Caspase-3,-9在乳腺癌合并2型糖尿病患者癌组织中的表达及意义Caspase-3,-9在乳腺癌合并2型糖尿病患者癌组织中的表达及意义【摘要】冃的探讨细胞凋亡效应因子半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)及半胱天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)在乳腺癌合并2型糖尿病患者癌组织及单纯乳腺癌患者癌组织中的表达。方法应用免疫组织化学方法检测单纯乳腺癌患者(单纯癌组)及乳腺癌合并2型糖尿病患者(糖癌组)癌组织石蜡标本中caspase-3和caspase-9的表达变化。结果单纯癌组及糖癌组癌组织中caspase-3及caspase-9表达有差异,糖癌组两者表达均低于单纯癌组，两者吸光度值分别为(0・313±0・001)、(0.223±0.002)(p<0.01),(0.362±0.001)、(0.247±0.001)(p<0.01),有统计学意义。结论:Caspase-3、caspase-9表达在两组内均与肿瘤的大小、淋巴结转移数目、患者年龄、组织学分级均无统计学意义(P>0.05)。但糖癌组患者在肿瘤体积、区域或远处淋巴结转移及组织学分级比单纯癌组更严重，有统计学意义(P〈0・05),而ER、PR及HeHer-2表达在糖癌组和单纯癌组间无明显差异(P>0.05)oCaspase-3及caspase-9参与了乳腺癌合并2型糖尿病的发生发展，可能是乳腺癌合并2型糖尿病患者预后不良的机制之一。【关键词】半胱天冬氨酸蛋白酶-3；半胱天冬氨酸蛋白酶-9；乳腺癌合并2型糖尿病【】R587.1R737.9【文献标识码】A【】2095-6851(2014)04-0004-01近几年，越来越多的国内外研究发现糖尿病患者发生乳腺癌的风险明显增高^[l-3]o且糖尿病增加乳腺癌发病率、死亡率并预后不良。其发病机制不详，国内外研究报道较少。本研究利用免疫组化方法观察细胞凋广效应因子半胱天冬氨酸蛋口酶-3(caspase-3)及半胱天冬氨酸蛋口酶-9(caspase-9)在乳腺癌合并2型糖尿病患者癌组织及单纯乳腺癌患者癌组织中的表达变化，探讨糖尿病增加乳腺癌发病率、死亡率增多的可能机制之一。1资料与方法1.1一般资料我们回顾分析了河北医科大学第四医院收治的自2011年1月至2012年2月住院的乳腺癌患者石蜡切片标本及住院病例资料，其中抽取乳腺癌合并2型糖尿病患者(糖癌组)99例，且2型糖尿病发病时间均超过5年,该组病人的诊断符合1999年世界卫生组织(Worldhealthorganization,WHO)提出的诊断标准，均在二级以上医院副主任医师以上临床诊断，无明显自发酮症倾向，以口服降糖药控制血糖，均未使用胰岛素治疗，血糖控制不佳，糖化血红蛋口(HbAlc)均大于7.5%。随机抽取同吋间段除外2型糖尿病的单纯乳腺癌患者(单纯癌组)120例做对照组，两组均经手术病理证实为乳腺癌，术前均未行放化疗治疗，且两组患者均除外患有高血压病、免疫性疾病等全身性疾病。其中乳腺癌合并2型糖尿病组患者99例，年龄35〜81岁,平均(53.2±9.0)岁;组织学类型:浸润性导管癌85例，浸润性小叶癌6例，乳腺髓样癌3例，低分化腺癌2例，孚L腺浸润性导管癌合并黏液腺癌1例，孚L腺浸润性导管癌合并浸润性小叶癌1例,乳腺浸润性导管癌伴有肉瘤样变1例。单纯乳腺癌组患者120例，年龄34〜79岁，平均(485±10.0)岁，组织学类型：浸润性导管癌112例，浸润性小叶癌6例，乳腺浸润性导管癌合并浸润性小叶癌2例。两组患者年龄经以乳腺癌为因变量进行非条件Logistic回归分析认为没有差异性(卩〉0.05)。1.22型糖尿病诊断标准糖尿病诊断标准为1999年世界一卫生组织(WHO)发布标准：满足以下任意1项即是，(1)糖尿病症状+任意时间血浆葡萄糖三11・1mmol/L(200mg/dl)；(2)空腹血浆葡萄糖(FPG)^7.Ommol/L(126mg/d1)；(3)餐后2h血糖^11.1mmol/L(200mg/dl)o1.3试剂一抗FN,CTGFSMA兔抗IgG多克隆抗体购于博士徳生物技术有限公司，PCNA鼠抗IgG单克隆抗体。SP9001试剂盒及DAB显色剂购于北京中山生物技术有限公司。1.4方法两组病例均手术后取乳腺癌组织标本，经10%中性福尔马林液固定，常规石蜡包埋，切片，分别进行苏木素-伊红(HE)染色，并光镜病理复查确诊，诊断标准根据2003年WHO组织学分类标准^[4]oCaspase-3和caspase-9的检测采用链亲和素-生物素-过氧化物酶法(streptavidin-biotin-immunoperoxidase,S~P)o简单操作步骤如下：连续石蜡切片，厚411111。石蜡切片常规脱蜡至水，3%甲醇-过氧化氢溶液室温下避光...