安定对大鼠局灶性脑梗死半影区神经细胞死亡的保护作用作者：吴中亮刘飞游思维焦西英鞠躬【关键词】脑缺血关键词:安定;凋亡;坏死;脑缺血;脑梗塞摘要:目的研究安定对光化学诱发脑梗死后细胞死亡的保护作用.方法使用光化学诱发的大鼠局灶性脑缺血模型.采用原位末端标记技术（TUNEL）检测凋亡细胞.大鼠脑梗死术后存活3，6，12，24，48和72h，分别观察梗死灶坏死中心面积和凋亡细胞数目.术前24h开始腹腔注射安定（10mg#12539;kg-1#12539;8h-1），直到处死动物.结果TUNEL阳性细胞位于坏死中心与正常皮层之间的半影区.TUNEL阳性细胞的均数随着梗死后时间的延长逐渐增多，24h达到高峰.在24h时间点，安定治疗组梗死坏死中心的平均最大面积和TUNEL阳性细胞均数与对照组相比，明显减少（P《0.001）.结论安定可明显减少成年大鼠局灶性脑梗死后的细胞坏死和凋亡.该结果可为临床使用安定治疗缺血性脑血管病提供理论依据.Keywords:diazepam;apoptosis;necrosis;cerebralischemia;cerebralinfarction---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---Abstract:AIMTostudytheprotectiveeffectsofdiazepamagainstnervouscelldeathafterphotochemicallyinducedcere-bralischemia.METHODSFocalcerebralischemiainducedbyphotothrombosisinadultratswasusedasamodel.Apop-tosiswasdetectedbyterminaldeoxynucleotidyltransferasemediateddUTP-biotinnickendlabeling（TUNEL）.Theareasofnecroticcoresandthenumbersofapoptoticcellswerestudiedquantitativelyintheinfarctedareaat3，6，12，24，48and72hafteroperation，respectively.Repeatedin-traperitonealinjectionsofdiazepam（10mg#12539;kg-1#12539;8h-1）weregiven，startingat24hpriortotheoperationandcontin-uingtilltheanimalsweresacrificed.RESULTSTheTUNEL-positivecellswerelocatedinthetransitionalzonebetweenthenecroticcoreandnormalcortex.Themeannum-berofTUENL-positivecellswasincreasedsharplywhenthepostoperativetimeincreasedfrom3，6to12handpeakedat24h.ThemeanmaximumareaofthenecroticcoresandmeannumberofTUNEL-positivecellsat24hweresignifi-cantlydecreased（P《0.001）inthediazepam-treatedexperi----本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---mentalgroupthaninthesaline-treatedcontrolgroup.CONCLUSIONDiazepamcansignificantlyreducebothnecrosisandapoptosisfollowingcerebralischemiainducedbyphotothrombosisinadultrats.Thesefindingsprovideatheo-reticalwarrantyfortheclinicaluseofdiazepaminischemiccerebrovasculardiseases.0引言近年来有研究显示，安定具有保护脑部缺血性神经元，防止其退行性变的作用［1，2］.我们采用大鼠光化学局灶性脑梗死模型，观察安定对大鼠脑梗死后半影区神经细胞凋亡的影响，旨在探索治疗脑梗死的新途径与方法.1材料和方法1.1材料SD雄性大鼠48只，体质量200～250g，由第四军医大学实验动物中心提供.其中36只大鼠按术后存活3，6，12，24，48和72h随机分为6组，每个时间点6只;另外12只大鼠被随机分为安定治疗组和对照组，每组6只.1.2方法---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---1.2.1大鼠光化学脑梗死模型动物均采用10g#12539;L-1戊巴比妥钠50mg#12539;kg-1，腹腔注射麻醉，俯卧位固定于脑立体定向仪上（Narishiga，日本）.常规皮肤消毒，正中矢状切开头皮，细心分离部分颞肌以暴露顶叶，光导纤维（孔径3mm）置于前囟后3mm、矢状缝左旁开3mm之交点处，光纤与颅骨表面距离为2mm.其下对应于顶叶感觉皮层（parietalsensorycortex）.光照前1min内自尾静脉注射玫瑰红B（10g#12539;L-1，生理盐水配制）剂量25mg#12539;kg-1.光照强度1W#12539;cm2，照射时间10min，造成局部皮层缺血梗死［3］.照射过程中颅骨表面温度为（36±1）℃，照射完毕缝合头皮.安定治疗组大鼠术前24h开始腹腔注射安定注射液，剂量10mg#12539;kg-1#12539;8h-1，直至处死动物;对照组将安定换成等量的生理盐...