益肾活血胶囊对高同型半胱氨酸血症及动脉粥样硬化兔TGF-β1mRNA摘要：目的探讨益肾活血胶囊对高同型半胱氨酸（Hcy）血症致动脉粥样硬化（AS）兔转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法48只新西兰兔，随机平分为正常组、模型组，益肾活血胶囊小剂量组、中剂量组、大剂量组及西药（叶酸、维生素B6、维生素B12）组，除正常组外，其他组建立高Hcy血症及AS动物模型，分别给予相应的药物治疗，观察血浆Hcy浓度、腹主动脉血管形态学变化及TGF-β1mRNA和蛋白表达。结果益肾活血胶囊和叶酸等维生素均可明显降低血浆Hcy水平，减轻血管内膜厚度，下调腹主动脉TGF-β1mRNA和蛋白表达，益肾活血胶囊大剂量组疗效最佳。结论益肾活血胶囊可明显降低血浆Hcy水平，抑制Hcy诱导的动脉粥样硬化形成，其机制可能与抑制TGF-β1表达有关。关键词：益肾活血胶囊；同型半胱氨酸；动脉粥样硬化；转化生长因子-β1：R285.5文献标识码：A：1672-1349（2011）07-0832-03EffectofYishenHuoxueCapsuleonTGF-β1mRNAandProteinExpressioninHyperhomocysteine-inducedAtherosclerosisinRabbitsLiuFenye，Zhang激dongDepartmentofTraditionalChineseMedicine，ShandongProvincialHospital，ShandongUniversity（激nan250021）Abstract：ObjectiveToexploretheeffectofYishenHuoxuecapsule（YHC）ontransformationgrowthfactor-β1（TGF-β1）mRNAandproteinexpressioninhyperhomocysteine（Hcy）-inducedatherosclerosisinrabbits.MethodsForty-eightmaleNewZealandwhiterabbitsweredividedintosixgroups：Controlgroup，modelgroup，lowdoseYHCgroup，middledoseYHCgroup，highdoseYHCgroupandwesternmedicinegroup（folicacid，vitaminB6andvitaminB12）.Apartfromcontrolgroup，therabbitsinothergroupsunderwentballooncatheterinjuryandhighmethioninediettoinducehyperhomocysteinemiaandatherosclerosis（AS），followedbytreatmentwithdifferentdrugs.PlasmaHcyconcentration，theaorticmorphologicalchanges，TGF-β1mRNAandproteinexpressionwereexaminedbyhighperformanceliquidchromatography，haematoxylin-eosin（HE）staining，real-timequantitativePCRandimmunohistochemistry，respectively.ResultsBothYHCandwesternmedicinecoulddecreasetheplasmaHcyconcentration，attenuatetheintimalthickening，down-regulateTGF-β1mRNAandproteinexpression.TheefficacyofhighdoseYHCgroupwassuperiortolowdoseYHCgroup，middledoseYHCgroupandwesternmedicine.ConclusionYHCcoulddecreasetheplasmaHcylevelandsubsequentlyreversestheaorticlesioninducedbyHcy.ThemechanismsmayberelatedtoitssuppressiveeffectonTGF-β1expression.Keywords：YishenHuoxuecapsule；hyperhomocysteine；therosclerosis；transformationgrowthfactor-β1动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是冠心病、心肌梗死、原发性高血压、脑卒中、血管成形术后再狭窄等发生发展的病理生理基础。高同型半胱氨酸（Hcy）血症是AS的独立危险因素［1,2］。益肾活血胶囊可明显降低血浆Hcy水平，改善冠心病患者的临床症状［3］。转化生长因子-β1（TGF-β1）在AS及血管成形术后再狭窄中具有重要的作用。本研究以高蛋氨酸饮食诱导兔高Hcy血症及AS动物模型，探讨益肾活血胶囊对TGF-β1基因与蛋白表达的影响。1材料与方法1.1实验动物与药物雄性纯种新西兰大白兔48只，体质量2.0kg～2.5kg，购自山东省农业科学院。益肾活血胶囊由枸杞子、丹参、生黄芪、黄精、川芎、水蛭、瓜蒌皮、大黄、黄连等药物组成。1.2主要试剂Hcy购自Sigma公司；Trizol、OligodT和dNTP反转录酶购自Invitrogen公司；M-MLV购自Promega公司；荧光实时定量PCR（real-timePCR）试剂盒（SYBRPremixExTaqTM）购自Takara公司；兔抗TGF-β1多克隆抗体购自Boster公司；山羊抗兔IgG抗体购自北京中山生物技术有限公司。1.3方法1.3.1分组及给药随机从48只新西兰兔中选取8只为正常对照组，给予普通饲料喂养。其余40只随机平分为5组：模型组，益肾活血胶囊小剂量组、中剂量组、大...