叶绿酸铜钠对结直肠肿瘤抑制作用实验探［摘要］目的：研究叶绿酸铜钠(CHL)对DMH(1,2-二甲基腓二盐酸盐)诱导的小鼠结直肠肿瘤的抑制作用。方法：80只幼鼠(4〜5周)随机分为阴性对照组(NC组)、阳性对照组(DMH组)、CHLA组和CHLB组。DMH组和CHL组背部皮下注射DMH诱癌；NC组背部皮下注射生理盐水作对照。以CHL灌胃处理CHLA和CHLB组动物。处死小鼠后，解剖小鼠结直肠，固定，观察肿瘤发生情况，免疫组化染色示PCNA、Ras-p21及caspase-3等细胞增殖及凋亡相关因子的表达情况。结果:两CHL干预组小鼠结直肠肿瘤发生率与DMH组相比，差异无统计学意义(P>0.05)；但其平均每鼠荷瘤数及结直肠癌百分率都显著低于DMH组(P0.05)；两CHL干预组小鼠肠黏膜PCNA、Ras-p21蛋白表达水平均显著低于DMH组(P0.05)□结论：CHL在诱癌起始阶段和始发后阶段给药均可抑制DMH诱导的小鼠结直肠肿瘤的发生，降低每鼠平均荷瘤数及肠癌百分率，这可能与其下调结直肠黏膜PCNA,Ras-p21水平，从而间接调控细胞增殖和凋亡平衡有关，CHL有望成为预防结直肠癌的理想化学制剂。［关键词］叶绿酸铜钠；小鼠；结直肠肿瘤［中图分类号］R735E文献标识码］A［文章编号]1673-7210(2008)07(b)-020-03RestTainingeffectofSodiumCopperChlorophyllinoncolorectalcancerofmiceWANGQing,WANGXin-ming(DepartmentofAnatomy,WeifangMedicalCollege,Weifang261042,China)[Abstract]Objective：Toresearchpossiblerestrainingeffectofsodiumcopperchlorophyllin(CHL)onDMH-inducedcolorectaitumourinmice・Methods：80mice(male)(4〜5weeks)wererandomlydividedintonegativecontrolgroup(NCgroup,inwhichthemiceweregivenhypodermicinjectionofphysiologicalsaline),DMHgroup,CHLAgroupandCHLBgroup(themiceinthesethreegroupsweregivenhypodermicinjectionofDMHontheback,thoseinCHLgroupweregivenCHLintragastrieadministration).Thewholecolonandrectumweredissectedtoobserveshapeanddistributionoflargeboweltumour,markedwithnumber,fixedandimmunohistochemistrystains・ResuIts：TherewasnosignificantdifferencebetweenincidenceofcolorectaicarcinomaofCHLgroupandDMHgroup(P>0.05).Whileincidenceofcolorectaicancer,averagenumberoftumour,andthepercentageofcarcinomainthesetumoursofCHLgroupwereallsignificantlylowerthanthoseofDMNgroup(P0.05).Infurthermechanismexploration,PCNAandRas~p21expressionlevelofCHLtreatedgroupswerebothfoundtobeelevatedthanthoseofDMHgroup(P0.05)treatment・Conclusion：CHLcansuppresstheincidenceofDMH-inducedcolorectaitumourinmice,whetheritisgivenattheinitiationorinthemiddleofDMHtreatmerit.ThiseffectmaybepartlyattributedtoCHL"sreducingeffectonPCNAandRas~p21expressionandthesubsequentsuppressioneffectonexcessivecellproliferaticrn..Keywords]SodiumCopperChlorophyllin；Mice；Colorectalcancer恶性肿瘤严重危害人类健康，长期以来，人们一直在寻求高效低毒的肿瘤防治药物。近年来，叶绿素在肿瘤防治中的相关研究及应用日益受到国内外学者和临床工作者的关注。叶绿素(chlorophyll)是广泛存在于绿色植物中的一组脂溶性镁吓咻络合物，经过化学修饰可转化成稳定的水溶性衍生物-CHL,其为含有四个毗咯环的二氢13卜吩结构，对人体毒性小，易吸收，动物试验中，叶绿素及其衍生物具有抗诱验第1、8周起,以1.0mg/kg剂量的CHL隔日1次灌胃至变活性及抑制肿瘤细胞的作用。它可以降低多种化学诱变剂诱导的微核形成[1,2],减少微核细胞的比例[3],抑制癌细胞增殖[4,5],通过改变细胞分化标志物的表达而限制癌的侵袭和转移[6],对化学致癌剂诱导的肝、肺、肠、乳腺,皮肤等肿瘤有抑制作用[7-9]o有关CHL用于结直肠癌的预防研究国内外有关报道还很少。本实验中用化学致癌剂诱导小鼠结直肠肿瘤，并在诱癌的不同阶段给予CHL,观察其对结直肠肿瘤的抑制作用。1材料与方法1.1动物分组及处理雄性昆明种小鼠80只（4~5周）,体重（1&0±1.9）g,由潍坊医学院实验动物中心提供，随机分为4组。正常对照（N...