弓形虫抗体免疫胶体金快速检测试纸条的研制

弓形虫抗体免疫胶体金快速检测试纸条的研制中国兽医科学2007,37(01):29—32VeterinaryScienceinChina屮图分类号:S852+723文献标识码:A文章编号:1673—4696(2007)01—0029—04弓形虫抗体免疫胶体金快速检测试纸条的研制王艳华,李克生.,才学鹏,杜慧芳,李学瑞,张德林(1.中国农业科学院兰州兽医研宄所家畜疫病病原生物学W家重点实验室甘肃省动物寄生虫痫重点实验室,甘肃兰州730046;2.兰州雅华生物有限公司,甘肃兰州730000)摘要:将样品垫(加样区),包被了弓形虫排泄分泌抗原和胶体金结合物的结合垫,包被了弓形虫排泄分泌抗原和抗弓形虫抗体的硝酸纤维素膜,吸水垫依次首尾互和衔接粘贴在白色塑料板上,组装成检测弓形虫抗体的免疫胶体金快速试纸条.然后用其进行动物弓形虫病血淸抗体检测,并用弓形虫IHA诊断试剂进行对照试验.经对已知弓形虫阴,阳性血清检测,与弓形虫IHA检测结果的符合率为82.5,金标试纸条较弓形虫IHA诊断试刺能提前2d检测到抗体.结果表明,检测弓形虫抗体免疫胶体金试剂(金标试纸条)的敏感度高于IHA.关键词:弓形虫;快速检测;排泄分泌抗原;羊抗弓形虫抗体;肢体金试纸条DevelopmentofcolloidalgoldteststripforrapiddetectionofToxoplasmaantibodyWANGYan—hua.LIKesheng,CAIXue—peng’,DUHui—fang.,LIXuerui,ZHANGDe—lin*(l.KeyLaboratoryofAnimalParasitologyoJGansuProvince-StateKeyLaboratoryofVeterinaryEtiologicalBiology/LanzhouVeterinaryResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,LanzhoU730046,China;2.LanzhouYahuaBiologyCo”Ltd,Lanzhou730000,China)Abstract:SampIepond,gold—labledpond,nitrocellulose(NC)membranescoatingexcretory/secretoryantigenandantibody,andabsorptionpondwerestickedonPVCboardinturntoassemblecolloidalgoldteststripforrapiddetectionofToxoplasmaantibody.Theassembledteststripswereusedfordetectingserafrompigsandrabbitswithtoxoplasmasis.ResultsbytheteststripswerecomparedwithresultsbyIHA.Theresultsbythestripsshared825identitywiththatbyIHA.Thepresenceofanti—Toxoplas—maantibodydetectedbythestripswas2daysaheadofthatbyIHA.Thesensitivityoftheteststripisbet—terthanthatoflHA.Keywords:Toxoplasma;rapiddetection;excrete/secreteantigenlgoat—antiToxopIasmaantibody;colloidalgoldteststrip弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种专性细胞寄生原虫,具有广泛的宿主群,在世界范围内流行,引起人兽共患寄生虫病.对艾滋病患者,器官移植及恶性肿瘤患者等免疫功能严重损伤或抑制者,弓形虫作为一种机会感染因子,可致患者死亡.弓形虫病不但是医学上的一种重要疾病,而且是影响人类优生优育的一个重要生物因子,怀孕妇女感染弓形虫,无论有无临床症状,大约50可以发生母胎垂直感染,使胎婴出现先天出牛.缺陷(如智力低下或先天畸形等).怀孕动物出现流产,猪感染弓形虫会引起大批死亡但目前对动物弓形虫病的检测和诊断主要是采用弓形虫间接血凝试验(IHA),对人弓形虫病的检测和诊断主要采用弓形虫EUSA法,然而这些诊断方法分别存在灵敏度低,操作程序复杂,收稿日期:2006—10—10,修回日期:20061214基金项目:甘肃省科技型屮小企业技术创新基金项目(2GS055—A43—057)作者简介:王艳华(1976—),女,内蒙古赤峰人,研究实习员.张德林为通讯作者,主要从事动物寄牛.虫免疫的研究,Tel:0931—8342679,E—mail:zhangdl2005@163.com屮国兽医科学第37卷费吋等问题.为了控制本病的流行,建立一种科学,快速,准确的检测和诊断方法是非常必要的.木研宄旨在研制一种用于检测弓形虫抗体的免疫胶体金快速试纸条以解决上述难题.1材料1.1主要试剂和材料SephacrylS一300凝胶填料购自Amersham公司,HAuCl购自中国医药集团上海化学试剂公司,酪蛋G和牛血清G蛋O(BSA)购自美国Sigma公司,硝酸纤维素膜,滤器和滤膜购自Millpore公司,玻璃纤维素膜,吸水垫,不干胶以及PVC垫板购自上海金标生物技术有限公司.间接血凝试剂由木实验室研制(符合中华人民共和国农业行业标准).1.2待检...

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