固定化浓缩光合细菌对养殖水环境的影响[摘要]为探索养殖水环境的生物修复作用,进行了固定化光合细菌对养殖水环境的生物修复试验。结果表明,接种固定化光合细菌后12d,养殖水体的COD值、氨氮分别降低54.29%、80%,DO值上升44%,pH值上升到8.8。表明,应用固定化光合细菌有利于降低水产养殖水体的污染,从而促进养殖业的健康发展。[关键词]固定化光合细菌;水产养殖;生物修复EffectofImmobilizedPhotosyntheticBacteriaonWaterEnvironmentinAquacultureAbstract:Theeffectofimmobilizedphotosyntheticbacteriaonwaterenvironmentinaquaculturewasstudiedtoprobethebioremediationofwaterenvironmentinaquaculture.TheresultsshowedthatCODandammonianitrogenvalueofaquaculturewaterinoculatedwithimmobilizedphotosyntheticbacteriareducedby54.29%and80%respectively,andit.sDOandpHvaluewentupby44%andto8.8,whichindicatedthatimmobilizedphotosyntheticbacteriacanimprovewaterqualityinaquacultureeffectivelyforhealthydevelopmentofaquaculture.Keywords:immobilizedphotosyntheticbacteria;aquaculture;bioremediation生物修复是国内外近10a发展起来的最新环境工程技术,已被成功地应用于土壤、城市河湖、地下水、近海洋面、农业、畜牧业等多个领域,并成为20世纪环境科技发展最快的高新技术领域之一[1-2]。与传统掠夺式养殖模式不同,生物修复技术应用于水产养殖,并非通过大量使用高营养的饵料和抗生素提高养殖产量,而主要通过生物-生态措施,修复受损的池塘生态系统,加速生态系统的物质循环和能量循环,增加水体溶氧,改善水质和池塘自净能力,提高水产养殖的产量和品质[3]。把生物修复技术应用到水产养殖环境修复中,对恢复和优化水产养殖环境,推动水产养殖业的可持续发展具有重大意义[4-5]。光合细菌(PhotosyntheticBacteria,PSB)是一类在厌氧条件下进行光合作用的细菌总称。在水产养殖业中,光合细菌可改善水质,稳定养殖环境,增进鱼虾的免疫力,预防疾病。同时,光合细菌的菌体蛋白质含量高达65%以上,各种维生素、辅酶等生物活性物质含量丰富,可以作为鱼虾的饵料及饵料添加剂。光合细菌作为重要的微生物资源,对其进行研究开发应用具有重要的意义。为此,笔者于2010年进行了光合细菌固定化对养殖水体中化学需氧量(COD)值、溶解氧(DO)、氨氮及pH值的影响试验,以考查对养殖水环境的生物修复作用。1材料与方法1.1试验材料1.1.1光合细菌菌种由红假单胞菌属的球形红假单胞菌和荚膜红假单胞菌组成,分离自洛河水域,洛阳师范学院微生物实验室保存。1.1.2试验水体水源取自洛阳师范学院水产研究所锦鲤育苗池塘,过滤,以减少杂质的影响。1.1.3培养基光合细菌基础培养基(g/1000mL蒸馏水):CH3COONa3.0g,NaCl1.0g,(NH4)2SO40.3g,MgSO40.2g,KH2PO40.5g,K2HPO40.3g,CaCl250mg,酵母膏0.1g,MnSO42.5mg,FeSO45mg,蛋白胨10mg,谷氨酸0.2mg,pH值7.4,121e蒸汽灭菌20min。1.2试验方法1.2.1光合细菌的培养用250mL磨口瓶,培养基装液量200mL,温度28e,接种量5%,800lx光照下静置培养8d左右(菌液OD660可达2.0以上,其中光合细菌含量达3@109cfu/mL)。将培养菌液作为种液,在10L的透明塑料桶内(温度28e,60W白炽灯距离20cm)光照培养7~10d,培养液便由无色变为深红色且浑浊,若是夏季将菌液直接贵州农业科学2011,39(6):152~154GuizhouAgriculturalSciences放置于室外培养即可。1.2.2光合细菌固定化称取一定量的海藻酸钠加水加热,配成5%的海藻酸钠溶液,灭菌后冷却到室温。光合细菌的浓缩采用6000r/min离心法,即经无菌蒸馏水洗涤、离心10min,弃去上清液,洗涤2次,与海藻酸钠溶液以1B2的体积比混合,在磁力搅拌器上搅拌使菌体均匀,然后在CaCl2溶液中交联2h后用蒸馏水冲洗,最终得到直径约为3mm的固定化小球。使用前将固定化浓缩光合细菌在培养基中活化24h,使海藻酸钠内光合细菌的活性得到恢复和强化。1.2.3生物修复试验用桶装试验水体10L。对照组不投放光合细菌,试验组添加固定化浓缩光合细菌,浓度50mg/L,设3次重复。温度控制在28e左右,从加入菌开始每隔3d从桶中取水样,每次采样时间固定在上午8:00,将无菌的带玻璃塞瓶瓶口向下浸入距水面...