探讨玉米自交系农秆菌转化体系及转抗虫基因摘要：玉米是我国重要的生产和生活作物，对国民经济影响极大，并且占有极其重要的地位。但由于玉米田受到螟虫的危害，致使玉米产量遭受重大损失，而转基因玉米植株对抗螟虫玉米品种具有很大作用，玉米外源基因转化常用基因枪法，并采用秆菌法弥补其缺点，通过分析愈伤的诱导、侵染条件、转化后的筛选、再生、移栽等建立了完整高效的农秆菌转化体系，对农业发展具有重要意义。关键词：玉米自交系；转抗虫基因；秆菌法：S513文献标识码：A：1674-0432（2012）-07-0117-1玉米虫害从来都是制约其高产、稳产、优质的重要因素。人类在生产实践中总结出好多防治虫害方法，我国虫害造成玉米减产12％，为减轻其危害，人们采用化学防治和生物防治方法，施用化学杀虫剂来控制农业害虫成本高，并且由于害虫的自适应性使害虫逐步产生抗性，并使化学药剂在食物中的残留，使人类健康受到严重危害；另外，由于化学杀虫剂的非特异性，使害虫的天敌也受到伤害，引起多种生物资源失衡，破坏了自然界的生态平衡；生物防治包括生物杀虫剂的开发和使用、生态防治、常规的抗虫育种，它是防治玉米病虫害的一项重要手段，可是它所起的作用只是避免害虫不发生成灾，利用各种途径来获得抗虫作物品种范畴也小。产生这种现象的原因是新品种选育周期长，抗虫性状的遗传背景复杂，不能轻易使用材料来作为杂交育种的亲本，因此导致害虫新生物型的发展导致抗性不均衡。基因工程手段选育抗虫品种的优越性在于这种手段能够打破种属界限，通过现有的植物、动物、微生物中的多种丰富抗性基因，抗性的特点在于连续性和整体性，控制发生的虫害时间长，位置不限，并且玉米的育种周期短，从早期就能够对其预见性，所用的投资少，见效快，并且在使用过程中不污染环境，因此也相应地对生态环境有间接的保护作用，其抗虫性不易被外界环境因素破坏。1玉米抗虫基因工程现状植物抗虫基因工程关键是获得抗虫基因，我们经常使用的抗虫基因特点和它们的应用包括以下几个方面：1.1微生物的抗虫基因首先是Bt毒蛋白基因，Bt杀虫蛋白具有很高的杀虫活性，它对多个重要农业害虫具有高特异杀虫活性，其中苏云金秆菌是一种革兰氏阳性土壤秆菌，杀虫蛋白通常被称为杀虫晶体蛋白，杀虫晶体蛋白的作用机制是一个非常复杂的问题，对人畜和非标靶昆虫非常安全，在昆虫消化道内消化酶作用下，一定程度上可防止杀虫蛋白在环境中降解，杀虫效果明显。因此，被广泛用于防治重要的农业害虫；其次是营养杀虫蛋白基因。这是由于Bt杀虫蛋白对某些农业上重要害虫的作用不明显，如小地老虎，而苏云金芽孢秆菌芽孢形成前的营养生长阶段分泌的杀虫营养蛋白，Vip蛋白对小地老虎、粘虫和甜菜叶蛾有特效；在研究中发现，胆固醇氧化酶基因也表达的产物是一类新型杀虫剂，对玉米虫害有明显的防治效果，它能够使摄食昆虫的肠道表皮细胞出现胞溶现象，从而使玉米害虫死亡。1.2植物的抗虫基因在植物中发现有四类蛋白酶抑制剂，这些蛋白酶抑制剂抗虫基因存在于所有生命体中。一般有豇豆胰蛋白酶抑制剂、大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂、水稻中发现两种巯基蛋白酶抑制剂，马铃薯蛋白酶抑制剂可调控基因使其在虫害时进行表达；几丁质酶存在于植物和微生物中，与其他抗虫基因产物共同作用可以提高抗虫效果；淀粉酶抑制剂在植物中普遍存在，抑制昆虫消化道内淀粉酶的活性，抵御外来病虫害的侵袭发挥着重要的作用；核糖体失活蛋白基因广泛存在于高等植物中。通过中枢神经系统使昆虫产生厌食反应，促使核糖体失括，抑制细胞内蛋白质的合成；植物外源凝集素基因，具有保护植物免受害虫侵害的作用。另外，还有许多其他植物的抗虫基因。如非蛋白杀虫物质，烟草阴离子过氧化酶等。1.3动物的抗虫基因蝎昆虫毒素基因，可开发作为一种高效生物杀虫剂。对玉米害虫具有极强的致死性，可以极大地减少害虫对玉米的取食；蜘蛛毒素基因。一种蜘蛛毒液中分离纯化到一种小肽能杀死多种对农作物有害的昆虫。2农秆菌转化受体系统建立建立良好的受体系统是玉米基因工程的一个关键环节，原生质体是最早应用成功的玉米遗传转化受体材料，鉴于原生质体转化受体...