桔皮苷色谱条件改进探讨孙丽丽于涛摘要：本文探索了高效液相色谱法检测桔皮苷含量的色谱条件，通过对桔皮苷溶液紫外光谱的扫描结果，设定不同波长进行比对，并筛选出适合的波长;通过测定桔皮浸膏和桔红颗粒中桔皮苷含量，验证色谱条件的改进效果，为开展进一步分析提供理论依据。关键词：紫外光谱;桔皮苷;实验研究中图分类号：S816.2文献标识码：ADOI编号：10.14025/j.cnki.jlny.2019.24.035桔皮苷，即维生素P黄酮类化合物之一，主要存在于柑橘属果实中，尤其是柑、橘、甜橙和柠檬等的果皮中含量较多。分离提取的桔皮苷精制品为白色粉末，微小针状晶体。桔皮苷能防治高血压、糖尿病、痔疮、坏血病等，同时具有抗菌、消炎、止痛等作用，其在医学、食品、化妆和运动营养等领域具有广泛的应用前景。1材料与方法1.1样品准备桔皮苷标准品，橘红颗粒，橘皮浸膏提取物。1.2主要试剂及仪器流动相：甲醇、醋酸、水，色谱柱C18，岛津紫外检测器，普析TU-1901型紫外分光光度计。1.3样品处理1.3.1标准品溶液的制备称取105℃干燥至恒重的桔皮苷标准品1.0000mg，置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，移取1.50ml，置于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀得标准品溶液。1.3.2样品溶液的制备取橘红颗粒（橘皮浸膏提取物），研成粉末，称取样品3.0000g，加甲醇15ml，超声处理15min，抽滤，反复提取5次，合并滤液，用少量甲醇分次洗涤容器，洗液滤入同一容量瓶中，加甲醇至50.00ml作为供试品溶液;移取出橘红颗粒（橘皮浸膏提取物）其他样品各5.00ml，各置于10ml容量瓶中，用80%甲醇稀释至刻度。1.4色谱条件采用色谱柱C18（5μm，150mm）;流速1mL/min;柱温40℃;采用岛津LC-15C色谱工作站;进样量20μL。1.5实验方法用紫外分光光度计测量桔皮苷的最大吸收波长：称取已干燥的桔皮苷标准品1.0mg，用甲醇溶解到100.00ml，移取5.00ml，置于50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，在波长200～300nm范围内进行扫描。2实验结果通过扫描紫外光谱可得出桔皮苷在波长283nm处有最大吸收峰。2.1流动相不同配比下，检测桔皮苷标准品在波长为283nm，流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下进行检测，保留时间11.167min，峰面积：7938673.3。在波长283nm，流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下进行检测，保留时间7.533min，峰面积：7760178.6。在波长为283nm，流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下进行检测，保留时间5.883min，峰面积：8144820.3。在波长为283nm，流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=50∶2∶50下进行检测，保留时间3.150min，峰面积：7412637.5。通过流动相不同配比下检测桔皮苷标准品，可得在流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下，保留时间最合理，吸收峰强度最大，而当流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=50∶2∶50时，3分钟之内的色谱峰多为溶剂峰，故无参考价值。2.2流動相不同配比下，检测橘红颗粒在波长为283nm，流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下进行检测，保留时间11.200min，峰面积：3001994.5。在波长283nm，流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下进行检测，保留时间7.217min，峰面积：3351890.7。在波长为283nm，流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下进行检测，保留时间6.117min，峰面积：2912005.2。通过流动相不同配比下检测橘红颗粒，可得在流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下，保留时间最合理，吸收峰强度最大，色谱条件改进效果较好。2.3流动相不同配比下，检测橘皮浸膏提取物在波长为283nm，流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下进行检测，保留时间12.883min，峰面积：1848281.8。在波长283nm，流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下进行检测，保留时间7.650min，峰面积：13514011.2。在波长为283nm，流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下进行检测，保留时间5.967min，峰面积：12657397.5。通过流动相不同配比下检测橘皮浸膏提取物，可得在流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下，保留时间最合理，吸收峰强度最大，色谱条件改进效果较好。3结论本实验通过检测桔皮苷标准品筛选得到最适波长和最适流动相配比，并通过检测橘红颗粒和橘皮浸膏中桔皮苷的含量，进一步验证...