醒脑静注射液HPLC特征图谱研究杨立新冯伟红夏伯候林丽美刘薇薇苗婉清甘国锋邹济高李春[摘要]该研究采用高效液相色谱法建立并分析了不同厂家生产醒脑静注射液的特征图谱。采用ThermoBDSHypersilC18色谱柱（46mm×250mm，5μm）进行分离，流动相为乙腈002%甲酸水溶液，梯度洗脱，流速10mL·min-1，检测波长254nm，柱温35℃，进样量20μL。通过对29批醒脑静注射液的HPLC特征图谱研究，共标定了11个特征峰。经与对照品对比，指认出其中7个特征峰的结构，分别为优香芹酮、樟脑、姜黄烯酮、莪术烯醇、莪术二酮、莪术酮和吉马酮。运用计算机辅助相似性评价系统及主成分分析对所建29批醒脑静注射液的HPLC特征图谱进行分析比较，结果显示不同厂家生产的醒脑静注射液能明显分为3类。该文所建立的HPLC特征图谱为科学评价和有效控制醒脑静注射液质量提供了依据。[关键词]醒脑静注射液；特征图谱；主成分分析；高效液相色谱法[Abstract]ToestablishandanalyzetheHPLCspecificchromatogramsofXingnaojinginjectionmanufacturedbydifferentfactoriesTheseparationwasperformedonaThermoBDSHypersilC18column（46mm×250mm，5μm），withthemobilephaseconsistingofacetonitrile002%formicacidaqueoussolutionforgradientelutionTheflowratewas10mL·min-1，andthecolumntemperaturewas35℃Thedetectionwavelengthwassetat254nm，andthesamplesizewas20μLElevenchromatographicpeakswereidentifiedascharacteristicpeaksofHPLCspecificchromatogramsofXingnaojinginjection，afteranalyzing29batchesofXingnaojinginjectionsamplesComparedwiththereferencesubstances，sevenofthemwereidentifiedaseucarvone，camphor，curcumenone，curcumenol，curdione，curzerenoneandgermacrone，respectivelyHPLCspecificchromatogramsofXingnaojinginjectionmanufacturedbythreefactoriescouldbeeasilyclassifiedintothreecategoriesafterinvestigationwithcomputeraidedsimilarityevaluationsystemcombinedwithprincipalcomponentanalysisTheestablishedHPLCspecificchromatogramsprovideabasisforscientificevaluationandeffectivecontrolofthequalityofXingnaojinginjection[Keywords]Xingnaojinginjection；specificchromatograms；principalcomponentanalysis（PCA）；highperformanceliquidchromatography（HPLC）doi：10.4268/cjcmm20160912指紋图谱技术在中药注射剂标准提高中的应用日趋成熟，对保障药品的有效、均一具有重要的意义。2010年版《中国药典》实施后至2013年，共新颁布实施了24个中药注射剂指纹图谱标准，1个注射用原料标准[1]。2015年版《中国药典》一部正文中明确增加了清开灵注射液和注射用双黄连（冻干）的HPLC特征图谱标准[2]。可见，增加指纹图谱标准是所有中药注射液质量标准提升中必不可少的内容。醒脑静注射液由麝香、冰片、郁金、栀子4味药经水蒸气蒸馏提取而制成，具有清热解毒，凉血活血，开窍醒脑之功，临床上广泛用于多种原因所致脑部疾病，如颅脑外伤、乙型脑炎、脑血管疾病等[3]。该品种现行标准是国家食品药品监督管理局国家药品标准WS3B3353982003[4]，标准中仅规定醒脑静注射液中龙脑含量不得低于07g·L-1，而未涉及指纹图谱的内容。有关醒脑静注射液质量标准研究的文献报道中，几乎全部是对麝香酮和/或龙脑的含量进行测定，检测方法包括气相色谱法（GC）[512]、气质联用法（GCMS）[13]和高效液相色谱法（HPLC）[14]，也未见任何关于其指纹图谱的研究报道。因此，为全面了解醒脑静注射液的化学成分信息并提升其质量控制水平，本研究首次采用HPLC法建立了醒脑静注射液的特征图谱并比较了3个厂家生产醒脑静注射液特征图谱的异同，以为今后该产品质量标准的提升奠定基础。1材料日本岛津LC20AT高效液相色谱仪（包括SIL20A自动进样器，CTO10AS柱温箱和SPDM20A检测器），Labsolutions色谱工作站；1/10万电子分析天平（梅特勒托利多仪器有限公司，瑞士）。莪术二酮（批号E009110603）和吉马酮（批号111665201103）购自成都彼斯特生物科技有限公司。樟脑（批号Z018140801）...