草珊瑚种子离体培养研究初探

草珊瑚种子离体培养研究初探付燕?万新屏摘要以草珊瑚种子作为外植体,研究了赤霉素和NaOH浸种、升汞处理时间长短、不同培养基和植物生长调节剂对草珊瑚种子离体培养的影响。结果表明:0.02%赤霉素浸种24h不仅可以提高草珊瑚种子萌芽率,还可以缩短萌发时间;采用0.1%升汞处理种子3min,种子的污染率仅1.17%;草珊瑚种子初代培养的最佳培养基为1/4MS+0.5mg/L6-BA+0.05mg/LNAA+30g/L蔗糖+5g/L琼脂,萌芽率达78.87%;最佳增殖培养基为MS+4.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+5g/L琼脂,丛生芽诱导率达82.96%。关键词草珊瑚;种子;离体培养;赤霉素;植物生长调节剂:R282.1:A:2095–3305(2020)08–0–02AbstractSeedswereusedasexplantstostudytheeffectsoftheimmersionofGA3andNaOH,thedurationofmercury-risingtreatment,differentmediaandplantgrowthregulatorontheinvitrocultureofSarcandraglabra.Theresultsshowedthatimmersion24hourswith0.02%GA3couldnotonlyimproveseedgerminationrate,butalsoshortengerminationtime;Thecontaminationrateofseedswasonly1.17%with0.1%HgCl2treatmentfor3min;Thebestculturemediumfortheprimarycultureofseedwas1/4MS+0.5mg/L6-BA+0.05mg/LNAA+30g/Lsucrose+5g/Lagarophyte,thegerminationratewas78.87%;ThebestmediumforproliferationwasMS+4.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+30g/Lsucrose+5g/Lagarophyte,andTheinducedrateoffascicledshootsreached82.96%.KeywordSeeds;Sarcandraglabra;Invitroculture;GA3;PlantgrowthregulatorDOI:10.19383/j.cnki.nyzhyj.2020.08.009草珊瑚(Sarcandraglabra(Thunb.)Nakai)是金粟兰科,属多年生常绿草本,主要分布于中国安徽、浙江、江西、福建、四川、贵州、云南等地。草珊瑚株供药用,能清热解毒、祛风活血、消肿止痛、抗菌消炎[1]。随着草珊瑚药用价值的不断开发,目前草珊瑚已逐渐由挖掘野生资源转为人工种植,但种苗繁育技术一直是限制草珊瑚大面积种植的因子[2]。目前生产中主要采用种子育苗和扦插育苗两种方式繁育种苗,繁殖系数较低。通过植物组培快繁技术,能极大地提高育苗系数,满足生产用苗所需。以成熟的草珊瑚种子为外植体,以清水为对照,比较赤霉素和NaOH浸种对种子萌发效果的影响,同时通过对培养基和植物生长调节剂的筛选,研究草珊瑚离体再生体系,为生产中草珊瑚种苗繁育提供技术支撑。1材料与方法(1)草珊瑚成熟果实采至天柱县林下野生草珊瑚植株,采集后去掉果肉,清水冲洗干净,放阴凉通风处备用。(2)外植体的处理。接种之前,外植体用0.02%的赤霉素溶液浸泡24h和0.5mol/LNaOH溶液浸泡处理24h,以清水为对照,浸泡后除去漂浮种子,流水冲洗10min,接种到1/4MS+0.5mg/L6-BA+0.05mg/LNAA,比较赤霉素和NaOH浸种对种子萌发的影响。在超净工作台上,先用75%的酒精浸泡30s,无菌水冲洗3~4次,分别用0.1%升汞浸泡3min、5min和7min,浸泡过程中不停振荡液体,再用无菌水冲洗3~4次。比较0.1%升汞不同处理时长对种子污染和萌发率的影响。处理后的种子分别接种到三种初代培养基上:MS+0.5mg/L6-BA、1/2MS+0.5mg/L6-BA、1/4MS+0.5mg/L6-BA、1/4MS+0.5mg/L6-BA+0.05mg/LNAA。每瓶接种3颗种子,每个处理30瓶。观察并统计各培养基中外植体诱导分化出芽的情况。发芽率(%)=(萌芽种子数/接种种子总数)×100%;污染率(%)=(污染种子数/接种种子总数)×100%;褐化率(%)=(褐化种子数/接种种子总数)×100%。(3)种子萌芽后,将芽转移到增殖培养基上进行增殖培养。增殖培养基为:MS+2.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA、MS+3.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA、MS+4.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA、MS+3.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA、MS+4.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA。每個处理接种30个芽,试验重复3次。(3)培养条件。所有培养基附加30g/L蔗糖和5g/L的琼脂,培养条件为25℃,每天光照12h,光照强度1500~2000lx。(5)数据分析。试验数据用spss19.0软件进行统计分析,并用Duncan't法作显著性差异分析。2结果与分析2.1升汞不同处理时长对种子污染率和萌发率的影响用0.1%的升汞处理草珊瑚种子,不同处理时长对种子的萌发有一定的影响...

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