CD4+CD25+T细胞在特发性血小板减少性紫癜中的研宄张蓝方郝云良（山东省医学科学院山东济南250062；山东济宁市第一人民医院血液科山东济宁272000）【】R554.6【文献标识码】A【】1672-5085（2010）33-0062-02特发性血小板减少性紫癜（ITP）是一种以血小板破坏加速为特征的慢性获得性器官特异性自身免疫性出血性疾病。ITP的发病机制涉及体液免疫和细胞免疫的异常，CD4+CD25+Treg细胞是具有免疫抑制和免疫无能特性的调节性T细胞亚群，既能抑制不恰当的免疫反应，乂能限定免疫应答的范围、程度及作用时间，在机体的外周免疫耐受中起着重要的作用。近年来研宄发现，CD4+CD25+Treg细胞与ITP间存在密切关系，但其作用机制目前尚不清楚，木研究通过检测ITP患者治疗前后及其中难治性ITP患者外周血Treg细胞的比例，探究Treg细胞在ITP发病中的可能作用。1、资料与方法1.1研究对象病例组为26例ITP患者（10例男性，16例女性），平均年龄30.4岁，按照《血液病诊断及疗效标准》［1］确诊。其中初治16例，复治10例。对照组为健康体检者21例（8例男性，13例女性），平均年龄35.7岁。1.2CD4+CD25+的检测所有标木均抽取清晨空腹外周血2ml,以EDTAK2抗凝，初治患者治疗后1月再次取血。取2支流式试管，分别取100mu;l抗凝全血加入每支试管内。较较摇匀，依次加入20mu;lIsotypeControl（MouselgGl/lgG2a）及抗CD4、CD25抗体各10mu;l,室温避光保存20min。取出试管，每管加入l溶血素2ml，混匀，室温避光lOmin，300g离心5min，弃上清液。每管加入PBS液2ml,混匀300g离心5min,弃上清液。加入PBS液0.5ml混匀。4°C避光1小时内上机检测（BD公司的FACSCaliber型流式细胞仪）。采用Cellquest软件分析。1.3统计学方法采用SPSS10.0统计分析软件处理获得数据，实验结果以均数plUSmn;标准差来表示。不冋疗效组之间以及和对照组之间的比较应先用单因素方差分析,治疗前后比较用配对t检验。2、结果病例组外周血CD4+CD25+T细胞的百分率低于对照组(P《0.05),见表1。初治ITP患者治疗前CD4+CD25+T细胞比例明显低于正常对照组(P《0.05),治疗后CD4+CD25+T细胞比例显著升高，但仍低于正常对照组(P《0.05),见表2。表1病例组与对照组的外周血T细胞表型的分率(％,x-plusmn;s)注:与对照组相比，*P<0.05表2初治ITP患者治疗前后和对照组T细胞表型百分率的比较(%,x-plusmn;s)注:与对照组相比，*P<0.05,治疗前后CD4+CD25+/CD4+比值相比，P〉0.05。3、讨论ITP发病机制复杂，传统观点认为ITP主要是体液免疫异常导致患者体内的自身抗体与血小板结合，近年的研究发现细胞免疫在ITP发病机制中也起了很重要的作用。更有学者［2】认为尽管B细胞异常产生针对血小板的自身抗体是ITP发病的直接原因,T细胞异常导致B细胞激活可能才是ITP真正的发病机制，部分情况下，T细胞还可能直接导致血小板的破坏。T淋巴细胞的亚群或功能的异常均可能在ITP发病中起重要作用。CD4+T细胞是免疫系统中重要的免疫调节细胞，据K•产生细胞因子的不同可分为TH1型、TH2型、调节性T细胞、Thl7细胞。其中调节性T细胞是一类具有独特免疫调节和免疫抑制功能的CD4+CD25+T细胞亚群，在多种自身免疫相关疾病的发病过程中扮演重要角色［3-5］。近年虽奋研究表明ITP患者外周血调节T细胞存在异常，但具体机制仍不明确。本研宄发现ITP患者外周血CD4+CD25+T细胞百分率比正常健康人的偏低，治疗后CD4+CD25+T细胞比例会有所升高，说明ITP患者体内确实存在CD4+CD25+Treg细胞数量的异常，可以推测CD4+CD25+Treg细胞数量的减少，导致其免疫抑制功能下降，T细胞增殖不能被奋效的控制，使自身反应性T细胞激活，加之B细胞活化、增殖产生PAIg，机体的细胞免疫和体液免疫功能紊乱，促进了血小板的破坏，最终导致了ITP的发生。再者，CD4+CD25+Treg细胞数量的减少必然也会引起其功能的降低，Treg的功能主要是通过分泌抑制性细胞因子而实现，ITP患者外周血Treg细胞大多存在功能异常，近年也宵相关研究证实了这一点[6】。虽然0前CD4+CD25+Treg在ITP患者发病机制中的确切作用仍不清楚,但对这一类细胞在ITP发病过程中的研究无意识为探明ITP发病机制提供了新的方向，值得进一步深入研宄。参考文献[1]WANGL...