细胞周期调控相关蛋白CDK4、CDK6在子宫内膜样腺癌中的表达与临床【摘要】目的探讨细胞周期调控相关蛋白CDK4、CDK6在子宫内膜样腺癌中的表达、相互关系与临床意义。方法应用免疫组织化学，检测50例子宫内膜样腺癌及50例不典型增生子宫内膜及50例子宫内膜增生和40例正常子宫内膜中的CDK4、CDK6蛋白的表达情况。结果CDK4与CDK6的阳性表达在正常子宫内膜、子宫内膜增生、非典型增生子宫内膜和子宫内膜样腺癌中依次增加，组间差异具有统计学意义（P<0.05），与子宫内膜样腺癌的分化程度，Dukes分期及淋巴结转移呈正相关关系（P<0.05）。结论CDK4与CDK6蛋白的高表达可能在子宫内膜样腺癌的发生、发展、浸润及转移中起一定作用，对临床判断子宫内膜样腺癌的恶性程度和预后具有一定的意义，还可能作为一种有价值的肿瘤标志物。【关键词】子宫内膜样腺癌CDK4；CDK6；免疫组织化学doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.05.029：1004-7484（2014）-05-2428-021资料与方法1.1资料1.1.1组织标本选取2005年1月――2012年6月中山大学附属第五医院病理科保存的资料完整的手术标本，经常规病理证实，术前未做任何激素替代治疗及放、化疗等治疗，病理诊断及分类参照WHO的分类标准。其中子宫内膜样腺癌组50例，年龄（52.8±6.5）；非典型增生子宫内膜组50例（轻-中度30例，重度20例），年龄（47.9±5.3）；子宫内膜增生组50例（复杂性20例，单纯性20例），年龄（44.5±4.6）；另取同期因其他原因行子宫切除术的正常子宫内膜组40例作为对照组，年龄（48.2±4.3）。1.1.2主要试剂CDK4单克隆抗体、CDK6单克隆抗体、SP试剂盒及DAB显色试剂盒均购武汉博士德公司，其中SP试剂盒为即用型，其余浓缩型抗体稀释度均为1：50。1.2方法1.2.1实验方法免疫组织化学染色采用标准化的SP法，按试剂盒说明书所示步骤进行操作，用PBS液代替一抗作为阴性对照，用已知阳性的结肠癌组织为阳性对照。1.2.2结果判断CDK4、CDK6阳性表达信号为细胞核内出现棕黄色颗粒。参照Fromowitz方法，两名病理医生每张片随机抽取20个高倍视野，按阳性细胞所占百分比并参考着色强度分级如下：①着色范围：无着色为0，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；②阳性范围：<5%为0分，5%-25%为1分，26%-50%为2分，51%-70%为3分，>70%为4分。两项结果相加<2分为阴性（-），2-3分为弱阳性（+），4-5分为中度阳性（++），6-7分为强阳性（+++）。1.2.3统计学分析所有数据采用χ2检验及相关性分析，用SPSSl3.0软件包，P<0.05有统计学意义。2结果2.1CDK4、CDK6在子宫内膜中的表达CDK4、CDK6在子宫内膜样腺癌组中的阳性率分别为72.0%（36/50）、68.0%（34/50），从正常、内膜增生、非典型性增生至子宫内膜样腺癌，CDK4、CDK6蛋白的阳性表达呈逐渐上升，组间差异具有统计学意义（P<0.05），见表1。2.2子宫内膜样腺癌中CDK4、CDK6的表达与临床病理学特征的关系CDK4、CDK6在子宫内---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---膜样腺癌中的高表达与子宫内膜样腺癌的分化程度、淋巴结转移、Dukes分期等病理因素相关，见表2。3讨论CDK6蛋白也是CDKs蛋白家族中的核心成员，并参与多种肿瘤细胞的分化[2]，有研究表明CDK6蛋白的过度表达，与细胞异常增殖、肿瘤的发生和转移、浸润密切相关。有学者通过反义核酸技术在转录和翻译水平上阻断CDK6在异常增殖细胞中的异常表达，最终导致异常细胞表型的逆转或凋亡。在人类多种肿瘤中有过表达，表明CDK6参与肿瘤的发生、发展，并与肿瘤的组织学分型、淋巴结转移、临床分期和预后有关。有研究表明CDK6蛋白高表达涉及了子宫内膜样腺癌的发生、发展过程。多因素分析的结果显示，CDK6缺失并不影响正常细胞增殖，提示CDK6有可能成为预测肿瘤预后的指标和辅助治疗的新靶点，可以作为很好的治疗癌症的靶点本组的研究结果显示，在正常子宫内膜、子宫内膜增生、非典型增生、子宫内膜样腺癌中，CDK4、CDK6蛋白的阳性表达呈上升趋势，在非典型增生组和子宫内膜样腺癌中阳性表达均显著高于正常组和增生组（P<0.05），这与内膜增生―内膜非典型增生―子宫内膜样腺癌疾病的自然进展演变过...