HIV临床常用检测技术的不足及进展杨玉军(四川省攀枝花学院医学基础医学教研室四川攀枝花617000)【摘要】获得性免疫缺陷综合征(AIDS)乂称艾滋病，是由人类免疫缺陷病毒(HIV>感染所引起的一种免疫缺陷性疾病。HIV感染的诊断是艾滋病预防控制工作的重要组成部分，建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查，控制艾滋病的流行显得尤为重要。以下木文就HIV临床实验室常用检测技术的不足之处和进展做一综述。【关键词】获得性免疫缺陷综合征HIV临床不足之处进展【】R392-33【文献标识码】A【】2095-1752(2011)24-0219-021HIV感染的临床实验室的检测标志HIV病毒侵入人体后，其表面糖蛋白gpl20与细胞表面受体蛋白CD4以高亲和力结合，吸附到宿主细胞上，病毒包膜与细胞膜融合后，病毒RNA进入细胞。在HIV感染后，最先能够监测到病毒RNA,然后是p24抗原，最后是抗体。CD4淋巴细胞水平随着感染的发展而逐渐下降，当其在血液中细胞下降到200个/mL时，就会发生严重的免疫缺陷，患者就被确诊为艾滋病。所以，病毒RNA、p24抗原、HIV抗体和CD4淋巴细胞水平可以用来确定HIV感染、检测病情发展。2目前HIV感染临床实验室的主要检测方法2.1HIV抗体、抗原检测2.1.1酶联免疫吸附试验。2.1.2免疫印迹试验。2.1.3免疫荧光试验(IFA)。2.1.4斑点印迹试验。2.2分子生物学方法2.2.1多聚酶链反应检测法。2.2.2实吋荧光定量PCR技术。2.2.3核酸序列依赖性扩增法。3a前临床实验室检测技术的不足P24抗原检测能够在病毒开始复制后检测到血液中的可溶性p24抗原,但易出现假阳性。因此，阳性结果必须经中和试验确认，该结果才可作为HIV感染的辅助诊断依据。HIVlp24抗原检测阴性，只表示在本试验中无反应，不能排除HIV感染。病毒核酸检测方法具冇很高的灵敏度，对疾病进展的监测、抗病毒疗效观察和耐药性监测非常重要。但是，由于HIV基因的多样性，没有一套引物可以覆盖所有的HIV序列，使检测的敏感性又受到限制；此外现奋的病毒核酸检测方法或是检测仪器、检测试剂昂贵，或是操作复杂，对操作人员要求高，既难以在一般实验室推广，又不适用于对大量患者的快速检测，冋样不适合广泛的临床应用。因此，既要提高检测的敏感性、特异性、缩短窗口期，又要简便、快速和降低成本己成为HIV检测技术发展的要求和方向，很多的研究正致力于寻找病毒检测的替代技术。4HIV检测技术的进展4.1抗原、抗体检测试剂的发展从1985年第1代HIV抗体检测试剂问世到现在，HIV血清学检测试剂己经发展到了第4代。第4代ELISA试剂的优点在于能同吋检测抗原和抗体，降低血源筛査的残余危险度。与第3代抗HIV1/2试剂相比，检出吋间提前了4〜5d，窗U期缩短了1周多，在对艾滋病早期诊断的效果上明显优于第3代。一般来讲，使用第4代试剂检测p24抗原，其灵敏度远远低于单独检测抗原抗体分析法。从方法学上来讲，这种基于ELISA的分析方法，灵敏度终归是奋限的。相对化学发光和吋间分辨荧光免疫分析技术等更先进的分析方法，它的灵敏度比较低。由此可见，提高敏感性、特异性、缩短窗口期和简便快速是HIV检测试剂未来发展的主要趋势。4.2检测方法的发展4.2.1核酸检测方法研究进展随着分子生物学技术的发展，核酸检测越来越受到人们的重视并将其与抗原抗体反应的高特异性结合起来形成了免疫PCR技术。这一技术具有特异性强和灵敏度高的特点，可用于单个抗原的检测。这促进了应用PCR技术进行HIV核酸检测的快速发展。最近，实时荧光PCR检测技术的应用使HIV核酸检测技术又进入到一个新境界。4.2.2p24抗原检测方法研究进展随着检测灵敏度不断提高，p24抗原的检测逐渐从主要用于在窗UI期辅助早期诊断和进一步缩短窗UI期，发展到用于病毒载量测定。目前，p24抗原在以下几方面都冇重要应用：HIV1抗体不确定或窗U期的辅助诊断；HIV1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断；第4代HIV1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性反位，但HIV1抗体确认阴性者的辅助诊断；监测病程进展和抗病毒治疗效果。但现冇监测病程进展和抗病毒治疗效果均采用昂贵、操作复杂的病毒RNA测定方法。我国HIV/AIDS患者绝大部分是在基层，检测1次病毒载量需要上千元（约1500元），很难在基层普及，对疾病...