免疫组化在基层医院开展的难点解析高伟民1李红梅2贾娟1（1内蒙古巴彦淖尔市临河人民医院病理科内蒙古巴彦淖尔015001）（2内蒙古巴彦淖尔市临河人民医院检验科内蒙古巴彦淖尔015001）【中图分类号】R197【文献标识码】B【文章编号】1672-5085（2013）06-0351-01【摘要】目的免疫组织化学（以下简称免疫组化）检查已广泛应运于临床病理学实验室中，然而各地对免疫组化阳性结果的判断，以及在免疫组化制片过程中出现的不同结果，仍困扰着病理界的同仁们。如何统一认识，避免出现麻烦,准确判定结果，值得探讨。方法免疫组化图片是采用染色强弱来判断结果的,不像检验学指标那样采用离开标准值的SD（标准差）来判定结果的准确性。因此，各地存在一定的差异，究竟是权威机构的结果具有可靠性，还是以自己实验室的结果为准，实难定论。我们试图用多种方法，在不同时期，甚至同一制片人在同样的实验条件下，相隔一定时期（以三个月为例），标记同一组病理切片，其结果的强弱也存在差异。结果免疫组化检查在基层医院开展存在一定难点。结论诊断者本人非亲自去染色，而是由实验室的同志们来完成，不乏有经验的多少和技术等层面因素参杂其中。因此，各地出现结果的差异实难避免。【关键词】免疫组化实验室实验条件免疫组化质量的好坏，是从组织的固定到一个良好的石蜡切片，需要经过若干值得注意的步骤：1.采用中性福尔马林固定的标木，无论HE染片，还是免疫组化染片，都应该是最好的，但固定时间必须是大于7小时，一般18-24小时为最佳，但只要固定充分，影响不会太大。2.组织脱水采用梯度酒精脱水的效果最佳，目前，一些基层医院仍然沿用正丁醇脱水，其效果也可以，但需注意脱水不可太干燥。3•二甲苯透明，不存在问题，标木浸蜡时，石蜡的选料上须讲究，进口石蜡太昂贵，国产广东茂名56-58°C石蜡效果较好，在此向大家推荐。4.将基础步骤做好后，一次切数张3・4微米的薄片，经脱蜡至水后，开始免疫组化染色。（以下蒸他水及PBS液洗涤从略）5.抗原修复，按要求采用PH值6.0枸稼酸盐，PH值8.0EDTA,PH值9.0Tris-EDTA三种溶液，有学者将PH值9.0不同成分的抗原修复液⑴，分别运用于同一组实验中，其结果不尽相同，这正是我们所关心的。其实，按照各家试剂公司给出的修复条件，应该是最佳的[2],毕竟是各公司已经经过数次实践证明了的。在此，我们就不深究了。6•消除内源性过氧化物酶的活性，该步骤有好多大医院常常删除不做,其实在基层医院不能不做，因为有读片大夫的经验问题涵盖其中。7•—抗、二抗、DAB显色、复染等步骤只要加液均匀，温度、时间控制好，一般不会出现大的问题。只是在加显色液时，要尽量按先后顺序依次加核阳性、浆阳性、膜阳性标记物，这样从时间上讲，比较稳妥一点。8.结果判断最重要，一张免疫组化片阳性结果的判断，要求十分精准掌握其阳性部位，一定要分清楚是哪一部分阳性（核、浆、膜，还是浆+膜），阳性的强弱以及阳性细胞所占百分比。总结：免疫组化工作需十分谨慎，要多向有经验的老师学习，不断汲取教训，总结经验，才能真正打造出一支强有力的基层病理团队。参考文献⑴PH9.0不同成分的抗原修复液对免疫组织化学结果的影响.中华病理学杂志，2012年3月第41卷第3期第192-194页.⑵不同抗原修复条件对免疫组织化学结果的影响•中华病理学杂志，2005,34（1）:522.