胃动素受体激动剂对肠肌间神经元内钙的影响作者：杨侠1；董蕾1；杨希恩2(1西安交通大学医学院第二医院消化科，陕西西安710004；2西安市北方医院普外科，陕西西安710043)摘要：目的探讨胃动素受体激动剂对体外培养大鼠肠肌间神经元内钙的影响。方法采用免疫荧光标记技术鉴定原代培养的肠肌间神经元；应用钙离子(Ca2+)指示剂Fluo-3/AM作为细胞内Ca2+的荧光探针，对负载培养的神经元，应用激光共聚焦显微镜技术检测胃动素及红霉素引起的单个神经元内Ca2+荧光强度(FI)的变化。结果胃动素和红霉素引起的神经元内Ca2+浓度变化为：(1)在Hank’s液中,胃动素浓度为10-8、10-7、10-6mol/L时，神经元内Ca2+浓度逐渐升高,其峰高(峰值减去静息值)分别为10.6±2.1、15.9±1.2、30.6±3.7，相邻两组间存在显著性差异(P<0.05)。FI相对变化百分比分别为(40.1±6.3)%、(63.0±11.2)%、(100.8±18.4)%，相邻两组间存在显著性差异(P<0.05)，且呈明显剂量依赖性。(2)在Hank’s液中，10μg/ml红霉素可引起神经元内Ca2+浓度升高,其峰高为23.2±5.6，FI相对变化百分数为(82.8±13.0)%。(3)当用胃动素受体的抗体孵育后，再加入10μg/ml红霉素，其胞内Ca2+浓度的升高几乎完全被抑制。结论胃动素和红霉素均可引起体外培养肠肌间神经元的功能应答。胃动素可明显升高肠肌间神经元内Ca2+浓度,且呈剂量依赖性；红霉素可作用于肠肌间神经元胃动素受体引起胞内Ca2+浓度的升高。关键词：胃动素；胃动素受体；红霉素；肠肌间神经元；钙：R57文献标识码：A：1673-4254(2006)06-0760-04EffectsofmotilinagonistsonintracellularcalciummobilizationinculturedratmyentericneuronsYANGXia1；DONGLei1；YANGXi-en21DepartmentofGastroenterology,SecondHospitalofXi’an激aotongUniversity,Xi’an710004,China;2DepartmentofGeneralSurgery,Xi’anNorthHospital,Xi’an710043,ChinaAbstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofmotilinagonistsonintracellularCa2+mobilizationinprimaryculturedratmyentericneurons.MethodsMotilin-inducedanderythromycin-inducedintracellularCa2+signalingwasstudiedinprimaryculturesofratmyentericneuronsusingtheradiometricCa2+indicatorFuro3/AMwithalaserconfocalmicroscope.ResultsInHank’ssolution,10-8,10-7,and10-6mol/LmotilincouldelevateintracellularCa2+concentration([Ca2+]i)tothepeaklevelsof10.6±2.1,15.9±1.2,and30.6±3.7respectivelywiththeirrelativepercentagechangeinfluorescentintensityof(40.1±6.3)%,(63.0±11.2)%,and(100.8±18.4)%respectively,indicatingthedose-dependenteffectofmotilinon[Ca2+]i.InHank’ssolution,10μg/mlerythromycincouldinducetheelevationof[Ca2+]itotheaveragepeakof23.2±5.6withtherelativepercentagechangeinfluorescentintensityof(82.8±13.0)%.WhenpretreatedwiththeantibodyagainstmotilinreceptorinHank’ssolution,theeffectof10μg/mlerythromycinwasalmostinhibitedcompletely.ConclusionMotilincanincrease[Ca2+]i,anderythromycinalsohasthiseffectbybindingtomotilinreceptor.Keywords:motilin;motilinreceptor;erythromycin;myentericneuron;Ca2+收稿日期：2005-10-12基金项目：国家自然科学基金(30170414)SupportedbyNationalNaturalScienceFoundationofChina(30170414)作者简介：杨侠(1977-)，女，在读博士研究生，电话：029-81042611，E-mail：muyirenjia@sohu通讯作者：董蕾，教授，电话：029-87679368，E-mail:doc_donglei@126已知胃动素是调节消化间期胃肠运动至关重要的胃肠激素，其生理作用是依靠胃动素受体来实现的。早期研究证实胃动素在外周可由胃动素受体介导，直接作用于体外培养的结肠平滑肌细胞，使胞内Ca2+释放[1]。近年来的研究发现，中枢神经系统[2]及肠神经系统[3]也有胃动素受体的分布，提示胃动素的作用可能是通过神经通路和对平滑肌的直接作用共同完成的。红霉素及其衍生物被认为是胃动素受体的激动剂，已试用于胃瘫综合症的治疗[4]，为临床提供了一类新型的胃肠道动力药，引起大...