芋脱毒组培苗培养技术探究

增殖倍数可达5.1,并且芽生长健壮;1/2MS+0.15mg/L芋脱毒组培苗培养技术探究摘要研究芋脱毒组培苗培养技术,结果表明:MS+0.5mg/LBA+0.5mg/LKT+0.1mg/LIAA培养基接种不定芽,NAA+0.15mg/LIBA培养基的生根效果最好,培养25d后生根率达93.8%,并且根系粗壮发达;试管苗的假植效果较好,成活率高达85%以上。关键词芋;试管苗;生长素;培养基中图分类号S632.3文献标识码A文章编号1007-5739(2011)12-0109-02芋是天南星科芋属无性繁殖的球根蔬菜,有巨大的市场需求量,种植经济效益显著,长期以来受到广大消费者的喜爱,在南通市高沙土地区栽培面积达0.67万hm2左右。在实际生产中,农民长期采取小面积繁种,由于病虫害侵染病毒积累等原因,造成种性退化、产量降低、品质下降口]。利用组培技术对芋进行脱毒提纯,成功获得了脱毒组培苗。现将试验过程报告如下。1材料与方法1.1供试品种供试品种为香酥芋、白梗芋,均为南通市的地方品种。1.2培养基1.2.1基本培养基。以MS为基本培养基,加琼脂0.7%、糖3%,调节pH值至5.6~5.8[2]o1.2.2增殖培养基。试验共配制了12种增殖培养基:MS+0.3mg/LBA+0.1mg/LNAA、MS+0.4mg/LBA+0.1mg/LIAA、MS+0.5mg/LBA+0.1mg/LIAA、MS+1.0mg/LBA+0.1mg/LIAA、MS+0.3mg/LKT+0.1mg/LNAA、MS+0.4mg/LKT+0.1mg/LNAA.MS+0.5mg/LKT+0.1mg/LIAA.MS+1.0mg/LKT+0.1mg/LIAA.MS+0.2mg/LBA+0.2mg/LKT+0.1mg/LIAA、MS+0.4mg/LBA+0.4mg/LKT+0.1mg/LNAA、MS+0.5mg/LBA+0.5mg/LKT+0.1mg/LIAA、MS+1.0mg/LBA+1.0mg/LKT+0.1mg/LIAAO1.2.3生根培养基。试验共配制了9种生根培养基:MS、MS+0.15mg/LIAA.MS+0.15mg/LNAA.MS+0.15mg/LIBA、1/2MS+0.15mg/LIAA.1/2MS+0.15mg/LNAA.1/2MS+0.15mg/LIBA、MS+0.15mg/LNAA+0.15mg/LIBA、1/2MS+0.15mg/LNAA+0.15mg/LIBAO1.3培养过程1.3.1外植体消毒与灭菌。选择符合条件的子芋顶芽作为外植体,要求具备品种的特征、特性。用流水冲洗4h以上,其表面的残留水分用滤纸吸干[2]。然后对外植体进行消毒,先置于70%酒精中消毒8s再用0.1HgCI2溶液浸泡8min,取出后用无菌水冲洗6遍以上,即完成消毒灭菌工作。1.3.2诱导脱毒试管苗。对经过消毒与灭菌处理的子芋顶芽,在解剖镜下剖掉外层苞片,至露出茎尖生长点[3]。用解剖刀切取生长点0.3mm以下,垂直接入含高浓度激素的培养基(MS+8mg/LBA+0.1mg/LNAA\每只试管只接入1个外植体,以防培养过程中岀现交叉污染。脱毒试管苗的培养条件为室温24-25°C、光照12h/d.光强1500~2000lx,培养45d即可。1.3.3细胞分裂素对不定芽的增殖作用。对培养好的脱毒试管苗丛芽,用枪头银和手术剪剪下分成小株,垂直接种于增殖培养基上进行增殖培养。一般用960mL普通玻璃兰花瓶代替试管,可有效节约生产成本,三角瓶可接入8~10个单株。此阶段的培养可不断重复至所需数量[4]。增殖培养条件为室温24-25°C.光照12h/d.光强1500-2000lx,培养30d即可,最后统计不定芽的增殖情况。1.3.4生长素对试管苗生根的影响。对经过增殖培养获得的不定芽分成单株,选择壮芽分别垂直接入生根培养基[5-6]o25d后观察统计芽体生根情况,与脱毒试管苗的培养条件相同。2结果与分析2.1细胞分裂素对不定芽的增殖作用炭、珍珠岩、田园土混合配制而成3种基质材料的用料比由表1可以看出,BA、KT单独作用对芋不定芽的增殖作用较差,增殖倍数都在2.5以下,BA、KT相互作用对芋不定芽的增殖效果好。MS+0.5mg/LBA+0.5mg/LKT+0.1mg/LIAA培养基的不定芽生长健壮,增殖倍数达5.1;MS+1.0mg/LBA+1.0mg/LKT+0.1mg/LIAA培养基的不定芽较纤细,生根培养较困难,假植成活率低,增殖倍数达5.5。2.2生长素对试管苗生根的影响由表2可以看出,MS培养基的脱毒试管苗几乎不生根,IAA、IBA、NAA单独作用的生根效果都不太好,并且根系不发达。MS浓度减半,NAA、IBA相互作用,即1/2MS+0.15mg/LNAA+0.15mg/LIBA培养基的脱毒试管苗生根效果最好,培养15d后生根率达70.0%,培养25d后生根率达93.8%,并且根系粗长发达。2.3试管苗的假植效果对生根的试管苗,用水洗净根部残留的培养基,将其置于温室环境条件下炼苗7d,假植到培养基质上,基质用泥例为2:1:1o假植拱小棚保温保湿,每天9:00、16:00...

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