摘要】目的利用维Ａ酸对实验性大鼠慢性阻塞性肺疾病的干预，检测其基质金属蛋白酶(MMP)的变化。方法Wistar雄性大鼠36只，随机分为正常对照组、模型组和用药组，每组12只。将模型组大鼠放入染毒箱内，每天被动吸烟2次，每次16支(30min)，2次间隔4h，连续75d；用药组每天被动吸烟染毒前通过胃管给大鼠灌胃维A酸15mg/kg，共75d；对照组气管内滴入等量的生理盐水25d后处死大鼠。模型组大鼠用药后观察各组大鼠肺组织的病理改变，免疫组化方法及酶联免疫试验观察肺组织基质金属蛋白酶表达情况。结果模型组MMP2和MMP9的活性分别为(1.03±0.21)ng/ml、(0.984±0.182)ng/ml,其表达与正常对照组〔(0.49±0.15)ng/ml、(0.415±0.084)ng/ml〕比较差异有显著性(P＜0.01)；用药组MMP2和MMP9的活性〔(0.91±0.19)ng/ml、(0.670±0.012)ng/ml〕和表达与模型组比较差异有显著性(P＜0.01)。结论维A酸对慢性阻塞性肺疾病防治及治疗有很好的作用。【关键词】基质金属蛋白酶；慢性阻塞性肺疾病；维A酸慢性阻塞性肺疾病（COPD）是由多种因素引起的疾病，既有环境因素，又有自身因素，是一种不能完全可逆的气流受限为特征的疾病，探索经济有效的防治方法是众多国内外学者关注的领域，维生素Ａ及其活性衍生物在这方面已初步显示了良好前景。目前用维生素Ａ预防COPD的研究才刚刚起步，对基质金属蛋白酶的影响研究甚少，其影响机制尚未清楚。本文利用维Ａ酸对实验性大鼠慢性阻塞性肺疾病进行干预，探讨其基质金属蛋白酶的变化。1材料与方法1.1动物Wistar雄性大鼠36只（购于中南大学动物部），12周龄，体重(274±29)g。随机分为正常对照组、模型组和用药组，每组12只。1.2COPD模型制备将模型组的大鼠放入的有机玻璃制成的染毒箱内，在其右上角开通一个直径1cm的通气孔。大鼠每天被动吸烟2次；每次16支(30min)，2次间隔4h，连续75d。被动吸烟染毒方法：将点燃的香烟（购买的长沙卷烟厂生产的白沙牌香烟）通过三通将烟雾吸入100ml的注射器中，关闭吸烟通路一端，再打开三通的另一端将烟雾注入染毒箱内进行大鼠被动吸烟染毒。用药组每天被动吸烟染毒前通过胃管给大鼠灌胃维A酸15mg/kg（上海第六制药厂生产），共75d。正常对照组气管内滴入等量的生理盐水，25d后处死大鼠用于实验观察。1.3基质金属蛋白酶的测定实验各组于吸烟染毒结束后次日取大鼠右中叶肺组织，制成冰冻切片，同上进行MMP2和MMP9的免疫组织化学染色，阳性反应为胞浆呈棕褐色。应用MMP2和MMP9检测试剂盒以酶联免疫试验(ELISA)进行MMP2和MMP9的活性检测（用武汉博士德公司生产的ELISA方法试剂盒进行活性测定）。1.4统计学处理采用SPSS10.0版统计软件进行F检验。2结果2.1病理改变模型组的大鼠大体观察可见肺体积较正常对照组明显增大，颜色苍白，弹性减弱，有多少不等的肺泡融合形成大疱。光镜下观察可见肺泡管、肺泡囊和肺泡明显扩张，肺泡壁变薄并有不同程度的断裂。用药组大鼠的支气管黏膜上皮脱落较模型组明显减轻,炎性细胞浸润以及肺泡壁断裂和肺泡腔扩大情况亦较模型组减轻，较对照组重。2.2肺组织MMP2和MMP9的的免疫组化结果见表1。模型组与对照组大鼠比较,支气管、肺组织中MMP2和MMP9的相对含量显著增加。模型组与用药组比较含量明显减少(P＜0.01)。表1MMP2和MMP9蛋白相对含量(略)2.3支气管肺泡灌洗液中MMP2和MMP9的活性测定模型组与对照组比较,用药组与模型组比较,差异均有显著性(P＜0.01）（表2)。表2各组大鼠支气管肺泡灌洗液中MMP2和MMP9活性比较(略)3讨论COPD是一种不能完全可逆的气流受限为特征的疾病，气流受限进行性发展，多与肺部对有害颗粒与气体的异常炎症反应有关。维生素Ａ能够调节肺的形态发生和细胞分化；具有抗感染作用，不仅促进弹性蛋白酶的合成，而且阻止其降解。近年来一些研究均表明，COPD患者体内及实验性大鼠肺气肿模型中维生素A水平下降，而且其水平与气道阻塞程度呈负相关〔1，2〕。基质金属蛋白酶参与COPD的发病机制主要是通过破坏肺泡基质成分，使肺泡腔扩大，肺泡弹性回缩能力减弱，从而导致气体滞留。另一方面，通过介导炎症细胞聚集和破坏上皮/内皮结构，参与炎症反...