烟叶陈化中的微生物多样性及其对烟叶品质改良的研究进展梅涌姜兴涛刘辉摘要：综述烟叶陈化微生物的种类及微生物在烟叶陈化过程中的多方面作用，进行了烟草陈化微生物研究展望。关键词：烟草；陈化；微生物；烟叶品质：TS44+4：A：0439-8114（2017）20-3801-03DOI：10.14088/jki.issn0439-8114.2017.20.001Abstract：Themicroorganismtypesofagedtobacco，theroleandthemultipleeffectsofthemicroorganismsintheprocessoftobaccoagingwerereviewed，andanresearchprospectwasmadeforthemicroorganismsofagedtobacco.Keywords：tobacco；aging；microorganisms；tobaccoquality烟草是世界范围广泛种植的经济作物，中国是世界上最大的烟草生产国和消费国，烟草行业所带来的经济效益日益突显，其利税也为食品行业之首，成为创造财政收入的重要产业[1]。随着烟草行业的发展，人们对烟草的品质有了新的要求，消费者希望可以吸食烟气更好，毒性更低，口感更佳的香烟。面对这种需求，烟厂对烟草及香烟进行积极改良，从前期烟草种植、草种选育和收割成熟度，到中期的处理工艺，包括初烤、打叶复烤、陈化、复烤、加香处理，到最后期香烟的滤棒处理，都有了新技术、新进展，极大地提升了香烟的品质和香气。烟草处理过程中，陈化被公认为是提升烟叶品质的关键环节[2]。烟叶陈化是由烟叶中微生物作用的一种复杂生理生化过程，该过程不仅可以有效提高烟叶的香气物质，同时降低烟叶中的蛋白质、淀粉、果胶等物质的含量，提高香煙的口感。1烟叶陈化方法烟叶陈化主要有2种方法，自然陈化和人工陈化，中国主要采用人工陈化方法。自然陈化就是将烟叶存放于自然环境中，在自然条件下长时间发酵。周显升等[3]研究表明自然陈化时间以23～39个月为最佳。胡有持等[4]研究表明，自然陈化时间越长，烟叶中的香气物质含量越高。但是自然发酵的时间过长，不利于烟叶的生产而且提高了烟叶成本。人工发酵是指人为设定温度和湿度，使烟叶较快陈化。该方法时间短，烟叶品质提升明显，经济性好。但是香气、吸味、色泽等都不及自然陈化烟叶。无论是自然陈化还是人工陈化，都是利用微生物改善烟叶性状。2陈化烟叶表面的微生物种类陈化烟叶表面微生物种类主要包括细菌、真菌、放线菌。韩锦峰等[5]对陈化期烤烟表面微生物进行分离和鉴定，结果表明陈化过程中微生物数量均逐减少，微生物以芽孢杆菌属和梭状芽孢杆菌属为主，没有酵母菌。邱立友等[6]对63个烤烟不同陈化期间微生物种类进行研究，发现杆菌、曲霉是细菌和真菌的为优势菌群，主要有芽孢杆菌属、梭菌属、链霉菌属、曲霉属和青霉属。祝明亮[7]采用ATB系统对陈化烟叶表面微生物进行分析，鉴定出黏红酵母、罗伦隐球酵母和粗壮假丝酵母。王玥等[2]研究烟叶细菌种类，发现烟叶表面存在着大量的假单胞菌属、不动杆菌属、代尔夫特菌属和泛菌属等多个种群。Michele等[8]对烤烟烟叶表面微生物进行动态研究，发现在发酵早期酵母菌为优势菌株，乳酸杆菌属和葡萄球菌属随后，后期芽孢菌属和放线菌属是主要的微生物菌群。陈化发酵烟叶表面微生物的种类与烟叶的产地、品种陈化时间等诸多因素有关。如果根据不同地域的烟叶特点，充分利用陈化烟表面的微生物，不仅可以推动烟叶发酵过程中物质转化，而且可显著提升烟叶的品质。2.1可培养微生物为了加快烟叶陈化的速度，节约烟叶生产成本，研究人员倾向性分离可培养的陈化微生物用于陈化烟叶。Tamayo等从西班牙烟叶中分离得到芽孢杆菌和球菌，Pounds[9]在烟叶样品分离出嗜热性酵母和细菌，朱大恒等[10]分离得到的主要菌属为芽孢杆菌属和梭菌属，赵铭钦等[11]发现芽孢杆菌是主要细菌菌群，而曲霉和青霉是霉菌优势菌群，链霉菌是主要的放线菌菌群。2.2不可培养微生物自然环境下的微生物可以实验室分离培养的不到10%，传统研究微生物群落主要是通过特定培养，从而导致大部分微生物信息无法获得。随着分子生物学的发展，对陈化烟叶表面微生物的研究更为精细。Michele等[8]利用分子生物学技术并结合培养方法，发现意大利烤烟中的微生物多达几十种，远比之前发现种类要多。Huang[12]通过RFLP技术结合测序和生物学信息学运用，测定陈化烟...