SLP-2基因在乳腺癌细胞系中的表达及对MCF-7细胞增殖的影响#谢贵娥，黄招琴，李莉，徐甜，张航，韩梅，向双林**510152025303540（湖南师范大学生命科学学院，长沙市410006）摘要：乳腺癌是目前常见的女性的恶性肿瘤，其发生、演进、侵袭和转移是一个多基因参入的渐进积累的过程，涉及到许多基因调控、表达、突变等变化。人的SLP-2基因是一个新的肿瘤相关基因，在多种肿瘤的发生过程中发挥重要作用，特别是其在乳腺癌组织的高表达与病人的存活率相关。因此为了进一步研究SLP-2在乳腺癌中的功能，应用免疫印记的方法检测SLP-2在不同乳腺癌细胞中的蛋白表达水平，发现随着细胞癌化程度的增强其表达水平也增强，并且成功构建pCMV-Myc-SLP-2重组质粒，证明了其在MCF-7细胞的表达，MTT实验结果表明SiRNA转染乳腺癌细胞MCF-7可以抑制细胞增殖，同时我们也发现SLP-2在乳腺癌细胞系中表达量与HER2/nue呈负相关。这些结果都为深入研究乳腺癌的发生发展奠定了基础。关键词：乳腺癌；SLP-2；免疫印记；细胞增殖：Q78TheexpressionofSLP-2inhumanmammarycancercelllinesanditseffectoncellproliferationinMCF-7cellsXIEGuie,HUANGZhaoqin,LILi,XUTian,zhanghang,HANMei,XIANGShuanglin(CollegeofLifeScience,HunanNormalUniversity,Changsha410006)Abstract:Breastcancerislocallyadvancedatthetimeofdiagnosis,anditsoccurrence,evolution,invasionandmetastasisisagradualaccumulationprocessofmulti-genesparticipating,italsoinvolvesgeneregulation,expression,mutationandmanyotherchanges.Humanstomatinlikeprotein2(SLP-2)isanovelcancer-relatedgene,itplayedimportantrolesinavarietyoftumors,especiallyhigh-levelSLP-2expressionwereassociatedwithsignificantlydecreasedsurvivalinbreastcancer.TostudythefunctionofSLP-2inbreastcancerfurtherly,wedetectedtheexpressionofSLP-2proteinindifferentbreastcancercellsbyWesternblotting,andfoundthattheexpressionofitsproteininbreastcancercellsincreasedwiththeincreaseofthedegreeofcancer.WealsosuccessfullyconstructedrecombinantplasmidpCMV-Myc-SLP-2anddemonstrateditcanexpressedwellinMCF-7.TheMTTassayshowedthatthecellproliferationwassignificantlyinhibitedaftertransfectionofpCMV-Myc-SLP-2,wealsofoundthattheexpressionofSLP-2andHER2/nuehavenegativecorrelationinMCF-7,thusprovidingausefulclueforfurtherresearchontheoccurringanddevelopmentofbreastcancer.Keywords::breastcancer;SLP-2;Westernblotting;cellproliferation0引言乳腺癌是严重威胁妇女身体健康的常见恶性肿瘤，其发病率不断上升，发病年龄也日趋年轻。乳腺癌发生的分子机制仍有待进一步研究和探究[1-2]。人的Stomatinlikeprotein2（SLP-2）基因由WangY首先从人心脏cDNA文库中克隆，该基因定位于染色体9p13.1，由10个外显子和9个内含子组成，编码约1.5kb的mRNA，编码含有356个氨基酸残基的基金项目：高等学校博士学科点专项科研基金资助课题(20104306110005);湖南省研究生创新性课题---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---（CX2012B225）作者简介：谢贵娥（1988-），女，研究生，主要从事分子生物学研究通信联系人：向双林，男，教授，主要从事分子生物学研究.xshlin@yahoo-1----本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---多肽[3]。该蛋白在人体组织中都有表达，其中在心脏和骨骼肌中表达较高。有研究表明，SLP-245在多种恶性肿瘤组织中表达较高，如食管鳞状细胞癌组织和肺癌组织，且有研究报道，SLP-2基因与子宫内膜腺癌细胞生长相关[4-6]，特别是其在乳腺癌组织的高表达与病人的存活率负相关，因此很可能其在乳腺癌的发生中发挥着重要作用[2，7]。在本研究中，我们通过Westernblotting分析SLP-2基因在乳腺癌细胞系中的表达水平，发现癌化程度越高的细胞中SLP-2表达越高，并运用脂质体介导法将外源SLP-2基因转染入人乳腺癌MCF-7细胞系中,使之得505560到稳定表...