问答题和计算题

一.1.组成蛋白质的20种氨基酸依据什么分类?各类氨基酸的共同特性是什么?这种分类在生物学上有何重要意义?2.蛋白质的基本结构与高级结构之间存在的关系如何?3.Edman反应所有的试剂和反应的特点如何?4.何谓蛋白质等电点?等电点时蛋白质的存在特点是什么?5.何谓盐析?分段盐析粗分蛋白质的原理是什么?6.哪些因素可引起蛋白质变性?变性后蛋白质的性质有哪些改变?7.蛋白质分离分析技术常用的有哪几种,简述凝胶过滤、电泳基本原理。8.有哪些沉淀蛋白质的方法?其中盐析和有机溶剂沉淀法有何区别或特点?9.溴化氰在多肽裂解中的作用部位,和裂解产物的末端氨酸残基为何物?10.举例说明蛋白质一级结构与功能关系。11.举例说明蛋白质变构效应与意义。12.一样品液中蛋白质组分为A(30KD)、B(20KD)、C(60KD),分析说明用SephadexG100凝胶过滤分离此样品时,各组分被洗脱出来的先后次序。13.多聚赖氨酸(poly-Lys)在pH7时呈无规线团,在pH10时则呈-螺旋;而多聚的谷氨酸酸(poly-Glu)在pH7时也呈无规线团,而在pH4时则呈-螺旋,为什么?14.简述胰蛋白酶原激活过程。15.-螺旋的特征是什么?如何以通式表示?16.高浓度的硫酸铵(pH5时)可使麦清蛋白沉淀析出,并用于初步分离该种蛋白的早期步,简要说明其原理。17.用阳离子交换柱层析一氨基酸混合液(洗脱剂:pH3.25,0.2N柠檬酸钠),其结果如下:①各洗脱峰的面积大小或高度有何含义?②Asp比Glu先洗脱出来的原因?吸光度洗脱剂流出体积18.为什么鸡蛋清可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂?六、计算题1.测得一种蛋白质分子中Trp残基占分子量的0.29%,计算该蛋白质的最低分子量(注:Trp的分子量为204Da)。2.一种蛋白质按其重量含有1.65%亮氨酸和2.48%异亮氨酸,计算该蛋白质最低分子量。(注:两种氨基酸的分子量都是131Da)。3.某种氨基酸-COOHpK=2.4,-N+H3pK=9.6,-N+H3pK=10.6,计算该种氨基酸的等电点(pI)。4.某种四肽-COOHpK=2.4,-N+H3pK=9.8,侧链-N+H3pK=10.6侧链-COOHpK=4.2,试计算此种多肽的等电点(pI)是多少?5.有一种多肽,其侧链上羧基30个(pK=4.3),嘧唑基有10个(pK=7),-N+H3(pK=10),设C末端-羧基pK=3.5,N-末端氨基pK=9.5,计算此多肽的pI。6.已知氨基酸平均分子量为120Da。有一种多肽的分子量是15120Da,如果此多肽完全以-螺旋形式存在,试计算此-螺旋的长度和圈数。答案六、计算题1.解:Trp残基MW/蛋白质MW=0.29%,蛋白质MW=64138Da。2.解:异亮氨酸/亮氨酸=2.48%/1.65%=1.5/1=3/2所以,在此蛋白质中的亮氨酸至少有2个,异亮氨酸至少有3个。由此推理出:1.65%=2×(131-18)/蛋白质MW答案:蛋白质MW=13697Da。3.答案:pI=10.14.答案:pI=7.05.解:要计算多肽的等电点,首先应该找到静电荷为零的分子状态。在此多肽中最多可以带有(30+1)个单位负电荷,而正电荷最多只有(15+10+1)个,相差了5个电荷。要想让正负电荷数相等,只能让30个羧基(侧链-COOHpK=4.3)少带5个负电荷(-COOHpK=3.5,它比侧链-COOH易于解离,难于接受质子),即在30个侧链-COOH中有25个处于解离状态(-COO-),5个不解离(-COOH)。因此:pH=pKa+lg([碱]/[酸])=4.3+lg(25/5)=5.0。6.解:答案:肽链长度=43.92(nm);该蛋白质(或多肽)分子量=14640Da二.五、问答题1.核酸的组成和在细胞内的分布如何?2.核酸分子中单核苷酸间是通过什么键连接起来的?什么是碱基配对?3.简述DNA和RNA分子的立体结构,它们各有哪些特点?稳定DNA结构的力有哪些?4.下列三种DNA中,哪个的Tm值最高?哪个的Tm值最低?为什么?A、AAGTTCTCTGAATTAB、AGTCGTCAATGCATTC、GGATCTCCAAGTCATTTCAAGAGACTTAATTCAGCAGTTACGTAACCTAGAGGTTCAGTA5.将下列DNA分子加热变性,再在各自的最适温度下复性,哪种DNA复性形成原来结构的可能性更大?为什么?A、ATATATATATB、TAGACGATGCTATATATATAATCTGCTACG6.真核mRNA和原核mRNA各有何异同特点?六、计算题1.由结核分枝杆菌提纯出含有15.1%(按摩尔计算)的腺嘌呤的DNA样品,计算...

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