枞酸标准样品的研制王振洪,叶伯蕙,商士斌,宋湛谦(中国林业科学研究院林产化学工业研究所;生物质化学利用国家工程实验室;国家林业局林产化学工程重点开放性实验室,江苏南京210042)摘要:研究了从马尾松松香中分离得到的95%纯度的枞酸制备枞酸标准样品,用DB-5毛细管石英柱对枞酸样品进行气相色谱定量分析,并运用统计学分析法检验了标准样品的均匀性。枞酸标准样品的稳定性较好,-16℃下稳定时间达到8个月。中图分类号:TQ351文献标识码:A文章编号:1673-5854(2010)05-0008-05PreparationofReferenceMaterialsofAbieticacidWANGZhen2hong,YEBo2hui,SHANGShi2bin,SONGZhan2qianAbstract:Referencematerialsofabieticacidwerepreparedusingabieticacidwithpurityof95%isolatedfromPinusmassonianaLamb.rosin.QuantitativeanalysisofabieticacidwascarriedoutbygaschromatographyusingDB25quartzcapillarycolumn.Homogeneityexaminationofthereferencematerialswasappliedbystatisticalanalysis.Thestabilityofthereferencematerialsofabieticacidwasgoodandamountedto8monthsat-16℃.标准样品(referencematerial,RM)是指“具有足够均匀的一种或多种物理的、化学的、生物的、工程技术的或感官的等性能特征,经过技术鉴定,并附有说明有关性能数据证书的一批样品”[1]。它可以广泛应用于测量仪器的校准和检测(或分析)方法的验证。枞酸是一种二萜树脂酸,有一个三环菲骨架的化学结构,存在多个手性中心,含有一个共轭双键,化学性质活泼,它是脂松香树脂酸组成中含量最高的成分,利用其化学结构特性可以合成多种具有生物活性的化合物,是当今松脂化学研究领域中最具潜力的、有重要地位的一种生物质化学品。枞酸标准样品是以马尾松松香为原料,经异构、分离、提取松香中的枞酸成分,再经提纯后得到含枞酸95%的一种实物样品,它为松脂化学及天然提取物中相关枞酸成分的气、液相色谱分析,仪器校准和检测方法的验证、校核等提供所需的实物标准样品。由于枞酸化学性质活泼,空气中的氧气就易使它氧化变性,因此存储时间较短,韩春蕊等[2]将枞酸在低温和真空条件下存储,仅在2个月内其含量基本不变。而作为标准样品的最基本要求,需要在一定的期间里保持其1实验1.1原料和仪器马尾松松香(工业1级),95%乙醇(分析纯),浓盐酸(分析纯),马尾松松香标准样品;气相色谱收稿日期:2010-07-14基金项目:科技基础性工作专项(2007FY230200)作者简介:王振洪(1959-),男,上海人,副研究员,主要从事松香、松节油天然产物的研究与开发;E2mail:njlinzhwang@163.com。第5期王振洪,等:枞酸标准样品的研制9仪:岛津GC-2014型;数据处理系统:色谱工作站GCsoluionVersion2.30.00SUI。1.2枞酸含量的气相色谱分析方法和条件色谱柱:DB-5毛细管石英柱,长30m,直径0.32mm,膜厚0.25μm。气相色谱条件:起始温度100℃,保持2min,程序升温:5℃/min到200℃,保持2min,再程序升温:2℃/min到250℃,保持10min到结束。汽化和检测温度:260℃。分流比:1/25,进样量:0.3～0.5μL。氢焰检测。数据处理参数:峰宽3s;斜率1300μV/min;漂移0μV/min;参变时间1000min;最小峰面积:取最大峰面积的0.5%值;峰面积计算范围(面积归一化法):取保留时间从12～36min之间的有效出峰面积。枞酸样品的甲酯化方法:称取0.03～0.05g需分析的枞酸样品放入5mL的具塞试管中,加入1.5～2.0mL无水乙醇溶解,以酚酞指示剂指示终点,用25%的四甲基氢氧化铵-乙醇溶液滴至红色。枞酸色谱峰的校验:应用马尾松松香标准样品[3],对研制得到的枞酸标准样品进行枞酸峰保留时间的校验和确定。1.3枞酸的分离提取制备将工业级的马尾松松香1kg加入到带搅拌器和回流装置的3L四口圆底烧瓶中,加1kg95%乙醇,加热回流溶解松香后再加20g浓盐酸,加热搅拌回流2h进行酸化异构反应,然后将反应液体经0.127mm孔径的尼龙网过滤到结晶池中,滤液冷却后结晶。将析出的晶体过滤,用95%乙醇洗涤晶体1次,得到微黄色的粗枞酸晶体。将粗枞酸晶体用95%乙醇按固体晶体与溶剂的质量比1∶1.5进行3次重结晶,得到的晶体经气相色谱分析枞酸GC含量为93.56%,外观为白色颗粒状晶体,50℃下真空干燥,得到257g晶体,总收率25.7%。重复上述枞酸提取制备操作,...