芹菜素在Caco2细胞的摄取研究郭闪+田春鸿+贺元+张晓霞+田莉摘要：目的研究芹菜素在Caco-2细胞的摄取特性。方法采用Caco-2单层细胞模型，研究芹菜素在不同时间、浓度、温度、pH值、P-糖蛋白抑制剂条件下对细胞摄取的影响，采用HPLC测定芹菜素在细胞中的含量。结果芹菜素在0.33～80?g/mL范围内线性关系良好（r=0.9994）。芹菜素在Caco-2细胞的摄取呈现一定的时间、浓度和pH值依赖性，且P-糖蛋白抑制剂不能增加其摄取量。结论该方法操作简单、灵敏，P-糖蛋白未参与芹菜素的转运过程，芹菜素在Caco-2细胞的摄取主要是被动转运。关键词：芹菜素；Caco-2细胞；摄取；高效液相色谱法DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2018.02.017：R285.5：A：1005-5304（2018）02-0074-05UptakeStudyonApigenininCaco-2CellsGUOShan1，TIANChun-hong2，HEYuan1，ZHANGXiao-xia1，TIANLi1，31.CollegeofTCM，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi830011，China；2.MidongDistrictTraditionalChineseMedicineHospitalofUrumqi，Urumqi831400，China；3.XinjiangKeyLaboratoryofFamousPrescriptionandScienceofFormula，Urumqi830011，ChinaAbstract：ObjectiveTostudytheuptakepropertyofapigenininCaco-2cells.MethodsCaco-2cellmonolayermodelwasusedtoresearchtheeffectsofapigeninoncelluptakeindifferenttimes，concentrations，temperatures，pHvalues，andP-gpinhibitors.HPLCwasusedtodeterminethecontentofapigeninincells.ResultsThelinearityofapigeninconcentrationcurvewasfoundingoodlinearrangeof0.33–80?g/mL（r=0.9994）.UptakedeterminationofapigenininCaco-2cellsdependedacertainoftime，concentrationandpHvalues，andP-gpinhibitorscouldnotincreasetheapigeninuptake.ConclusionThismethodissimpleandsensitive.P-gpisnotinvolvedinapigenintransportprocess，anduptakeofapigenininCaco-2cellsismainlypassivetransported.Keywords：apigenin；Caco-2cells；uptake；HPLC芹菜素是一种广泛分布于水果、蔬菜、豆类、茶叶、中药材中的黄酮类化合物，芹菜中含量最高。芹菜素的药理活性较为广泛，具有明确的抗肿瘤、抗氧化、降压、抗炎、抗菌、抗病毒及心脑血管保护等药理作用[1-2]，是一种具有研究潜力的活性成分。芹菜素在高亲水性和非极性溶剂中的溶解性差，几乎不溶于水，但可溶于热乙醇、二甲基亚砜（DMSO）和稀氢氧化钾溶液[3]。鉴于活性成分的药效发挥与其吸收特性密切相关，而目前对芹菜素体内吸收特性的研究较少，本试验采用Caco-2单层细胞模型研究芹菜素的摄取特性，为含芹菜素的中药及其制剂的剂型设计提供药動学依据。1细胞、仪器与试药Caco-2细胞株购自武汉博士德生物工程有限公司，试验所用细胞传代数为20～40代。1220LC高效液相色谱仪（美国Aglient公司），XS105型电子天平（德国梅特勒-托利多公司），TDL-40B型高速冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂），KQ5200DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），超净工作台（苏州净化设备总厂），CO-150型二氧化碳孵箱（美国NBS公司），MX6R型倒置显微镜（宁波舜宇仪器有限公司），SK-1型快速漩涡混合器（江苏金坛医疗仪器厂），pHS-3型精密pH计（上海精科雷磁仪器厂），SpectraMax190酶标仪（美国，MolecularDevices公司）。芹菜素对照品（apigenin，批号150623，纯度≥98%），上海谷研实业有限公司；DMEM培养基、非必需氨基酸、青霉素-链霉素双抗液、胰蛋白酶、Hank's平衡盐溶液（HBSS）、磷酸盐缓冲液，美国Hyclone公司）；胎牛血清，美国Gibco公司；BCA蛋白分析试剂盒，美国Thermo公司；12孔培养板，美国Costar公司；增强型RIPA裂解液（批号AR0102-100），武汉博士德生物工程有限公司；维拉帕米（批号100223-200102）、环孢菌素A（批号130495-201303），中国食品药品检定研究院；二甲基亚砜（分析纯），Sigma公司；甲醇、乙腈（色谱纯），美国FisherScientific公司；超纯水（自制）。endprint2方法与结果2.1Caco-2细胞中芹菜素测定方法的建立2.1.1色谱条件COSMOSILC18色谱柱（250mm×4.6mm，5?m），流动相为乙腈-0.2%磷...