渐进式流式细胞术实验教学实践和思索

渐进式流式细胞术实验教学实践和思索[摘要]本研究在培养“应用型人才”和“研究型人才”的方法上做了探索,提出了渐进式的实验教学方案。针对流式细胞术的渐进式实验教学模式能有效的提高学生的学习热情和实验技能,为建设“研究型大学”贡献力量。[关键词]渐进式;流式细胞术;实验教学分类号]G642[文献标识码]B[文章编号]2095-0616(2013)22-136-03PracticesandopinionsofprogressiveexperimentalteachingmodelforflowcytometrySULiZHAOJingxiaYANGGenjinLOUZiyangCollegeofPharmacy,theSecondMilitaryMedicalUniversity,Shanghai200433,China[Abstract]Inthiswork,weexporedthemethodologyoftraining“appliedtalents’,and“researchtalents”andproposedaprogressiveexperimentalteachingprogram.Theprogressiveexperimentalteachingmodelforflowcytometrycaneffectivelyimprovethestudents’enthusiasmandexpetimentalskills,therebycontributetothebuilding-upofaresearchuniversity.[Keywords]Progressive;Flowcytometry;Experimentteaching随着科学与技术的发展,流式细胞术已成为药物研发和临床诊断的基础技术之一[1-2]。近年来,我们针对药学和医学等专业的学员开设了流式细胞术的实验课程,使学员理解和掌握相关理论知识,锻炼学员实验技能,取得了良好的效果。今年,在大学创建研究型大学的理念指导下,我们进行了实验教学模式的改革。根据人才培养类型的不同,我们针对性的设计了“应用型实验教学”和“科研型实验教学”的渐进式的的教学模式,不仅培养了学员扎实的动手能力和实验技能,而且让相关专业的学员对流式细胞术有了更深层次的理解,为他们将来的科研工作提供新的思路。1针对低年级本科生的应用型实验教学模式“应用型实验教学”要求学员根据实验设计,验证已知结论,使学员学会仪器使用,理解和掌握相关知识。“应用型实验教学”旨在普及仪器知识,提高学员的学习兴趣,为深入运用仪器打好基础。这种教学模式主要针对医药专业的本科一、二年级的学员和非医药专业的选修学员。课程的设计包括仪器原理及构造介绍、实验设计和上机检测三个环节。学员通过8个学时的学习,一方面能够掌握基本的仪器操作技能,另一方面加深对相关理论知识的理解,熟悉流式的常用数据图谱。针对低年级学生的知识构成我们选择原理和操作相对简单的细胞周期分析和细胞凋亡作为演示实验。我们先对学员进行了2个学时理论讲解,然后按照实验设计安排学员分组展开实验,图1[3]、2[9]是实验数据图谱。根据学员的反馈信息,这种理论加实践相结合的实验教学方式较受大家欢迎,既能提升学员的学习热情,提高学员的求知欲望,又能切实的体验到科研工作的严谨性。1人肝癌细胞细胞凋亡实验(Annexin-V/PI法)2人肝癌细胞周期分析实验2针对高年级本科生和研究生的科研型实验教学模式“科研型实验教学”要求学员深入到实验的整个过程中去,在“应用型实验教学”的基础上细分流式检测的每个步骤,设计并优化实验方案,从而获取理想实验结果的综合型实验教学模式。研究型人才是创建研究型大学的基础,先进的创新思维和高水平的研究能力是研究型人才的基本素质。“科研型实验教学”让学员熟悉并理解科研工作中整个实验方案的设计流程和实验结果的优化手段,培养学员解决实际问题的能力。这种教学模式主要针对医药专业的本科高年级的学员和相关专业的研究生。流式检测流程细分为如下环节:细胞培养与收集、荧光抗体的选择与孵育、对照样本的设计、样本检测。我们针对每个环节对学员进行了详细的解读,包括基本的实验方法、注意事项和一些经验技巧等。2.1细胞培养与收集流式细胞实验,细胞状态至关重要。荧光抗体是根据抗原抗体特异性结合的原理粘附到细胞膜表面或者细胞内的,细胞损伤严重会导致某些受体的缺失,严重影响结果的阳性率,而细胞碎片的增加也会导致荧光抗体的非特异性结合增加,从而导致结果的假阳性率增加。我们获取的单细胞尽量选取对数生长期的,此时细胞状态良好,细胞铺板浓度要合适,不能过稀或者过密;消化细胞的手段应当温和,消化细胞所用的酶尽可能不含EDTA,消...

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