结核分枝杆菌荧光定量聚合酶链反应与噬菌体生物扩增法早期诊断结核性渗出性胸膜炎的应用价值结核分枝杆菌荧光定量聚合酶链反应与噬菌体生物扩增法早期诊断结核性渗出性胸膜炎的应用价值摘要目的：探讨荧光定量聚合酶链反应检测技术与噬菌休生物扩增法在早期诊断结核性渗出性胸膜炎的临床应用价值。方法：对145例结核性渗出性胸膜炎患者行胸腔穿刺抽液术，标本送检结核分枝杆菌的荧光定量聚合酶链反应、噬菌体生物扩增法检测，并对两种方法进行比较。结果：荧光定量聚合酶链反应检测阳性率531%,高于噬菌体生物扩增法324%,P<001有极显著差异，聚合酶链反应检测明显优于噬菌体生物扩增法。结论：结核分枝杆菌的荧光定量聚合酶链反应对早期诊断结核性渗出性胸膜炎有重要的诊断价值;噬菌体生物扩增法有一定参考价值。关键词聚合酶链反应噬菌体生物扩增法结核性渗出性胸膜炎doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.14.253AbstractObjective:TheobjectiveofthispaperistodiscusstheclinicalapplicationvalueoffluoresceneequantitativcPCRandphageamplifiedbiologicallyassayintheearlydiagnosisoftuberculousexudativepleurisy・Methods:145tuberculousexudativepleurisypatientswereoperatedparacentesis.ThesamplesweredetectedbymycobacteriumtuberculosisfluorescencequantitativePCRandphageamplifiedbiologicallyassay.Thenthetwomethodswerecompared.Results:ThepositiverateinfluorescencequantitativePCRwas53.1%,higherthan324%inphageamplifiedbiologicallyassay,P<001,withasignificantdifference,whichshowsfluorescencequantitativePCRisapparentlybetterthanphageamplifiedbiologicallyassay.Conclusion:MycobacteriumtuberculosisfluorescencequantitativePCRisofgreatdiagnosticvalueintheearlydiagnosisoftuberculousexudativepleurisy,andphageamplifiedbiologicallyassayisofcertainreferencevalue・KeyWordsPolymerasechainreactionPCR;Phageamplifiedbiologicallyassay;Tuberculousexudativepleurisy结核性胸膜炎是结核分枝杆菌引起的胸膜炎症病变。对结核性胸膜炎最具有诊断价值的细菌学检查阳性率很低，结核性胸腔积液中抗酸杆菌涂片阳性率仅10%〜20%,培养阳性率也仅25%〜50%。应用PCR检测结核杆菌DNA、噬菌体牛物扩增法检测抗酸杆菌，均对结核分枝杆菌有较高的敏感性[l]o因此使用荧光定量聚合酶链反应（以下简称荧光定量PCR）及噬菌体生物扩增法（以下简称PhaB）针对病原学结核分枝杆菌的检测对早期诊断结核性渗出性胸膜炎有非常重要的意义。现将2008年1月〜2011年10月采集的数据报告如下。资料与方法2008年1月〜2011年10月收治结核性渗出性胸膜炎患者145例，男177例，女105例，年龄16-83岁,平均433±221岁。参照结核性胸膜炎的诊断标准，根据病史、临床症状、体征、胸液的改变、PPD皮试等诊断为结核性渗出性胸膜炎，并经抗结核治疗有效者。方法：145例患者入院后在B超定位下行胸腔穿刺抽液术，胸液同吋送检结核分支杆菌的荧光定量PCR、PhaB检测，根据结果比较阳性率。TB-PCR以浓度103copies/ml作为阳性定量参考。PhaB培养皿中出现大小不等的噬菌斑，且±20个/平皿，或许多噬菌斑和互融合成透明状判定为阳性；平皿中无噬菌斑出现或噬菌斑数量W20个/平皿为阴性。用SPSS110系统软件进行检查数值。木实验使用LightCycler荧光定量PCR仪。结果145例患者中，检测结核性胸膜炎阳性率对比。荧光定量PCR阳性77例，阳性率531%；PhaB阳性47例,阳性率324%。两种方法联合检出阳性率586%。见表1。SPSS统计软件处理(X2)：计算P<001差异有极显著性。说明聚合酶链反应检测明显优于PhaBo讨论结核性胸膜炎是由结核分枝杆菌及其代谢产物进入处于超敏状态的机体胸腔中所引起的胸膜炎症。细菌学检查是确诊结核性胸膜炎的可靠标准，但临床上通过胸液沉渣找结核分枝杆菌或结核分枝杆菌培养的阳性率很低，以及检验周期长等，造成对结核性胸膜炎早期诊断有一定的困难。荧光定量PCR方法的基本原理为PCR扩增时，在加入1对引物的同吋，加入1个特异性的寡核甘酸荧光探针，两端分别标记1个报告荧光...