号F3F5400020001000阳性对照2.4×1061.2×106九讨论聚维酮碘口服液（万金水）对大肠杆菌和沙门氏菌的抗菌活性本试验采用试管稀释法，每管加入1mL稀释后的菌液，然后分别加入不同浓度的聚维酮碘溶液1mL，混匀后作用10min进行细菌计数，测定聚维酮碘口服液（万金水）的杀菌性能。结果显示分别在40、20、10mg/L的浓度下聚维酮碘与大肠杆菌和沙门氏菌作用10min，可将其全部杀灭。文献报道各种碘制剂（碘伏、聚维酮碘等）的杀菌效果差别较大，分析原因主要为试验方法上的差异。不同试验方法得到的聚维酮碘的MIC或MBC为4.69mg/L~625mg/L。可见本试验结果与文献基本一致。十试验综合评估综合上述试验结果与文献，试验方法对该药的体外抗菌活性影响较大。在本试验方法的条件下，聚维酮碘口服液（万金水）在40、20、10mg/L时对临床常见的细菌（大肠杆菌、沙门...