金银忍冬腋芽离体培养技术研究

金银忍冬腋芽离体培养技术研究张健+建德锋摘要:以金银忍冬腋芽作为外植体进行离体培养技术研究,得出:把消毒后的腋芽切割成0.3毫米转入MS+KT0.5毫克/升+NAA0.2毫克/升培养基,分化率达到100%;然后将分化后的不定芽切割成1厘米小段转入MS+KT0.5毫克/升+IBA0.04毫克/升培养基,增殖效果最好;将增殖的大量茎段切割成2厘米小段转入1/2MS+IBA0.8毫克/升生根培养基中,生根效果最佳。关键词:培养基配方;金银忍冬;腋芽基金项目:吉林省高等学校大学生创新创业训练项目(2015004):S567.7:ADOI编号:10.14025/jki.jlny.2017.01.017金银忍冬(Loniceramaackii(Rupr.)Maxim.)又叫金银木,为落叶灌木,其多个器官均可入药,根可解毒截疟,茎叶祛风解毒,活血祛瘀,花淡、平,可祛风解表,消肿解毒,完全可代替金银花入药。目前,金银忍冬常用繁殖方法为播种和扦插。播种繁殖过程复杂且萌发率不高,扦插繁殖季节限制嚴格,管理方面要求较高,这些都影响到金银忍冬苗木的快速、大量、优质繁殖。随着器官离体培养技术的发展,利用其快速、高效、去毒的优点,本试验尝试采用离体培养技术进行金银忍冬繁殖。1材料与方法1.1试验材料2016年6月20日于吉林农业科技学院校园挑选生长良好、无病虫害的金银忍冬植株,采集带腋芽的枝条若干,带回组培室实验室消毒接种。1.2试验方法1.2.1材料处理将采集回来的枝条切成小段,每段带一腋芽,在自来水下用流水冲洗20分钟,然后用0.5%的84消毒液浸泡15分钟,用无菌水冲洗3~4次,再放入0.05%次氯酸钠(NaClO3)溶液中浸泡8分钟,无菌水冲洗后放入超净台备用。1.2.2培养基配方初代诱导培养基:A1:MS+KT1.0毫克/升+NAA0.1毫克/升;A2:MS+KT1.0毫克/升+NAA0.2毫克/升;A3:MS+KT0.5毫克/升+NAA0.1毫克/升;A4:MS+KT0.5毫克/升+NAA0.2毫克/升。增殖培养基:B1:MS+KT0.5毫克/升;B2:MS+KT0.5毫克/升+IAA0.02毫克/升;B3:MS+KT0.5毫克/升+IAA0.04毫克/升;B4:MS+KT0.5毫克/升+IAA0.06毫克/升;B5:MS+KT0.5毫克/升+NAA0.02毫克/升;B6:MS+KT0.5毫克/升+IBA0.04毫克/升;B7:MS+KT0.5毫克/升+NAA0.06毫克/升。生根培养基:C1:1/2MS+IBA0.5毫克/升;C2:1/2MS+IBA0.8毫克/升;C3:1/2MS+IBA1.0毫克/升L。以上培养基均添加琼脂6克/升,蔗糖30克/升,pH值均调整为5.6。1.2.3培养条件培养室湿度保持在80%,初代诱导阶段温度20℃,光照强度1600Lx,光照时间12小时;继代增殖阶段温度25℃,光照强度2000Lx,光照时间14小时;生根阶段温度25℃,光照强度3000Lx,光照时间14小时。2结果与分析2.1不同初代诱导培养基上诱导不定芽情况腋芽茎尖接种后均有不同程度的分化。20天左右茎尖开始分化出愈伤组织,进而愈伤组织出现突起,后来突起分化出不定芽,接种后55天开始统计不定芽诱导生长情况,具体结果见表1。由表1可以看出,从A1~A4,分化率、平均芽数及芽高各不相同,比较得出A4(MS+KT0.5毫克/升+NAA0.2毫克/升)分化瓶数最多、分化率最高、平均芽数最多,平均芽高最高,为最佳的培养基。2.2不同增殖培养基上增殖情况不定芽切段转接到各继代增殖培养基配方,各小段开始生长,转瓶28天统计各瓶中苗木的增殖状况,具体结果见表2。由表2可以看出,B5增殖倍数最大,其次为B6和B7,说明添加NAA有利于增殖,综合比较,B6(MS+KT0.5毫克/升+IBA0.04毫克/升)增殖效果最好。2.3不同生根培养基上生根情况将继代增殖的苗切段转入生根培养基,25天统计各配方中苗木的生根状况,具体结果见表3。由表3可以看出,C1、C2、C3配方生根率均较高,说明1/2MS配方中添加IBA有利于生根;比较C1、C2、C3配方,生根率均为100%,但C2平均根数最多,另产生的根系粗壮,所以,C2(1/2MS+IBA0.8毫克/升)最适合作为生根培养基。3结论与讨论通过4个培养基配比对金银忍冬腋芽进行诱导,得出诱导最佳配方为MS+KT0.5毫克/升+NAA0.2毫克/升,诱导率达到100%,产生的不定芽数较多,平均达到8个以上,且不定芽生长健壮;通过比较7个配比对苗木的增殖状况,得出MS+KT0.5毫克/升+IBA0.04毫克/升配方最有利于苗木增殖;通过比较3个配比对苗木的生根状况,得出1/2MS+IBA0.8毫克/升配方有利于生...

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