纳豆红曲银杏的毒理安全性评价【摘要】目的探讨纳豆红曲银杏（NHY）的安全性。方法选取无特定病原体（SPF）级健康昆明种小白鼠、Wistar大鼠，按《食品安全性毒理学评价程序和方法》进行试验。结果小鼠急性毒性试验LD50>10.0g/kgBW，属实际无毒级；遗传毒性试验均未呈现致突变作用。大鼠30d喂养试验表明动物各项生理指标均未发生异常。结论NHY安全无毒、无致突变性。【关键词】纳豆红曲银杏；无毒；致突变；安全性DOI：10.14163/jki.11-5547/r.2016.18.197纳豆[1]作为黄豆为原料的发酵品，是一种营养价值很高的食品，可调节血脂，降低胆固醇、血脂，预防高血压和动脉硬化；可调节肠道菌群平衡，预防痢疾、肠炎和便秘；还有防癌抗癌、缓型减肥、排毒养颜、延缓衰老等功效。银杏叶提取物是从银杏科属植物叶中提取的一种营养物质，它具有促进机体循环、抗氧化、延缓衰老、提高记忆力、防治高血压、调节血糖等方面的功效与作用。纳豆红曲银杏是以纳豆冻干粉、功能性红曲粉、银杏叶提取物为主要原料的保健食品[2]。依照《食品安全性毒理学评价程序和方法》对其安全性进行毒理试验，以保证其对人体食用安全。1材料与方法1.1受试物纳豆红曲银杏。1.2实验动物SPF级健康昆明种小白鼠、Wistar大鼠，吉林大学白求恩医学院动物实验中心提供，使用许可证号SCXK-（吉）-2011-0004。本清洁级实验动物环境设施合格证号，吉动设字10-1005。1.3试验方法1.3.1小鼠急性毒性试验采用急性经口毒性实验，一次最大量法进行。选取18～22g的小鼠20只，雌雄各10只。受试物用蒸馏水配制，灌胃最大浓度25%，灌胃2次，每次0.2ml/10gBW，剂量为10g/kgBW，给予受试物后，观察14d。1.3.2遗传毒性试验①小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：选用25～30g的小鼠50只，雌雄各半，随机分组，每组10只。以40mg/kgBW的环磷酰胺为阳性对照，蒸馏水为阴性对照，试验设5.00、2.50、1.25g/kgBW三个剂量组。间隔24h2次经口灌胃，末次灌胃后6h颈椎脱臼处死动物，取股骨骨髓常规制片。每只动物计数1000个骨髓嗜多染红细胞的微核发生率。②小鼠精子畸形试验：选用25～30g雄性小鼠25只，随机分组。以40mg/kgBW的环磷酰胺为阳性对照，蒸馏水为阴性对照，试验设5.00、2.50、1.25g/kgBW三个剂量组。连续灌胃5d，首次灌胃后35d处死动物，常规制片。每只动物计数1000个结构完整精子的畸变精子发生率。③Ames试验：试验菌株TA97、TA98、TA100、TA102，经鉴定符合要求，均为鼠伤寒沙门氏菌组胺酸缺陷型。体外代谢活化系统用多氯联苯诱导的大鼠肝匀浆。试验设5000、1000、200、40、8μg/皿5个剂量，同时设阴性对照（蒸馏水）和阳性对照，平板掺入法，每个剂量3个平行，整套试验重复2次。1.3.3大鼠30d喂养试验设三个受试物组分别为2.93、2.20、1.47g/kgBW及对照组，每组20只，雌雄各半。三个试验组受试物用逐步扩大量法分别均匀掺入基础饲料中，含量分别为2.93%、2.20%、1.47%，基础饲料为阴性对照组。单笼喂养，记录大鼠每周的体重、进食量，连续喂养30d。实验第31天，麻醉后下腔静脉取血，进行血液学、生化学指标测定，处死大鼠，大体解剖，观察每只大鼠脏器有无异常，取肝、肾、脾脏和睾丸（卵巢）称重，计算脏体系数，高剂量组大鼠的肝、肾、脾脏、胃、睾丸、卵巢进行病理组织学检查。1.4统计学方法采用SPSS20.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差（x-±s）表示，采用t检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。2结果2.1小鼠急性毒性试验该受试物小鼠急性毒性试验雌、雄小鼠LD50>10.0g/kgBW，按急性毒性分级标准为实际无毒级。2.2遗传毒性试验小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验和Ames试验结果均为阴性，未见致突变作用。2.3大鼠30d喂养试验2.3.1实验动物一般状况在30d喂养期间，各剂量组大鼠生长良好，活动正常，无死亡。各剂量组动物体重、进食量、动物食物利用率等一般情况未见异常。2.3.2对大鼠血常规的影响按高、中、低、对照组顺序，血红蛋白（HGB）雄性分别为（138.00±4.35）、（139.20±4.83）、（136.70±3.27）、（139.10±3.31）g/L，雌性分别为（135.80±2.90）、（135.30±2.63）、（135.90±3.00）、（...