不同成脂条件下人骨髓间充质干细胞的早期成脂特性田健健1，池颖1，宋宝全1，杜文静1，韩之波1，韩忠朝1，2(1中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所血液病医院，实验血液学国家重点实验室，天津市300020；2细胞产品国家工程研究中心，天津市300457)引用本文：田健健，池颖，宋宝全，杜文静，韩之波，韩忠朝.不同成脂条件下人骨髓间充质干细胞的早期成脂特性[J].中国组织工程研究，2016，20(23):3366-3373.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2016.23.003ORCID:0000-0003-2660-0402(田健健)文章快速阅读：田健健，女，1986年生，河北省张家口市人，汉族，2016年北京协和医学院毕业，硕士，主要从事间充质干细胞及骨髓微环境相关的研究。通讯作者：韩忠朝，博士，研究员，博士生导师，中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院血液学研究所，实验血液学国家重点实验室，天津市300020；细胞产品国家工程研究中心，天津市300457中图分类号:R394.2文献标识码:A文章编号:2095-4344(2016)23-03366-08稿件接受：2016-04-25文题释义：共同前体细胞：骨髓中获得的间充质干细胞，在体外具有增殖和多向分化的能力，被认为是成骨和成脂分化的共同前体细胞。成脂和成骨过程被认为存在着一种平衡，即向成骨分化的同时抑制了成脂分化。该过程受到多种信号通路的共同作用，但最终都表现在对主要转录因子的调控上，包括PPARγ和Runx2。它们分别被认为是成脂和成骨的管家基因。脂肪因子：脂肪组织在体内不仅起到贮存能量的作用，而且可以作为内分泌器官分泌多种生物活性成分。这些由脂肪细胞产生的生物活性分子称为脂肪因子，包括PPARγ，FABP-4，adiponectin，leptin等。它们不仅通过自分泌和旁分泌作用影响脂肪细胞的功能，而且可以分泌到血液中对能量代谢、免疫防御、成血管和脂肪代谢产生作用，以此维持机体平衡。摘要背景：目前骨髓间充质干细胞的成脂诱导方法众多，其主要诱导成分包含吲哚美辛或罗格列酮。各种方法均能诱导骨髓间充质干细胞成脂分化，但其成脂诱导效率和机制尚缺少相互对比。目的：比较不同成脂诱导方法对人骨髓间充质干细胞的早期成脂效果，并探讨其成脂诱导差异的可能机制。方法：分离培养人骨髓间充质干细胞，通过油红O染色和成脂相关基因检测，比较3种不同诱导方法对人骨髓间充质干细胞的成脂效果。在诱导早期不同时间点(0，1，3，7d)检测成脂相关基因PPARγ，C/EBPα，Adiponectin，LeptinmRNA表达。Westernblot检测成脂诱导第7天时PPARγ、C/EBPβ蛋白表达，并比较DIMI，DIMR对PPARγ-Ser273位点磷酸化作用。结果与结论：①油红O染色和成脂相关基因检测结果显示，在骨髓间充质干细胞成脂诱导分化第7天，DIMR组成脂效果明显强于DIM组和DIMI组；②Westernblot检测结果显示在成脂第7天，DIMI组PPARγ、C/EBPβ蛋白表达量高于其他组，差异有显著性意义；③DIMR组PPARγ-Ser273位点磷酸化比例低于DIMI组；④结果表明，含罗格列酮的成脂培养基DIMR对人骨髓间充质干细胞的早期成脂诱导作用最强，且该作用可能与减少PPARγ-Ser273位点磷酸化有关。关键词：干细胞；骨髓干细胞；罗格列酮；人骨髓间充质干细胞；成脂诱导分化；吲哚美辛；PPARγ；国家自然科学基金主题词：骨髓；间质干细胞；成脂分化；吲哚美辛；PPARγ；组织工程3种不同成脂诱导体系对骨髓间充质干细胞的诱导差异脂肪相关基因油红O染色PPARγ，C/EBPβ蛋白表达pS273PPARγ/PPARγDIMDIMRDIMITianJian-jian,Master,HematonosisHospital,InstituteofHematology,PekingUnionMedicalCollege&ChineseAcademyofMedicalSciences,StateKeyLaboratoryofExperimentalHematology,Tianjin300020,ChinaCorrespondingauthor:HanZhong-chao,M.D.,Investigator,Doctoralsupervisor,HematonosisHospital,InstituteofHematology,PekingUnionMedicalCollege&ChineseAcademyofMedicalSciences,StateKeyLaboratoryofExperimentalHematology,Tianjin300020,China;NationalEngineeringResearchCenterofCellProducts,Tianjin300457,China基金资助：国家自然科学基金面上项目(31470951)；国家自然科学基金重点项目(81330015)Propertiesofhum...