[作者简介]肖香兰(1964-,女,主管检验技师,主要从事理化检验研究。【化学测定方法】保健食品中总黄酮的测定方法肖香兰,罗仁才,张楠(北京市疾病预防控制中心营养与食品卫生所,北京100013[摘要]目的:建立以石油醚作为洗脱剂测定保健食品中总黄酮的方法。方法:样品经甲醇提取,用聚酰胺粉吸附,经石油醚洗脱杂质后,在波长360nm处,用分光光度法测定保健食品中总黄酮的含量。结果:采用石油醚作为洗脱剂,总黄酮浓度的含量在0~2010μg/ml范围内与吸光度值呈良好的线性关系(r=019998,方法的检出限为215μg。测定样品的相对标准偏差在4160%~6149%之间,回收率在86167%~101150%之间。与用苯作为洗脱剂方法测定结果比较,两者无显著性差异。结论:该方法操作简便,重现性及稳定性好,线性范围宽,特别是减少了苯对检测人员和环境的污染,可用于保健食品中总黄酮的测定。[关键词]保健食品;总黄酮;t检验[中图分类号]R15515[文献标识码]A[文章编号]1004-8685(200706-1037-02DeterminationoftotalflavonoidsinhealthfoodXiaoXiang2lan,LuoRen2cai,ZhangNan(BeijingCenterforDiseaseControlandPrevention,Beijing100013,China[Abstract]Objective:Toestablishamethodfordeterminingflavonoidsinhealthfood1Methods:Thetotalflavonoidsinhealthfoodweredeterminedbyspectrophotometafterthesamplesweredistilledbymethanolandpurifiedbypetroleumether1Thedetec2tionwavelengthwas360nm1Results:Databetweentheflavonoidscontentandabsorbanhadabetterlinearrelationshipintherangeof0~2010μg/ml(r=0199981Thedeterminationlimitswere215μg1Therelativestandarddeviationswerebetween4160%~6149%1Therecoverieswereintherangeof86167%~101150%1Purifiedbypetroleumetherinsteadofbenzene,theresultshadnoobviousdifference1Conclusion:Themethodissimple,stableandaccurate,andithasbeenappliedsuccessfullytodetermineflavonoidsinhealthfood1[Keywords]Healthfood;Totalflavonoids;tdetection黄酮类化合物也称类黄酮,是广泛存在于植物界的一大类多酚化合物,多以甙类形式存在,也有一类以游离形式存在。黄酮类化合物泛指两个苯环通过中央三碳链相互连接而形成的一系列化合物,母体结构为二苯基色酮。许多黄酮类化合物都有重要的生物活性,如抗氧化、抗肿瘤、保护心血管、抗突变等功能。类黄酮以其独有的特性日益成为全世界研究的热点,在医学、食品、保健食品等领域得到广泛的应用。目前保健食品中总黄酮的测定通常方法有硝酸铝比色法和直接紫外测定法,在《保健食品检验与评价技术规范》中,采用的是直接紫外测定法,在测定中需以苯洗脱杂质,但是,苯的毒性很强且用量大,对环境极易造成污染,并对实验者造成伤害。因此本文用石油醚替代苯,实验结果满意。1材料与方法111仪器与设备7220型分光光度计,恒温水浴箱,25ml具塞比色管,滤纸,漏斗,分析天平(万分之一。112试剂11211甲醇分析纯。11212石油醚沸程30℃~60℃。11213总黄酮(以芦丁计标准溶液称取芦丁010100g,加甲醇溶解并定容至100ml,即得0110mg/ml。113测定方法11311标准曲线吸取芦丁标准溶液:0100、0105、0110、0120、0140、110、1150、2100ml于10ml比色管中,加甲醇至刻度,摇匀,于波长360nm比色,求回归方程,计算试样中总黄酮含量。11312样品处理。11313样品测定称取适量试样,加乙醇定容至2510ml,摇匀,80℃水浴提取2~3h,放冷,重新定容,吸取上清液110ml于蒸发皿中,加聚酰胺粉吸附,于水浴上挥去乙醇,转入层析柱,先用2010ml石油醚洗脱,然后用甲醇洗脱黄酮,定容至25ml。此液于波长360nm测定吸收值。2结果与讨论211波长选择黄酮类化合物是母体结构为二苯基色酮的一类化合物的(下转第1142页和小批量样品的测定。其原理:样品的BPO经乙醚提取浓缩后,被KI还原成苯甲酸,在气相色谱上分离测定,与标准品比较定量。气相色谱仪附FID检测器,色谱柱为玻璃柱2m3312mm内装60~80目ChromsorbWAWDMCS涂以5%+11%DEGS+磷酸。方法的检出限为015mg/kg。方法的准确度和精密度为:过氧化苯甲酰浓度在0102~012g/kg范围内,回收率为8318%~9410%,RSD为315%~511%。线性范围在每毫升含有过氧化苯甲酰20...