收稿日期:2010－08－17作者单位:1.大连医科大学附属第二医院药剂科,大连116027;2.大连医科大学药学院,大连116044*通讯作者西罗莫司血药浓度测定方法的建立及在肝移植患者中的应用张宁1,吕慧怡1*,邓卅2,范青1[摘要]目的建立高效液相色谱法测定西罗莫司血药浓度,测定该药在肝移植患者中的药代动力学参数。方法以沉淀-萃取法处理全血样品,采用HypersilODSC18(250mm?4.6mm,5μm柱,柱温为50?,乙腈-甲醇-水(7.5?62.5?30为流动相,流速1.2mL/min,以32-去甲基雷帕霉素为内标,在276nm波长处,检测西罗莫司血药浓度,并应用此方法测定5例肝移植患者的西罗莫司血药浓度。结果全血中西罗莫司浓度在2.050.0ng/mL范围内线性良好(r=0.9997,平均相对回收率为99.1%(n=5。5例肝移植患者的Cmax为(12.66?4.1ng/mL,t1/2为(19.2?11.2h,tmax为(1.8?0.3h。结论本方法快速、简便、准确,灵敏度高,重现性好,可用于肝移植患者的西罗莫司临床药物监测。[关键词]西罗莫司;高效液相色谱法;血药浓度;肝移植DeterminationofsirolimusinhumanwholebloodbyHPLCandtheexploratoryinlivertransplantationZHANGNing1,LHui-yi1*,DENGSa2,FANQing1(1.DepartmentofPharmacy,TheSecondAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116027,China;2.DepartmentofPharmacology,DalianMedicalUniversity,Dalian116044,China[Abstract]ObjectiveToestablishanHPLCmethodtodeterminetheconcentrationofsirolimusinwholeblood．MethodsThewhole-bloodsampleswerepretreatedbyprecipitation-extractionmethod,andsirolimuswasde-terminedbyHPLC-UV．HypersilODSC18analysiscolumn(250mm?4.6mm,5μmwasused,andthetemperaturewassetat50?．Themobilephasewasamixtureofacetonitrile-methanol-water(7.5?62.5?30withaflowrateof1.2mL/min．Thedetectionwavelengthwassetat276nm．ResultsThecalibrationcurvewaslinearwithintherange2.050ng/mL(r=0.9997.Themeanrelativerecoverywas99.1%,andthemeanabsoluterecoverywas82.2%(n=5．Theintra-dayandtheinter-dayrelativestandarddeviationdidnotexceed3.3%and6.3%respectively．Inthefivetransplantationreceptors,Cmaxwas(12.66?4.1ng/mL,t1/2was(19.2?11.2h,tmaxwas(1.8?0.3h．ConclusionThismethodissimple,rapid,sensitiveandsuitablefortherapeuticdrugmonitoringofsirolimus．Keywords:Sirolimus;HPLC;Plasmadrugconcentration;Livertransplantation西罗莫司(Sirolimus,SRL,商品名Rapamune,雷帕霉素,是一种大环内酯类免疫抑制剂,具有抗增殖、抗肿瘤及无肾毒性等特性,近年来逐渐应用于肝移植患者,使临床获得了防治肝移植术后肾功能不全、慢性排斥反应、肿瘤复发和提高移植物长期存活的新途径[1]。血药浓度监测对于保证SRL免疫抑制效果和临床安全性具有重要的意义。本文采用高效液相色谱法测定西罗莫司血药浓度,并分析此方法在肝移植患者中的合理应用。1实验材料1.1仪器日本岛津HPLC色谱仪(LC-20AT二元梯度泵,COM-20A控制模块,SPD-M20A二极管阵列检测器,QT-330型色谱柱恒温箱(大连三杰科技发展有限公司,wi2568529电动离心机(东仪科技有限公司,AS701KDT型超声波清洗器(北京鸿泰顺达科技有限公司,XY-22型浓缩氮吹仪(青岛新益通有限公司,YKH-Ⅱ型液体快速混旋器(江西医疗器械厂,AW-120型分析天平(日本岛津。1.2药品与试剂西罗莫司对照品(纯度为98.0%,天津新美科技有限公司,32-去甲基雷帕霉素(纯度为98.0%,天津新美科技有限公司,甲醇(色谱纯,天津康巢正兴科技发展有限公司,氢氧化钠(分析纯,上海慈太龙实业有限公司,乙腈(色谱纯,天津市康巢科技开发有限公司,硫酸锌(分析纯,上海光铧科技有限公司,1-氯正丁烷(≥99.5,广州伟伯化工有限公司。2实验方法与结果2.1色谱条件色谱柱:HypersilODSC18柱(250mm?4.6mm,5μm,大连伊利特分析仪器有限公司;流动相:乙腈-甲醇-水(7.5?62.5?30;流速:1.2mL/min;紫外检测波长:276nm;进样量:20μL;柱温:50?;内标物:32-去甲基雷帕霉素。在上述色谱条件下,全血中内源性杂质不影响西罗莫司与内标的分离测定,西罗莫司与内标的保留时间分别为16.3、26.8min,空白全...