dehp对宫内仔鼠睾丸leydig细胞分化和增殖能力的影响

病理学与病理生理学专业毕业论文[精品论文]DEHP对宫内仔鼠睾丸Leydig细胞分化和增殖能力的影响关键词:DEHP睾丸Leydig细胞雄性仔鼠肛门生殖器距离急性类固醇调节蛋白白血病抑制因子促黄体生成素受体雄激素受体基因表达摘要:目的:观察不同剂量的DEHP对宫内雄性仔鼠Leydig细胞形态和功能的影响,探讨不同剂量的DEHP对Leydig细胞分化和增殖能力的影响及作用机制。方法:体重220-280g之间自然受孕的雌性SD大鼠24只分成四组:正常对照组(n=6)、低剂量组(n=6)、中剂量组(n=6)、高剂量组(n=6)。后三组每天通过灌胃给予不同剂量的DEHP和玉米油混合物0.5ml,每次DEHP灌胃实际量:低剂量组10mg/kg.d,中剂量组100mg/kg.d,高剂量组750mg/kg.d。正常对照组每天同时灌予等体积的玉米油。灌胃时间从母鼠受孕第一天开始(孕鼠见阴栓为受孕第0天)直到仔鼠出生后第一天止(约为受孕第21天)。断头处死出生后第一天的雄性仔鼠,取血清和睾丸。观察以下指标:(1)测量雄性仔鼠的体重和肛门生殖器距离(AGD)。(2)酶免疫发光法检测血清睾酮(T)水平;(3)取新鲜睾丸组织,常规固定,光镜和电镜观察睾丸Leydig细胞形态学的变化;(4)用荧光定量Realtime-PCR方法观察睾丸组织内细胞基因IGF-1、StAR、AR、LIF、LHR、INSL3mRNA的表达情况。结果:1、体重和肛门生殖器距离(AGD):与正常组比较,低剂量组雄仔体重减轻(P<0.05),中、高剂量组体重明显减轻(P<0.01)。高剂量组AGD缩短(P<0.05),中剂最组呈下降趋势,但无统计学意义(P>0.05)。低剂量组无明显改变(P>0.05)。与低剂量组比较,中剂量组体重和AGD呈下降趋势(P>0.05),高剂量组体重和AGD下降(P<0.05)。与中剂量组比较,高剂量组体重和AGD下降(P<0.05)。2、血清睾酮(T)水平:与正常组比较,低剂量组血清T水平升高(P<0.05),中剂量组血清T水平降低(P<0.05),高剂量组明显降低(P<0.01)。与中剂量组比较,高剂量组T水平呈下降趋势(P>0.05)。3、光镜观察显示:正常组Leydig细胞呈小簇状均匀分布在曲细精管之间。低剂量组Leydig细胞有成簇聚集的趋势,簇内细胞数目20-30个左右。高中剂量组出现明显的成簇聚集现象,高剂量组Leydig细胞呈瘤样聚集簇内细胞数目达100个以上。4、电镜观察显示:正常组Leydig细胞胞浆内含丰富的线粒体和滑面内质网,并见少量脂滴。低剂量组Leydig细胞胞浆内线粒体滑面内质网数量明显增多,内质网和线粒体轻度扩张,并见少量脂滴。中高剂量组Leydig细胞体积缩小,胞浆内线粒体和内质网数目减少,脂滴明显增多。5、睾丸内细胞IGF-1、StAR、AR、INSL3、LIF、LHR基因mRNA表达水平:与正常组比较,低剂量组IGF-1mRNA表达升高(P<0.05),StARmRNA表达降低(P<0.05)。LIF、INSL3mRNA表达呈升高趋势但无统计学意义(P>0.05),AR、LHRmRNA表达变化无明显差异(P>0.05)。中剂量组IGF-1、StAR、INSL3、LHRmRNA表达降低(P<0.05),LIFmRNA表达升高(P<0.05),ARmRNA变化不明显(P>0.05)。高剂量组IGF-1、StAR、INSL3、LHRmRNA表达显著降低(P<0.01),LIFmRNA表达显著升高(P<0.01),ARmRNA表达变化不明显(P>0.05)。与低剂量组比较,中、高剂量组StARmRNA表达降低(P<0.05),高剂量组LIFmRNA表达升高(P<0.05),其他无统计学意义(P>0.05)。与中剂量组比较,高剂量组StARmRNA表达降低(P<0.05),LIFmRNA表达升高(P<0.05),其他无统计学意义(P>0.05)。结论:1.DEHP可影响宫内雄性仔鼠的生长发育,能降低其体重,并存在量效关系。高剂量的DEHP能明显缩短雄仔肛门生殖器距离。2、DEHP可影响IGF-1、StAR、INSL3、LIF、LHR的基因表达水平,这可能是DEHP影响胎儿型Leydig细胞分化增殖及其功能的重要机制。3、不同剂最的DEHP对胎儿型Leydig细胞分化增殖能力及功能的影响具有差异性。低剂量DEHP能升高血清睾酮水平,而高、中剂量DEHP降低睾酮水平并抑制Leydig细胞分化和增殖,并与剂量大小有一定相关性。正文内容目的:观察不同剂量的DEHP对宫内雄性仔鼠Leydig细胞形态和功能的影响,探讨不同剂量的DEHP对Leydig细胞分化和增殖能力的影响及作用机制。方法:体重220-280g之间自然受孕的雌性SD大鼠24只分成四组:正常对照组(n=6)、低剂量组(n=6)、中剂量组(n=6)、高剂量组(n=6...

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