着色性干皮病一家系的XP基因突变检测【摘要】目的检测1个着色性干皮病家系的XPA和XPC基因突变。方法收集1个着色性干皮病家系的临床资料，采集先证者及其家庭成员的外周血标本，提取外周血白细胞中的DNA，采用PCR反应扩增XPA和XPC所有外显子编码区及其侧翼序列，通过对PCR反应产物直接测序进行序列分析。结果该着色性干皮病家系未发现XPA和XPC的致病性基因突变。结论尽管XPA和XPC是国内比较常见的着色性干皮病亚型，但该家系可能属于其他的亚型。【关键词】着色性干皮病；突变；XPA；XPC【Abstract】ObjectivesToidentifypathogenicmutationoftheXPAan邓小平Cgeneinonefamilialcasesofxerodermapigmentosum.MethodsWecollectedbloodsamplesandclinicaldatafromonefamilialcasesofxerodermapigmentosum.GenomicDNAwasextractedfromperipheralblood.Allthecodingexonsandexon-intronflankingsequencesofXPAan邓小平Cgenewereamplifiedbypolymerasechainreactionandproductswereanalyzedbydirectsequencing.ResultsNoXPAan邓小平Cpathogenicmutationwasfoundinthisfamilywithxerodermapigmentosum.ConclusionsAlthoughXPAan邓小平Cisamorecommonsubtypeswithxerodermapigmentosuminthedomestic,butthisfamilymaybeothersubtypes.【keywords】XerodermaPigmentosum/XPA/XPC/mutation【】R722.12【文献标识码】B【】1004-4949(2014)07-0038-02着色性干皮病（XerodermaPigmentosum，XP）是一种极其少见的常染色体隐性遗传性损容性皮肤病，严重危害患者身心健康。1870年由匈牙利裔的皮肤病教授Kaposi首先描述，1882年命名［1］。其主要临床特征为皮肤对日光、特别是紫外线高度敏感，皮肤干燥脱屑，雀斑样色素沉着，皮肤易癌变。XP已发现7组互补型(XPA、XPB、XPC、XPD、XPE、XPF、XPG)和1种变异型(XPV），遗传互补分析研究表明，XP互补组的分布有一定的地区性，日本人A组最多，欧美国家C组和D组分布较广泛，中国人C组居多［2］。XP(A―G)和XPV基因已经被全部定位克隆。本文对XP1个家系进行XPA和XPC基因的突变检测。1、材料与方法1.1临床资料收集来自四川的1个着色性干皮病家系的临床资料。先证者吕小会，女，18岁。因暴光部位起色斑15年，颜面变形6年就诊。患者出生时肤色无明显异常，15年前（2、3岁时）患者暴光部位开始起点状色斑，后皮疹缓慢逐年增多，变密集，为褐色或黑色斑点、斑片。病程日久，遮盖部位亦出现类似色斑，皮疹小、色淡，日晒或劳累后病变加重。6年前患者颜面出现变形，面部中央出现色素减退、皮肤萎缩。双眼视力下降，眼裂缩小。读小学时成绩中上，无明显智力障碍，有月经紊乱史。其父母有近亲婚配史，系表兄妹结婚。其哥亦是2、3岁发病，患病过程与患者相似，但较重，且出现瘤样损害，19岁因该病去世，死于皮肤鳞癌。其姐24岁，系当地医生，未见发病(图1)。皮肤科情况：皮损分布于全身，以暴露部位为重。全身可见雀斑样损害，以颜面、双手足明显，为密集褐色或黑色斑点、斑片，位于深褐色皮肤上。面部中央见色素减退斑片、皮肤萎缩。双眼裂缩小，眼球粘连，肉芽增生，视力下降。口唇干燥，闭口不严（图2）。全身皮肤干燥，未见瘤状损害。病理活检示角化过度，表皮细胞排列紊乱，棘细胞不规则增生，基底层色素不规则聚集（图3）。图1家系图图2临床照片图3皮肤组织病理HE×1001.2标本采集本研究经医院伦理委员会同意，患者及其家属签署知情同意书。抽取该着色性干皮病家系中先证者及其父母、姐姐的外周静脉血各5mL于EDTA（乙二胺四乙酸）抗凝管中。血样置于－18℃冰箱保存。1.3DNA提取采用盐析法提取研究对象基因组DNA，并以100例无亲属关系正常人的基因组DNA作为对照，以排除可能存在的基因多态性。1.4引物设计采用Primer5.0引物设计软件针对XPA和XPC所有外显子设计引物，扩增序列包括整个外显子及超出目标序列边界（内含子内）50bp的序列。所有引物均由上海生工生物工程有限公司合成，引物采用PAGE胶纯化后稀释为20μmol/L备用。1.5PCR扩增、产物纯化配制PCR反应体系，设定PCR反应条件，使用PCR反应扩增仪（加拿大BBI公司）进行PCR扩增，PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳...