紫外分光光度法测定藏药二十五味余甘子丸中总鞣质的含量【摘要】目的：建立二十五味余甘子丸中总鞣质的含量测定方法。方法：以没食子酸为对照品，磷钼钨酸为显色剂，检测波长760nm。结果：没食子酸的线性范围为1.024～10.24μg（r=0.9996），平均回收率99.2%，RSD=0.6%。结论：该方法简单、准确、重复性好，可用于二十五味余甘子丸中总鞣质的含量测定。【关键词】二十五味余甘子丸；紫外分光光度法；总鞣质；含量测定【】R284.1【文献标志码】A【】1007-8517（2016）14-0013-02Abstract：ObjectiveTosetupamethodfordeterminationtotaltannininershiwuweiyuganzipill.MethodsGallicacidtobereference，andcoloredwithPhosphorusmolybdenumtungstenacid，thewavelengthofdetectwassetat760nm.ResultsThelinearitywasobtainedwithintherangeof1.024～10.240μg（r=0.9996）；Theaveragerecovery（n=6）was99.2%，andRSDwas0.6%.ConclusionThemethodissimple，accurateandrepeatable.Itcouldbeadoptedtodeterminatethetotaltannininershiwuweiyuganzipill.Keywords：ershiwuweiyuganzipill；UV；totaltannin；contentdetermination藏药二十五味余甘子丸为藏医传统验方，处方由余甘子、巴夏嘎、甘青兰等二十六味药材制成的复方制剂，临床用于多血症、高血压、肝胆疼痛、声哑目赤、口渴、口唇发紫、月经不调[1]。研究采用紫外分光光度法测定[2-3]十一批不同厂家的二十五味余甘子丸中总鞣质的含量，为其质量控制提供实验依据。1仪器与材料1.1仪器TU1901双光速紫外可见分光光度计（北京普析通用公司）；XP205微量电子天平（瑞士METTLER公司）；KQ-250DE型数控超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司）。1.2材料没食子酸对照品（批号：110831-200803，中国药品生物制品检定所）；所用的试剂均为分析纯，二十五味余甘子丸样品（见表1）。2方法与结果2.1对照品溶液制备精密称取没食子酸对照品11.36mg，置20mL棕色量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，精密量取5mL，置50mL棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.0512mg/mL的没食子酸对照品溶液。2.2供试品溶液制备精密称取供试品细粉2.0g，置250mL棕色容量瓶中，加入30%的甲醇溶液150mL，超声提取40min，放冷，加30%甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液20mL，置100mL棕色容量瓶中，加水至刻度，即得。2.3标准曲线的制备精密量取浓度为0.0512mg/mL没食子酸对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，分别置25mL棕色量瓶中，各加入磷钼钨酸试液1mL，再分别加水11.5、11、10、9、8、7mL，用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30min，以相应的试剂为空白，在760nm处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线得回归方程Y=0.12163X+0.06147（r=0.9996），表明没食子酸在1.024～10.24μg范围内线性关系良好。2.4精密度试验取供试品溶液（批号：101201）6份，分别制成供试品溶液，按照“2.3”项下方法操作，于760nm处测定吸光度，结果吸光度的相对标准偏差（RSD）为1.3%，说明仪器的精密度良好。2.5稳定性试验精密吸取供试品溶液（批号：101201）1mL，按“2.3”项下方法操作，显色30min后，每隔5min测定一次吸光度，共6次，计算（RSD）为1.2%（n=6），表明二十五味余甘子丸的鞣质在显色终止反应后30min内测结果稳定。2.6回收率试验取已知含量（批号：101201）的样品6份，精密称取2.0g细粉，各加入没食子酸对照品20.0mg，按照供试品溶液制备方法制备，并按“2.3”项下方法测定含量，结果6次测定的平均回收率为99.2%，RSD=0.6%，说明该测定方法回收率较好。见表2。2.7总鞣质含量测定2.7.1总酚精密量取供试品溶液2mL，置25mL棕色量瓶中，加入磷钼钨酸试液1mL，再加水10mL，用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30min，测定吸光度。2.7.2不被吸附的多酚精密量取供试品溶液25mL，加至已盛有0.6g干酪素的100mL具塞锥形瓶中，密塞，于30℃水浴中保温1h，时时振摇，取出，放冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2mL，置25mL棕色量瓶中，加入磷钼钨酸试液1mL，再加水10mL，用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30min，测定吸...