UCMSC移植对CIA大鼠炎症因子表达水平

uc—MSC移植对CIA大鼠炎症因子表达水平[摘要]目的观察脐带间充质干细胞(umb订icalcordmesenchymalstemcells,UC-MSC)移植对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠血清白介素-1(IL-1).IL-10、IL-17、IL-18表达水平的影响,以探讨UC-MSC移植对CIA大鼠炎症因子的调控作用。方法90只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、UC-MSC治疗组,每组各30只;采用鸡II型胶原加完全弗氏佐剂建立CIA大鼠模型;治疗前后采用关节炎指数(AI)评分对大鼠关节炎症进行评估;以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠治疗前后血清IL-kIL-10、IL-17、IL-18水平变化。结果模型组血清IL-1、IL-17、IL-18水平均明显高于同期空白对照组,而IL-10水平则低于同期空白对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);UC-MSC治疗组治疗后第1、3周时IL-1、IL-17、IL-18水平低于同期模型组,IL-10水平高于同期模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05);至第5周上述指标与空白对照组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)o结论CIA大鼠存在免疫功能紊乱,其促炎症因子水平显著增高,---本文于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---抑炎症因子降低;UC-MSC能下调CIA大鼠促炎症因子水平,而上调炎症抑制因子,减轻机体免疫性炎症反应,促进疾病缓解。[关键词]脐带间充质干细胞;胶原诱导型关节炎大鼠;炎症因子;免疫调节[]R593[文献标识码]A[]1673-7210(2012)12(c)-0032-03类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)是以累及周围性小关节为主的系统性、炎症性自身免疫疾病,以关节滑膜细胞增生、炎症细胞浸润及血管翳形成为主要病理特征[1]。脐带间充质干细胞(umb订icalcordmesenchymalstemcells,UC-MSC)是于脐带华通氏胶的一类多能干细胞,具有独特的免疫调节功能,以抑制炎性反应为主要特征。本文以胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠为研究对象,观察UC-MSC对CIA大鼠炎症细胞因子的调节作用,为临床应用UC-MSC治疗RA提供实验依据。1材料与方法1.1实验动物5周龄,雌性,清洁级SD大鼠,90只,平均体重(175±10)g,购置于南京大学模式动物研究所。1.2实验方法---本文于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---1.2.1CIA大鼠模型建立①分组:90只SD大鼠随机分为三组:空白对照组、模型组、UC-MSC治疗组,每组各30只②造模:扬州大学医学院实验动物中心清洁级环境中适应性饲养1周,模型组及UC-MSC治疗组在乙瞇麻醉下于第1天以每只0.1mL(含鸡II型胶原0.25mg及0.05mL完全弗氏佐剂)于SD大鼠右后足跖皮内注射,至第21天同前剂量于大鼠尾根部、左后足跖皮内再次多点激发免疫。空白对照组以生理盐水注射,方法同造模组。1.2.2UC-MSC移植取融合度85%的P3代UC-MSC,用0.25%胰蛋白酶消化,生理盐水清洗3遍,制成浓度为2X106/mL细胞悬液,用1mL无菌注射器抽吸分装成0.5mL/支(含1X106个细胞)。于造模完成后1周经大鼠尾静脉注射制备好的UC-MSC悬液0.5mL/只;空白对照组及模型组同法注射等量生理盐水。1.3观察指标1.3.1从免疫当日起,采用双人双盲的方式在初免后1、2、3周,及治疗后1〜5周,每周观察并采用关节炎指数(AI)评分法评定大鼠关节症状的严重程度。1.3.2于UC-MSC移植治疗后第1、3、5周,分别取空白对照组及模型组、UC-MSC组大鼠,麻醉大鼠后,经腹腔静脉取血4mL置分离胶干燥管中,以3000r/min.离心10min后提取血清,置-2CTC冰箱保存待测。用ELISA法检测血清白介---本文于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---素T(ILT)、ILT0、ILT7、ILT8。1.4AI评分法标准据关节红肿范围和变形情况对大鼠进行评估。每只大鼠四肢评分相加,总分最高为16分。评价标准:0分二无关节炎;1分二有红色斑点或轻度肿胀;2分=关节部位中度肿胀;3分二严重肿胀,甚至皮肤破溃;4分二严重肿胀且不能负重。1.5统计学方法采用Excel2003软件及统计软件SPSS16.0对实验数据进行分析,计量资料数据以均数土标准差(x±s)表示,多组间比较采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验。以P0.05),实验结果表明CIA大鼠体内存在免疫系统紊乱,导致促炎性细胞因子IL-1、IL-17、IL-18分泌异常增高,而炎症抑制因子IL-...

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