天津药学2001年4月第13卷第2期vitro1JClinPharmSci,1996,5(2):8816郑俊民主编1经皮给药新剂型1北京:人民卫生出版社,1997178～8617李娅芳,邓英杰,刘淑琴,等1透皮吸收制剂研究进展1中国药学7eryofheparinbyeletroporation.Biotechnology,1995,13(11):120520MichealM,VijeyalakshmiG,Liposome.Aselectivedrugdeliverysystemforthetopicalrouteofadministration:gelclosagoform.JPharmPharmacol,1982,34(7):47221朱于村1促进透皮给药的物理和生化方法1国外医学药学分・杂志,1997,32(1):318陈小平1电致孔法促进药物的透皮吸收1国外医学・药学分册,1999,26(4):22219PrausnitzMR,EdelmanER,Gi.Trandermaldeliv2mmJA,etal册,1993,10(6):357(收稿日期:2000212226)反义核酸的研究进展赵倩(天津医科大学药学院天津300203)摘要从反义核酸的作用机理、。反义核酸作为一种生化药物,在治疗病毒感染性疾病、心血管疾病以及肿瘤、,择性和高效低毒。关键词中图分类号:Q52文献标识码:A04,从而达到控制疾病的目的。反义技术是一种新的药物开发方法,包括反义反义RNA等。利用这一技术研制的药物就称为反义药DNA、物。反义寡核苷酸[1](antisenseoligonucleotide,ASON)是指那些能与特定的DNA、RNA以碱基互补配对的方式结合,并阻止其转录与翻译的短核酸片段。1反义核酸的作用机理蛋白质在人体新陈代谢中扮演着非常重要的角色,无论是宿主疾病(如肿瘤)还是感染性疾病(如肝炎),几乎所有的人类疾病都是由蛋白质的变异所引起的。从DNA向蛋白质的信息转移过程中可以知道在生物体内存在着许多寡聚核酸的潜在作用位点。在反义技术中,寡聚核酸以信使RNA的专一性序列作为靶物,并由此阻止信使RNA将信息翻译成蛋白质。反义核酸的作用机理基于碱基配对原则,可通过与靶RNA进行碱基配对结合的方式参与对照相关基因表达的调控。其作用方式有:(1)反义RNA与mRNA结合形成互补双链阻断核糖核蛋白体同mRNA的结合,从而抑制了mRNA翻译成蛋白质的过程。(2)反义DNA能与靶细胞形成一种三链核酸(triplehe2增强lixnucleicacid),它通过作用于控制基因转录的转录子、子和启动子区,对基因的转录进行调控。(3)反义核酸与mRNA的结合可阻挡mRNA向细胞质的运输。(4)反义核酸与mRNA结合后使得mRNA更易被核酸酶识别而降解,从而大大缩短了mRNA的半衰期。上述4种作用途径都可表现为对基因表达的抑制或调节,且这种调节是具有特异性的[2～4]。2反义核酸的药理作用211BC122反义寡核苷酸对细胞凋亡的影响21111诱导胃癌细胞的凋亡路平等[5]采用四唑蓝快速比色法(MTT)比较2条人工合成的反义寡核苷酸(ASODN)直接作用及其以脂质体(DOTAP)为载体对胃癌细胞的控制效果。应用流式细胞术和逆转录聚合酶链反应(RT2PCR)检测ASODN对BC122蛋白质和mRNA表达量的调控,应用相差显微镜、电子显微镜及流式细胞术等方法,观察BC122ASODN诱导BGC2823胃癌细胞凋亡的效果。结果显示,2条ASODN抑制胃癌细胞增殖的作用呈浓度和与时间依赖性,且靶位点于mRNA蛋白编码区(ASODN2)和以DOTAP为载体的ASODN对胃癌细胞的增殖抑制效果为佳。ASODN作用于胃癌细胞,降低BC122蛋白和mRNA表达。BC122凋亡小体出现、ASODN处理胃癌细胞,观察到肿瘤细胞缩小、染色质浓缩、凋亡峰等凋亡特征改变。由此可得出BC122ASODN可降低BC122mRNA和蛋白表达,诱导胃癌细胞凋亡的结论。21112促进乳腺癌MCF27细胞凋亡细胞的凋亡如同细胞的增殖一样受多种基因(如BC122、C2MYC、P53等)调控[6]。Hockenbery等[7]认为BC122基因族在细胞凋亡控制中的作用最具重要意义。近年来研究表明该基因还具有细胞周期抑制功能。郑军等[8]使用电转染法将合成的针对BC122mRNA的反义寡核苷酸导入MCF27乳腺癌细胞,用荧光显微镜、电镜、免疫组化法及流式细胞仪检测反义寡核苷酸对乳腺癌细胞凋亡、BC122表达及细胞周期的影响。结果显示,经BC122反义寡核苷酸作用后,MCF27细胞BC122基因表达降低,凋亡细胞数增多。作用前后差异有显著意义(P<0105);G0～G18天津药学2001年4月第13卷第2期有连续的特异性。这与抑制细胞周围和细胞内bFGF的表达有关。bFGF再合成的减少由于外源性bFGF的加入而部分可逆。此作用可持续48～72小时,随后消失。如果24小时...