X射线对肺癌细胞DNA修复基因XRCC1表达水平的影响作者：史卫林李坚，陈萍，戴春华【摘要】目的：研究X射线对肺癌细胞X线修复交叉互补基因1(Xrayrepaircrosscomplementinggene1，XRCC1)表达的影响，探讨DNA碱基切除修复机制在肺癌细胞对放疗耐受中的可能作用。方法：以噻唑蓝还原法(MTT)检测X射线对肺癌细胞（人肺腺癌细胞株A549）抑制率的影响，实时荧光定量PCR技术检测X射线处理后肺癌细胞XRCC1mRNA的表达水平。结果：肺癌细胞抑制率多数情况下随X射线照射时间的延长及照射剂量的增大而增加，呈照射时间依赖性(P＜0.05)和剂量依赖性(P＜0.05)；X射线照射后肺癌细胞XRCC1mRNA的表达水平均先增高后降低，4Gy组和8Gy组在72h表达水平最高(P＜0.05)，16Gy组和32Gy组在48h表达水平最高(P＜0.05)。结论：X射线照射可引起肺癌细胞XRCC1mRNA表达水平的明显改变，提示DNA碱基切除修复机制可能在肺癌细胞对放疗的耐受中起了重要的作用。【关键词】肺癌细胞；X射线；抑制率；X线修复交叉互补基因1［Abstract］Objective:TostudytheeffectofXrayonexpressionlevelsofXrayrepaircrosscomplementinggene1(XRCC1)inlungcancercells,andexploretheeffectofDNAbaseexcisionrepairmechanismintheresistancetoradiotherapyoflungcancercell.Methods：CellinhibitionratiowasmeasuredusingMTTassay.TheexpressionlevelofXRCC1mRNAwasmeasuredbyRFQPCRassay.Results：Inthemajority,therateofproliferationinhibitingoflungcancercellswasincreasedalongwiththeradiationtimeofXrayprolonging(P＜0.05)andtheincreaseofradiationdose(P＜0.05).TheexpressionlevelofXRCC1mRNAinthelungcancercellswasincreasedsignificantlyaftertreatmentwithXray,andthendecreased.ThehighestexpressionlevelsofXRCC1mRNAof4Gygroupand8Gygroupwereat72h(P＜0.05),andthehighestexpressionlevelsofXRCC1mRNAof16Gygroupand32Gygroupwereat48h(P＜0.05)aftertreatmentwithXray.Conclusion：Xrayhadafairlyobviousfunctiontodecreasesproliferationoflungcancercell,anditcouldinducetheincreaseoftheexpressionlevelsofXRCC1mRNAinlungcancercells.TheresultssuggestthatDNAbaseexcisionrepairmechanismmayplayanimportantroleinresistancetoradiotherapyoflungcancercell.［Keywords］lungcancercell;Xray;inhibitionratio;Xray---本文于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---repaircrosscomplementinggene1肺癌是当今全球发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一。非小细胞肺癌（NSCLC）占所有肺癌的80%～90%，其中约45%的NSCLC患者在确诊时已属于局部晚期（ⅢA和ⅢB期）。放疗联合化疗是治疗局部晚期NSCLC和其他原因不能手术的早期NSCLC患者的主要手段，其中放疗在强化局部肿瘤控制，防止局部复发中具有重要的作用。放射线引起DNA损伤包括碱基损伤、单链断裂（singlestrandbreaks，SSB）、双链断裂（doublestrandbreaks，DSB），DNADNA交联和DNA蛋白质交联等损伤［1］。双链断裂是DNA的致死性损伤，但在电离辐射的作用下，更多的是碱基损伤和单链断裂，这种损伤修复需要通过碱基切除修复(baseexcisionrepair,BER）途径。Xrayrepaircrosscomplementinggene1(XRCC1)是碱基切除修复和单链断裂修复途径中一个重要的DNA损伤修复基因，其编码产物作为脚手架蛋白，通过直接与聚合酶β，DNA连接酶Ⅲ和多聚ADP核糖聚合酶（PARP）形成复合物，共同参与修复因电离辐射和氧化损伤引起的碱基损伤和单链断裂［2］，而且在该过程中可能起重要作用。本研究采用实时荧光定量PCR技术检测肺癌细胞经X射线处理后XRCC1的表达水平，探讨DNA碱基切除修复机制与单链断裂修复机制在肺癌细胞对放疗发生耐受中的作用。1材料与方法1.1主要试剂与仪器DMEM培养基，0.25%胰蛋白酶(Gibco公司),新生牛血清(兰州民海生物工程有限公司)，Clinac600c6MVX射线(Varia公司)，噻唑蓝，二甲亚砜(Amresco公司)，倒置式生物显微镜（TE300,Nikon)，HT2型酶标仪(Austria公司)...