DURONDEAU梨组织培养中凝胶介质的改进

DOI:10」079/1VP2OO6753InVitroCell.Dev.Biol.—Plant42:287—290,May-June2006©2006SocietyforInVitroBiology1054-5476/06$18.00+0.00“DURONDEAU”梨组织培养中凝胶介质的改进NEOLILUCYSZYN12,MARGUERITEQUOIRIN\LUCIANAL.F.RIBAS3.HENRIQUES.KOEHLER3,ANDMARIARITASIERAKOWSKI1*i生物大分子实验室,化学系,巴拉那联邦大学,邮箱19081,CuritibaCEP81531-990,巴拉那,巴西2微组织繁殖实验室,植物学系,巴拉那联邦大学,邮箱19031.CuritibaCEP81531-990.巴拉那,巴西彳植物科学系,1906LCuritibaCEP81531-990巴拉那,巴西(2005-3-18收稿,2006-2-9接受,编辑R.P.Niedz〉摘要我们研究了用半乳甘露聚糖(galactomannan,GM)部分替代培养基中的琼脂(agar),对“DURONDEAU”梨(PyruscommunisL.cv.'Durondeau^组织培养的影响。GM提取自肉桂(Cassiafastuosa)或者四棱叶瓜尔豆(Cyamopsistetragonolobus)(瓜尔胶,一种商品化的GM)的种子,把它与琼脂等比例混合,FC成琼脂和GM终浓度均为0.3%(w/v)的凝胶。与只含有0.6%(w/v)琼脂作为凝胶剂的培养基比较培养过程中成苗和生根的效果。以琼脂/瓜尔胶混合物或者琼脂/肉桂GM混合物作为凝胶剂的培养基生根率分别增长32%和17%。使用改进的培养基能提高培养物生根的数量和生根率。生根率最高达到91%,采用琼脂/肉桂GM混合物作为凝胶剂,配合9.80引味-3-丁酸。同时我们观察到在这种培养基上茎段基部产生的愈伤组织更少。离体培养物在新的培养基中成苗和生根都表现得更好,而且新的凝胶剂价格上要便立很多,这预示琼脂/GM混合凝胶剂在植物组织培养中将会有极好的应用前景。关键词凝胶剂替代品;半乳片露聚糖;Pyruscommunis;纽织培养介质。简介微组织繁殖|技术己经发展成为很多种果树的快速克隆繁殖的手段(JainandIshii,2003)0追求最大的茎增殖是基本目标,培养基使用的凝胶剂的影响受到很大的关注。我们一般用来凝固培养基的琼脂是山红藻(Rhodophyta)中提取到的—类多糖,主要是(Graciliaceae)和葡枝凝花菜(Gelidiaceae)(Glicksman,1983)O多糖是■种昂贵的成分,并且会影响离体植物的生长发育(RombergerandTabor,1971;Singha,1984;ScholtenandPierik,1998)0在培养基中使用琼脂的一个普遍问题是会导致植物过渡含水和坏死(Deberghetal.,1981;Pasqualettoetal.,1988)©有人己经尝试过一些琼脂的替代品,例如在苹果、梨和红莓的茎段增殖屮使用玉米淀粉和Gelritew®的混合物(Zimmeirnaneial.,1995)。另外,Ferrietal.(1998)在苹果砧木MM111的生根培养中用木薯淀粉部分替代琼脂,瑕近有人发现提収自挛叶豆(Hymenaeacourbaril)种子的木糖葡聚糖在Marubakaido苹果砧木培养中作为琼脂的部分替代物非常有效(Lima-Nishimuraetal.,2003)。植物种子中也含有大量其他的碳水化合物材料像半乳甘露聚糖(GM)(DeaandMorrison,!975)0山四棱叶瓜尔豆(Cyamopsistetragonolobus)利〔了中提取的瓜尔胶和山豆角树(CeWcmiasiliqua)种了中提取的刺槐豆胶是丁•业中应用最广泛的GMQReicheretal.(1991),Piresetal.(2001)和Sierakowskietal.(2002)研究了巴西2本地和国外引进的能替代GM的物种资源。其中包括Cassiafastuosa,就是人们所说的肉桂,豆科苏木亚科的成员,从中提収岀了另一种GM用于这次工作.向培养基中添加GM可以通过控制含水相的流动性达到我们需要的质地和牢固程度。同吋对凝胶含水系统特性也有作用,因为GM会与其他的多糖如琼脂和黄色索发生协同反应(ViebkeandPiculell,1992;1'通讯作者,E-mail:sierakowski@ufpr.br2micropropagation,微组织繁殖,旳-时也泛指植物组织培养。3木文作者在巴西做研究。译者注。Zhanetal.,1993)。本文将介绍我们以GM作为琼脂的部分替代物,用于“Durondeau”梨的微纽•织繁殖。材料和方法植物材料、'Durondeau”梨(PyruscommunisL.cv.'Durondeau')的茎段采£]立体培养QL培歹基(QuoirinandLepoivre,1977)上的材料。凝胶剂商品瓜尔胶(印度橡胶工业有限公司,焦达普尔,印度),提収自四棱也瓜尔豆(C.tetragoiwlobus')种子,山HerbariumS.A.(巴西,PR,Curitiba,ProdutosNaturais公司)提供。琼脂产自Merck公司(KgaA,6427,徳国,批号k26477915945)。肉...

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