第28卷第2期中国野生植物资源Vol.28N。.22009年4月Ch1neseW11dP1antResoutcesApt.2009高效液相色谱法测定红景天根中红景天就的含量徐鉴(南京晓庄学院,江苏南京210017摘要建立了一种高效液相色谱法测定红景天根中红景天就的含量。色谱柱为HypeIs11-C5pm,150mmxl8(4.6mm,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,柱温25,℃在250nm波长处检测。研究结果表明:红景天贰的检测限为50激g/L,线性范围为4〜40mg/L,回归方程为Y=5.6348X-4.0931,1=0.9996,加样回收率为98.05%。方法操作简便、快速、准确。关键词高效液相色谱;红景天贰;红景天:R284.1文献标识码:A:1006-9690(200902-0063-03DeterminationofSalidiosideinRhodiolaRootbyHPLCMethodXu激an(DepartinentofCheinistry,Nan激ngXiaozhuangUnivers11y,Nan激ng210017,ChinaAbstractAiiewHPLCmethodhasbeendevelopedfoideteimina11onofsa11diosideinihodio1aroot.Thechromatogiaphiccond111onswereasfo11ows:Hypeis11-C511m,150mmx4.61nm,withmethy1a1co-18(11o1-wateiasthef1owphase,giadiente1u11on,columntempeiature25andUVdetectorat250nm.Thesa11drosideinrhodio1arootextractedwith5℃0Hg/L.T11eca11brationcufveshowedagood11nea111y(i=0.9996.Andtheaveiagefecovefyof111emethodwas98.05%.Tlierapidandaccuiatemethodispaiticularlysuitablefoitliedeteiminationofsalidiosideinihodiolaioo1.KeywordsHighpefformance11quidchromatogfapliy;sa11droside;rliodiolaioot红景天属多年生草本或亚灌木,为传统藏药,具有活血止血,清肺止渴、增强免疫力等生理药理作用。红景天就为红景天中的重要成分,对于中枢神经系统、内分泌系统、物质代谢都要作用。目前红景天就含量的研究方法主要有高效液相色谱法[2][1]测灵敏度高、分析速度快、毒性小等特点。1材料与方法1.1仪器和试剂仪器:Agilent1100高效液相色谱仪(二元梯度泵、二极管阵列检测器、紫外检测器、化学工作站(美国安捷伦公司,Hypeisil-C5pm,150mmx18(4.6mm(中国科学院兰州化物所,KQ5200B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司,FW80高速万能粉碎机。试剂:水(重蒸镭纯净水,甲醇(色谱纯,红景天就对照品(中国药品生物制品检定所,红景天根试样(四川天弘天然药物有限责任公司。L2色谱条件色谱柱:Hypeis11-Cmx4.6mm,5gm;18150m柱温:25;℃流动相:甲醇十水梯度洗脱:0〜Imin、气相色谱法、薄层色谱法[3]等。其中气相色谱法需将样品衍生化,操作繁琐,而薄层色谱法则有分析时间长等缺点,目前采用的较多的方法是高效液相色谱分析法.然而其分离条件和样品前处理方法各不相同。本文结合实际情况,通过多种色谱分离条件选择和优化,以甲醇-水为洗脱体系,建立了高效液相色谱-紫外检测法测定红景天就含量的方法。实验结果表明,本方法具有色谱分离效果好、检收稿日期:2008-06-05作者简介:徐鉴(1976-,男,硕士,长期从事色谱分析研究。中国野生植物资源第28卷为20%甲醇,1〜9min变为70%甲醇,9~10min为70%甲醇;紫外检测波长250nm;进样量201工;外标法定量。1.3实验方法红景天就对照品溶液的制备:精密称取红景天就对照品20mg,放置100mL的容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,此溶液作为母液。再用移液管精确移取该母液0.5、1、2、3、4、5mL至25mL容量瓶中,用甲醇稀释并定容至刻度,摇匀备用。红景天根试样溶液的制备:先将红景天根用万能粉碎机打碎成60〜80目细粉。精密称取红景天根粉末0.5g于100mL的容量瓶中,加入50mL的甲醇,在40℃下于超声波清洗器中超声60m111,冷却至室温后用甲醇定容至刻度,再用0.45pm微孔滤膜过滤后备分析用。2.2检测波长的选择将红景天就标准品的甲醇溶液在200~400nm波长下进行紫外扫描,发现红景天就在25011m和210nm处均有较强的吸收峰,但由于210nm太靠近紫外区边缘,且杂质干扰影响较大,所以选择250nm为测定红景天贰的紫外检测波长。2.3线性关系考察取1.3节中制备好的对照品标准溶液,其对应的质量浓度分别为4.00、8.00、16.00、24.00、32.00、40.00mg/Lo均进样量20匹,平行操作3次,记录峰面积。以峰面积值对质量浓度进行回归处理,其回归方程为Y=5.6348X-4.0931,1=0.9996O实验结...