基于荧光共振能量转移的双酚A痕量检测法

、高效液相色谱法[9-10]、荧光光度法[11]、催化动力学分光光度法[12]等,然而以上种种方基于荧光共振能量转移的双酚A痕量检测法聂雨,王周平**51015202530(江南大学食品学院,江苏无锡214122)摘要:以荧光纳米材料KGdF4:Tb3+和纳米金为载体,实现对双酚A的痕量检测。将双酚A适配子及其互补的短链DNA分别与荧光纳米材料和纳米金进行连接,通过两条单链DNA的碱基互补配对,两种材料结合在一起并发生荧光共振能量转移效应,纳米材料的荧光被纳米金所淬灭。当体系中加入双酚A时,双酚A将与互补DNA链竞争结合双酚A适配子,从而导致两种纳米材料结合量的不同,进而影响体系的荧光强度。通过测定双酚A的浓度与体系荧光强度的线性关系,实现对双酚A的检测。在最优实验条件下,本法在双酚A浓度0.5~100ng/mL范围内呈现良好的线性关系,回归方程为Y=430.0X+75095(R²=0.993),检出限为0.16ng/mL。并通过加标回收实验,证明本法可用于实际样品的检测。关键词:荧光能量共振转移;纳米金;双酚A中图分类号:TS207.3AFRET-basedtraceleveldetectionmethodforBisphenolANieYu,WangZhouping(SchoolofFoodScienceandTechnology,JiangnanUniversity,JiangSuWuXi214122)Abstract:TosetupatraceleveldetectionmethodofbisphenolAbasedonthefluorescenceresonanceenergytransfereffectofKGdF4andAuNPs.ThebisphenolAaptamerandtheaptamercomplementarystrandwereconnectedtothesurfaceofKGdF4andAuNPs.ThesetwokindsnanoparticleswereconnectedtoeachotherthroughthecomplementarybasepairingoftwossDNAstrandsandthiscausedtheeffectofFRETthatthefluorescenceofKGdF4wasquenchedbyAuNPs.WhenbisphenolAwasaddedintothesystem,itcompetedwiththeaptamercomplementarystrandforbindingtothebisphenolAaptamerwhichledtothedifferentbindingratesoftwonanoparticles.Differentbindingratesbroughtdifferentfluorescenceintensityofthesystem.Underoptimalconditions,thecorrelationbetweenconcentrationofbisphenolAandthefluorescenceintensityofthesystemwasobservedtobelinearwithintherangeof0.5~100ng/mL,theequationoflinearregressionwasY=430.0X+75095(R²=0.993)andthedetectionlimitoftheproposedmethodwas0.16ng/mL.Thespikedrecoveryexperimentsprovedthatthisdevelopedmethodcouldbeusedfordetectionofactualsample.Keywords:FRET;AuNPs;bisphenolA350引言双酚A,也称BPA,在工业上被广泛用于聚碳酸酯(PC)和环氧树脂等材料的合成[1]。60年代以来就被用于制造塑料(奶)瓶、食品和饮料(奶粉)罐内侧涂层等。双酚A无处不在,从矿泉水瓶、医疗器械及食品包装的内里,都有它的身影。然而研究表明PC材质的塑料在4045高温下易水解,并且温度越高水解越快,水解生成的双酚A会污染被包装的食品,如果双酚A在体内长期积累则会导致免疫力下降等不良反应,尤其对婴幼儿的伤害更大[2]。除此以外,国内外很多试验都证明双酚A是一种内分泌干扰素[3-6],低浓度长时间暴露的情况下,双酚A就可以对生殖系统、神经系统等有不良影响。目前,双酚A的检测方法主要包括气相色谱法[7-8]法有着一些缺点,如检测仪器昂贵、稳定性不足、灵敏度不够高等[13],所以建立一套成熟作者简介:聂雨(1989-),男,硕士研究生,主要研究方向:食品安全检测通信联系人:王周平(1974-),男,教授,主要研究方向:食品安全检测.wangzp@jiangnan.edu.cn-1-的双酚A检测体系十分重要。核酸适配子(Aptamer,简称适配子)是一段体外通过SELEX技术(配体指数富集的系统进化技术)筛选获得的寡核苷酸片段,可以是RNA或单链DNA[14]。单链寡核苷酸的一些二级结构,如发夹、茎环等,可使核酸分子形成多种三维结构,成为与靶标物质特定区505560域结合的基础。研究发现,凡是涉及抗体的应用领域,几乎都可以用寡核苷酸核酸适配体代替。与传统的抗体相比,适配体具有以下显著优点:亲和力高、特异性强、容易制备及修饰、稳定性好等[15]。KGdF4:Tb3+荧光纳米材料,具有荧光强度大、稳定性强等优势,通过水热法合成,表面修饰氨基,水...

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