松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤生长的抑制作用[摘要]目的探讨松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤生长的抑制作用。方法按标准方法给小鼠接种S180肉瘤细胞，随机分组，分别灌胃给予1000、500、250mg/kg松茸乙醇提取物，10d后观察肿瘤抑制率、免疫器官质量分数、体重的变化及HE染色肿瘤组织结构。结果不同剂量松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤的抑制率分别为41.82%、36.36%、8.48%；脾脏质量分数、胸腺质量分数与肿瘤模型组比较，差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤的生长有抑制作用。[关键词]松茸；S180肉瘤；肿瘤抑制[]R730.51[文献标识码]A[]1673-7210（2012）12（b）-0032-03松茸（Tricholomamatsutake）亦称松蕈、合菌、松蘑（朝鲜族）、松口蘑等，是担子菌纲伞菌目口蘑科（Tricholomataceae）口蘑属（Tricholoma）的一种与松树共生外生菌根真菌。在我国东北地区的吉林省以及西南地区的云南、四川、西藏都有分布。松茸菌肉肥厚，香气宜人，味道鲜美，具有较高的营养价值和药用价值，曾被誉为“食用菌之王”[1-3]。松茸具有很高的药用价值及多种生物活性。据文献报道，松茸具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗真菌、抗糖尿病、抗炎等功效[4]，在27种担子菌抗肿瘤食用菌中，其抗肿瘤活性居第2位[5]。松茸作为一种具有显著抗肿瘤活性的食用菌，具有广阔的开发前景，据文献报道松茸中具有抗肿瘤活性的成分主要是多糖类化合物[5-7]，课题组对松茸抗肿瘤活性部位进行研究的过程中，发现醇提部位MTX也能抑制肿瘤细胞的增殖，同样具有较强的抗肿瘤活性，其活性成分及作用机制值得深入研究。1材料与方法1.1材料小鼠肉瘤S180腹水型肿瘤细胞由武汉大学基础医学院提供；环磷酰胺粉针（200mg/支，批号：10102122），由江苏恒瑞医药股份有限公司生产；昆明种小鼠，雄性，体重18～22g，购自武汉大学动物中心，合格证号：4200592711。1.2方法[8-9]1.2.1松茸乙醇提取物的制备取松茸约5kg，适当粉碎，分次置5000mL圆底烧瓶中，用10倍量95%乙醇回流提取3次，每次分别为3、2、2h，纱布过滤，合并滤液，减压回收乙醇，继续浓缩，得松茸乙醇提取物浸膏约100.82g。1.2.2小鼠移植瘤模型的建立将S180小鼠腹水型肿瘤细胞株接种于腹腔，于7d后脱颈椎处死，用75％乙醇浸泡消毒，无菌抽取腹水瘤细胞，调整细胞浓度为1.3×107/mL，将0.2mL细胞悬液无菌皮下接种于昆明种小鼠左后肢，观察小鼠生长情况，在接种后第6天全部出现瘤块，小鼠移植瘤模型建立成功。1.2.3实验动物分组及给药将小鼠随机分为5组，每组10只，即肿瘤模型组、阳性对照组及松茸乙醇提取物大、中、小剂量组。肿瘤模型组按剂量10ｍL/kg灌胃给予0.5％CMC，阳性对照组按剂量50mg/kg灌胃给予环磷酰胺，松茸乙醇提取物大、中、小剂量组以1000、500、250mg/kg的剂量灌胃给予松茸乙醇提取物；每日1次，连续10d，实验过程中让小鼠自由进食和饮水，第11天停药。1.3观察指标将小鼠称取体重后脱颈处死，分离肿瘤块、脾脏和胸腺组织，称取肿瘤重量，分别计算各组小鼠体重变化平均值、脾脏及胸腺质量分数、肿瘤生长抑制率。肿瘤生长抑制率=（模型组平均瘤重－给药组平均瘤重）/模型组平均瘤重×100％。各组肿瘤组织标本按照常规方法固定，包埋和切片，HE染色进行观察。1.4统计学方法采用SPSS12.0统计软件进行统计学分析。计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析，两组间比较采用t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。2结果2.1实验动物的生长情况昆明小鼠接种S180后，从生长情况来看，肿瘤模型组小鼠精神状态较差，进食量显著减少，行动呆滞，皮毛无光泽。而阳性对照组及松茸乙醇提取物给药组的小鼠，其进食量及运动状态均好于肿瘤模型组，皮毛顺滑。给药前后各组小鼠体重变化见表1。由表1可见松茸乙醇提取物大、中、小剂量组及阳性对照组小鼠体重与肿瘤模型组比较，差异均无统计学意义（均P>0.05）。2.2对免疫器官质量的影响实验对动物脾脏质量分数和胸腺质量分数的影响结果见表2。由表2可知，阳性对照组与肿瘤模型组比较，差异有统计学意义（P0.05）。2.3对小鼠S180肉瘤的生长抑制作用松茸乙醇提取物大、中剂量组小鼠瘤重与肿...