A知道B理解C看看传统发酵：最初发酵是用来描述酵母菌作用于果汁或麦芽汁产生气泡的现象，或是指酒的生产过程。生化和生理学意义的发酵：指微生物在无氧条件下，分解各种有机物质产生能量的一种方式。在无氧等外源氢受体的条件下，底物脱氢后所产生的还原力[H]未经呼吸链传递而直接交某一内源性中间代谢物接受，以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧化反应。如葡萄糖在无氧条件下被微生物利用产生酒精并放出CO2。工业上发酵发酵：利用微生物在有或无氧条件下的生命活动来生产微生物菌体或代谢产物的过程。微生物工程涵义微生物工程是渗透有工程学的微生物学。利用微生物的特定性状、功能，通过现代化工程技术，生产各种生理活性物质的技术体系是在酵母发酵生产饮料酒的基础上发展起来的，又称为发酵工程是将传统发酵技术与基因工程、细胞工程、代谢工程和计算机自动控制等新技术结合并发展起来的现代发酵技术微生物工程的发展阶段1天然发酵阶段2纯培养技术的建立：巴斯德，科赫等。人为地控制微生物的发酵进程。3通气搅拌发酵技术的建立4代谢控制发酵技术5开拓发酵原料时期6基因工程阶段定向地改变生物性状发酵的流程见笔记第二章国外菌种保藏中心美国典型微生物菌种保藏中心(ATCC)英国国家典型菌种保藏所(NCTC)日本大阪发酵研究所（IFO）法国巴斯德研究所（IPL）国内菌种保藏中心1普通微生物菌种保藏管理中心(CCGMC)中科院微生物所，北京：真菌、细菌中科院武汉病毒所，武汉：病毒2农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC)农科院土壤肥料所，北京3工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)中国食品发酵工业科学研究所，北京菌种筛选主要步骤和掌握一种菌的分离方法见笔记诱变育种：利用诱变剂处理微生物细胞，提高基因突变频率，再通过合适的筛选办法获得所需的高产优质菌种的方法物理诱变剂：射线如紫外线、X—射线、γ—射线，快中子等化学诱变剂：化学因子如碱基类似物、5—氟尿嘧啶、烷化剂等。化学诱变剂中使用最多、最有效的是烷化剂C诱变剂的选择1．碱基类似物和羟胺具有很高的特异性，但很少使用，回复突变率高，效果不大。2．亚硝酸和烷化剂应用较广，造成的遗传损伤较多。其中亚硝基胍和甲基磺酸乙酯常被称为“超诱变剂”，甲基磺酸乙酯是毒性最小的诱变剂之一。3．吖啶类诱变剂可以造成生化代谢途径的完全中断。4．紫外线仍十分有效。电离辐射是造成染色体巨大损伤的最好诱变剂，它能造成不可回复的缺突变。但它可能影响邻近基因的功能。诱变育种步骤1出发菌株的选择2处理菌悬液的制备3诱变处理4中间培养5分离和筛选出发菌株的选择4．出发菌株开始时可以同时选2～3株，在处理比较后，将更适合的出发菌株留作继续诱变。中间培养由于在发生了突变尚未表现出来之前，有一个表现延迟的过程，即细胞内原有酶量的稀释过程(生理延迟)，需3代以上的繁殖才能将突变性状表现出来。少一个营养缺陷型是指通过诱变而产生的缺乏合成某些营养物质如氨基酸、维生素或碱基等的能力，必须在其基本培养基中加入相应的营养成分才能正常生长的变异株。筛选营养缺陷型的步骤1诱变2淘汰野生型3检出缺陷型4确定生长谱少一个营养缺陷型应用工程菌的稳定性问题工程菌在发酵生产和保存过程中表现出不稳定性，具体表现为：质粒的丢失；重组质粒发生DNA片断脱落；表达产物不稳定。在生产上常常表现为有质粒的工程菌生长状况不如无质粒的宿主细胞，使发酵受到影响，产量降低。措施①组建合适载体，引入一段特殊DNA片断或基因使宿主细胞分裂时，质粒能较稳定的遗传到子代细胞中；②选择适当宿主，相对而言重组质粒在大肠杆菌中的稳定性大于枯草杆菌和酵母；③施加选择压力，即利用某些生长条件使得只有那些具有一定遗传特性的细胞才能生长，常用方法有抗生素添加法、营养缺陷型法等；④控制外源基因过量表达，外源基因表达水平越高，重组质粒往往越不稳定；⑤控制培养条件，这是工业化生产关键步骤；⑥将质粒上不需要的DNA部分除去原生质体：在人为的条件下，除去细胞壁或抑制新生细胞壁的合成，得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状的渗透敏感的细胞。A原生质体融合育种的特点：1杂交频率较高2受接合型或致育型的限制...