..久泻灵冲剂对溃疡性结肠炎大鼠结肠病变氧化损伤的影响作者：李海龙,吴玉泓,楚惠媛,车敏,安方玉,王宏伟【摘要】目的观察久泻灵冲剂对溃疡性结肠炎模型大鼠的影响,探讨其作用机制。方法采用异种异体结肠黏膜组织致敏法和乙酸局部灌肠相结合的方法制造动物模型。将Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组及久泻灵冲剂大、中、小剂量组。连续给药14d,末次给药后24h处死大鼠,制备结肠组织匀浆,生化法检测结肠组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、总一氧化氮合酶(tNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的水平。结果久泻灵冲剂可明显降低结肠组织中NO、tNOS、iNOS和MDA的活性或水平,提高GSH-Px、SOD的活性。结论久泻灵冲剂对溃疡性结肠炎模型大鼠有显著的干预作用,其机制可能与抗氧自由基损伤,抑制NO、tNOS和iNOS生成,增强抗氧化酶活性有关。【关键词】久泻灵冲剂；溃疡性结肠炎；谷胱甘肽过氧化物酶；丙二醛；超氧化物歧化酶；一氧化氮；一氧化氮合酶；大鼠Abstract：ObjectiveToobservetheeffectsofJiuxielinggranulesonratswithulcerativecolitisandexploreitsmechanism.MethodsUlcerativecolitismodelswereestablishedbyimmunemethodcombinedwithlocalstimulationof5%aceticacid.Wistarratswererandomlydividedintocontrol,model,positivecontrolandlow,middle,highdoseJiuxielinggranulesgroup.Ratsinpositivecontrolgroupweretreatedwithsulfasalazine,andthoseinthreetreatmentgroupsweretreatedwithlow,middleandhighdosageofJiuxielinggranulesrespectivelyfor14dayscontinuously.24hoursafterlastadministration,theratswerekilledtoobtaincolonmucousmembranetotestGSH-Px,SOD,MDA,NO,tNOSandiNOSconcentrationofthehomogenateofcolonmucousmembrane.ResultsJiuxielinggranulescouldmarkedlyimprovethelevelsofGSH-PxandSODactivity,whereasdecreasethelevelsofMDA,NO,TNOSandiNOS.ConclusionJiuxielinggranulesexertitsmarkedcurativeeffectsonratsofulcerativecolonitisbyresistingoxygenfreeradicallesion,inhibitingthegenerationofNOandNOS,andenhancingtheactivityofantioxidase.Keywords：Jiuxielinggranules；ulcerativecolitis；GSH-Px；MDA；SOD；NO；NOS；rat溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)是以腹泻、黏液脓血便、腹痛为主要临床症状,以结肠黏膜慢性炎症和溃疡形成为病理特点的一种慢性炎症性肠病。该病治愈难度大,且愈后又常易复发。近年来发现自由基的产....生及脂质过氧化物反应增强与UC损伤的病理改变关系密切[1]。本研究通过观察UC急慢性病变复合模型大鼠结肠组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、总一氧化氮合酶(tNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的变化及久泻灵冲剂对其的影响,旨在进一步了解其治疗UC的作用机制,为临床用药奠定实验基础。1材料与方法1.1动物及分组SPF级Wistar大鼠60只,雌雄各半,体重(180±20)g,甘肃中医学院医学实验中心提供,动物合格证号：医动字FCXK(甘)2004-2006。实验动物按随机数字表法分为空白对照组、模型组、阳性对照组及久泻灵大、中、小剂量组,每组10只。1.2药物及试剂处方组成：黄连15g,法半夏10g,干姜10g,补骨脂15g,肉豆蔻15g,炒白术15g,党参18g,诃子肉10g。饮片均购自甘肃同济医药公司,由甘肃中医学院中药鉴定教研室鉴定,临洮众友制药厂做成冲剂。每克冲剂含相当于原药材1.42g。醋酸,由天津市凯通化学试剂有限公司提供；所有检测试剂盒均由南京建成公司提供。1.3造模参考文献[2-3]制作动物模型,取5只家兔的新鲜结肠之黏膜层,制成黏膜匀浆,冷冻24h,融冻后以3000r/min离心30min,取上清液提纯用考马斯亮蓝测定蛋白质含量,冰箱保存备用。使用时加入完全福氏佐剂,模型组和久泻灵大、中、小剂量组于第1、14、21、28日分别于足跖内注射抗原2mg(末次注射不加佐剂)。并用醋酸诱导结肠急性溃疡,于第21、28日用25%乌拉坦4mL/kg麻醉大鼠后,用特制包有圆头的软针头插入大鼠肛门内约8cm处结肠内,注入5%醋酸1mL。空白组大鼠相...