外源NO供体硝普钠(SNP)对小球藻生理参数的影响摘要：为了探讨一氧化氮（NO）供体硝普钠（SNP）对小球藻部分生理参数的影响，采用BG11培养小球藻来研究了不同浓度梯度的硝普钠（SNP）对小球藻生理参数的影响。通过查阅参考文献与资料，SNP浓度梯度分别设为：0、0.01、0.05、0.1、0.5、0.7、0.9、1（单位：mmol/L），每天定时用分光光度计、液相氧电极、叶绿素荧光仪对含有不同浓度SNP的小球藻进行了相关参数测定。结果表明：SNP对小球藻生长的调节具有双重性，存在“低促高抑”现象。关键词：硝普钠；小球藻；生长量；呼吸速率；光合效率中图分类号：X173文献标识码：A文章编号：16749944（2016）140151031引言一氧化氮（NO）作为植物体内的一种重要的信号分子，其广泛参与到植物的各种生理过程中，尤其在植物生长发育及其对各种逆境胁迫的响应等方面起着重要的调控作用[1]。研究结果表明，一氧化氮对植物的生长发育、光合作用、呼吸作用等生理过程都起着重要的调节控制作用，现在还把它当作一种新的植物激素[2]。作为一氧化氮重要供体的硝普钠（SNP），则在一些重要领域的研究方面发挥了重要作用。据研究发现，NO外源供体硝普钠（SNP）能够促进渗透胁迫下的小麦种子萌发，提高了过氧化氢酶（CAT）与抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性、增加了脯氨酸（Pro）含量及增强了幼苗的抗氧化能力[3]。近年来，小球藻的营养功效逐渐被发掘，并作为一种可食用的营养食品得到了广泛的认可。据研究发现，小球藻细胞中所含的多糖及糖蛋白具有抗肿瘤活性、抗病原菌及增强人体免疫能力。而且，小球藻在一定程度上还具有降解有机污染物、吸收氮磷等营养物质且吸附砷等重金属的能力[4，5]。所以笔者在已有的研究基础上，采用小球藻为受试生物，以SNP作为外源NO供体，探讨NO供体SNP对小球藻的生理参数的影响，以期为优化培养条件提供理论依据和实践对策。2材料与方法2.1实验材料2.1.1培养基BG11按照表1所示比例配成试剂，然后对试剂灭菌，再按表1取相应的溶液配成BG11，最后测定pH值，使其呈中性，即可植入藻种。2.1.2藻种及培养用BG11培养基培养小球藻，在实验前，将其放置在光照培养箱中进行预处理使其达到对数生长期后再用于实验。光照培养箱里的光照强度为125μmol/m2s1，光暗比为12h∶12h，培养温度保持在（25±2）℃，且为了防止藻细胞下沉或者附壁，每天定时摇匀锥形瓶6次。2.2试验处理用分光光度计测定预培养的藻种液，记录最初的光密度值，OD680值为0.772。然后，将预培养的小球藻培养液充分摇匀后，分至24瓶100mL的锥形瓶中，分8组试验，每组设3个平行，对其分别标号以便区别，在这8组试验中按比例加入不同浓度的SNP，浓度梯度分别为：0（空白样）、0.01、0.05、0.1、0.5、0.7、0.9、1（单位mmol/L）。最后，锥形瓶用透气膜封盖，在设定的条件下培养。2.3分析方法2.3.1小球藻生长量的测定采用浊度比色法，用分光光度计测定小球藻培养液的吸光度值，以培养液在680nm处的吸光度值（OD680）作为小球藻生长量的间接指标[6]。具体步骤：对不同浓度硝普钠的培养液，用分光光度计测定小球藻培养液的吸光度值，连续定时测定6d，每组3个平行试验结果取平均值。2.3.2小球藻呼吸速率的测定Chlorolab-2液相氧电极（Hansatech，英国）是用于测定水溶液中溶解氧的含量。测定方法：先将锥形瓶放在与测定温度相同的蒸馏水中适应一段时间（温度为20℃，大气压为101.32kPa），将八组待测样品每天同时间测定，测定4d，并从中得到相应的光合呼吸速率。2.3.3小球藻光合效率的测定叶绿素荧光参数的测定采用FMS-2型便携式脉冲调制式荧光仪来测定不同浓度下小球藻的初始荧光（Fo）、最大荧光（Fm）和最大光化学效率（Fv/Fm）。其中PSⅡ的最大光化学效率用Fv/Fm=（Fm-Fo）/Fm的方法来计算。用荧光仪每天定时测定培养液的荧光参数，测前请充分摇匀，连续测定4d，记录各天数值。刘路平：外源NO供体硝普钠（SNP）对小球藻生理参数的影响环境与安全3结果与分析3.1不同浓度的硝普钠（SNP）对小球藻生长量的影响根据上述实验步骤与测定方法，得出各组培养液的光密度值（图1）。从图1可以看出，小球藻的生长速度不同，前2d生长缓...