自体DC-CIK细胞联合替吉奥治疗中晩期肝癌的疗效观察【摘要】目的：观察中晚期肝癌患者行自体DC-CIK细胞联合替吉奥治疗的临床疗效及不良反应。方法采集48例中晚期原发性肝癌患者外周血单个核细胞，加入细胞因子定向诱导DC及CIK,8d后将扩增的DC及CIK细胞以静脉回输的方式，对患者进行自体DC-CIK细胞输注治疗，同时联合口服替吉奥治疗。结果自体DC-CIK联合替吉奥治疗12周后CRO例PR10例,SD22例，PD16例，总有效率(RR)为20.8%,疾病控制率(DCR)为66.7%。患者免疫功能提高，生活质量改善。结论自体免疫细胞联合替吉奥治疗中晚期肝癌疗效尚可，副作用小，安全性好。【关键词】树突状细胞(DC)；细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)；替吉奥；肝癌；【中图分类号】R9145【文献标识码】B【文章编号】1004-4949(2014)04-0150-02原发性肝癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一，全球发病率逐年上升，已超过62.6万/年，而我国占全球总数的55%,每年约有30万人死于肝癌，在肿瘤相关死亡中位居第二为，仅次于肺癌［1］。尽管外科手术水平和肝癌移植技术已经取得了巨大的进步，但由于肝癌起病隐匿，侵袭生长迅速，80%以上的肝癌患者在确诊时已存在肝癌播散、远处转移、门脉癌栓或伴有严重的肝硬化，不能进行手术，甚至是介入、微波等治疗均存在限制，包括全身化疗在内的非手术疗法仍不失为延长生存、提高生活质量的重要方法。随着替吉奥、卡培他滨等新型化学治疗药物的问世，口服单药化疗逐渐成为临床上采用的姑息性治疗方法[2]o肿瘤生物免疫治疗做为一种新兴的治疗手段成为近年来肿瘤治疗领域关注的热点问题。树突状细胞(DendriticcellsDC)是目前已知体内功能最强的抗原提呈细胞。细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-inducedkillercellsCIK)是一种在体外经细胞因子诱导、增殖而得的具有抗瘤谱广、杀瘤活性高的特性的免疫活性细胞。为此，本研究采用DC-CIK自体免疫细胞联合替吉奥治疗48例中晚期肝癌患者，取得一定疗效，现报告如下。1资料与方法1.1病例资料1.1.1入选标准：(1)经影像学或病理活检确诊的中晚期肝癌患者，无法行手术治疗，不适合或不考虑行肝动脉栓塞化疗者；(2)患者自愿接受上述治疗并签署同意书；(3)肝功能Ch订d-Pugh分级为A或B患者；(4)各项常规、生化检查指标无相关禁忌症；(5)Kamofsky评分$60,无严重的心、肺、肾功能障碍及全身恶液质情况；(6)预计生存期大于3个月；（7）无明显感染，无精神类疾病。1.1.2研究对象：我科2011年1月-2013年5月经检查确诊为中晚期肝癌的患者48例，其中男34例，女14例，年龄31-72岁，平均年龄48.6岁，经影像学或病理活检确诊但无法行手术治疗，不适合或不同意行肝动脉栓塞化疗者。巨块型肝癌26例，多发结节型肝癌22例，其中外科手术失败或术后复发患者占9例。患者肝内病灶大小在2X3cm-13.0X15.1cm之间，含肝硬化、门静脉及下腔静脉癌栓、腹腔积液、黄疸、远处转移者。28例病例有原发病或/和转移瘤的病理学或组织细胞学证据，所有病例均有相应的影像学资料，有可见原发灶或/和转移病灶可供评估疗效。1.2治疗方法所有入组病例均先行外周血单核细胞采集，标本送实验室行DC-CIK细胞培养及扩增，后开始口服替吉奥治疗，细胞培养完成后安排自体DC-CIK细胞输注治疗。12周为1个疗程，如无明显不良反应则重复疗程。治疗期间每周查血常规1次，每2周查肝功能1次，白细胞计数1.5m2,S-l60mg/次，2次/d,早饭后和晚饭后分别口服1次，连续服用28d（4周），停药14d（2周）。12周为1个疗程。1.2.2DC-CIK治疗（1）细胞分离经CS-3000血细胞分离机采集患者外周血5L中的新鲜抗凝外周血单核细胞，再用聚蔗糖400（Ficoll400)分离后经Hank's液洗3次，收集纯度在90%以上的外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMNC)o(2)CIK体外培养和扩增将PBMNC加入到含1000U/mLIFN-y和自体血清的完全培养基中，调整细胞浓度至2.0X106个/mL,24h后加入IL-21000U/mL和CD3单抗0.5ug/mL,后根据CIK生长情况每隔2d〜3d适时补充培养基和IL-2,置于37。C,5%C02培养箱中培养10d〜14d后。每周2次测定白细胞增殖率和CD3、CD56阳性细胞率，当细胞数扩增达到设计目标，阳性目标细胞达到85%时，离心收集细胞，同时...