绵茵陈药材高效液相色谱指纹图谱研究作者：王凤云，江滨，曾元儿，张军【摘要】目的建立绵茵陈药材的HPLC指纹图谱，为其质量控制提供依据。方法采用反相高效液相色谱法，并进行相应的方法学考察，对不同产地和批次绵茵陈药材进行质量评价。结果采用KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱，流动相以乙腈和体积分数为0.2％的磷酸水溶液进行梯度洗脱，柱温35℃，流速1.0mL·min-1，检测波长327nm；该方法稳定性、精密度、重复性良好,可用于绵茵陈药材的指纹图谱测定；不同批次的绵茵陈药材在图谱上存在一定的差异。结论该结果可为绵茵陈药材的质量控制提供依据。【关键词】绵茵陈；高效液相色谱法；指纹图谱Abstract:ObjectiveToestablishHPLCfingerprintsofHerbaArtemisiaescopariaeandoffersomeinformationforthequalitycontrolofHerbaArtemisiaescopariae.MethodsandResultsThefingerprintsofHerbaartemisiaescopariaefromdifferenthabitatsandbatcheswereestablishedbyreversed-phasehighperformanceliquidchromatography.ThesamplewasanalyzedonaKromasilC18（250mm×4.6mm，5μm）columnundergradientelution.ThemobilephaseconsistedofacetonitrileandH2O(0.2%H3PO4)andtheflowratewas1.0mL·min-1.Thedetectionwavelengthwas327nm.Thestability,accuracyandcredibilityofthismethodweregood.ConclusionThismethodofferssomeinformationforthequalitycontrolofHerbaArtemisiaescopariae.Keywords:HerbaArtemisiaescopariae;HPLC;HPLC;fingerprints茵陈为菊科植物滨蒿ArtemisiascopariaWaldst.etKit.或茵陈蒿ArtemisiacapillariesThunb的干燥地上部分。其中春季采收的习称“绵茵陈”，具有清湿热、退黄疸的功效［1］。文献报道，不同产地和采收期的茵陈药材质量差异较大［2-3］。本实验采用反相高效液相色谱法对绵茵陈药材建立指纹图谱，并进行相应的方法学考察，初步考察市售不同批次绵茵陈药材的质量差异，为绵茵陈药材的质量控制提供依据。1仪器与试剂高效液相色谱仪（DIONEX）配P680高压泵；ASI100自动进样器；UVD170U检测器；STH585型柱温箱；Chromeleon程序控制系统。绿原酸对照品（中国药品生物制品检定所提供，0736-200117），甲醇、乙腈（色谱纯，MERCK公司）；其他试剂均为分析纯。2方法与结果2.1品种鉴定指纹图谱所用的不同批次绵茵陈药材均购于广州市药材公司、广州清平药材市场、广州致信药业有限公司，其产地分别为江西（市售1）、山西（市售2）、山东（市售3）、安徽（市售4）、河南（市售5）、山西（市售6）、陕西（市售7）、山东（市售8）、宁夏（市售9）、安徽（市售10）。根据《中国药典》2005版一部茵陈［性状］项下的规定，与《中华人民共和国药典中药彩色图谱集》、《新编中药志》中照片与描述，经广东药学院中药鉴定教研室刘基柱老师鉴定为菊科植物滨蒿ArtemisiascopariaWaldst.etKit或茵陈蒿ArtemisiacapillariesThunb春季采收的干燥幼苗。2.2供试品溶液的制备取本品粉末约0.5g，精密称定，加入体积分数为80％的乙醇100mL，置水浴上加热回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣用体积分数为80％的乙醇溶解，置25mL棕色量瓶中，加体积分数为80％的乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.3对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定,置棕色量瓶中，加甲醇制成每1mL含40μg的溶液，即得。2.4色谱条件KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱，流动相采用二元体系，流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.2％的磷酸水溶液，梯度洗脱程序：0min（5％A）,10min（10%A），45min（25％A）；柱温35℃，流速1.0mL·min-1，检测波长327nm。2.5指纹图谱试验的方法学验证2.5.1绿原酸标准曲线的制备取绿原酸对照品溶液（40.8μg/mL），分别进样2、4、6、8、10、16、20μL，按照上述色谱条件进行测定，以绿原酸质量为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程为：Y=2553.1X+2.8847,（r=0.9999），表明绿原酸在0.0816～0.816μg范围内线性关系良好。2.5.2稳定性试验取同一份供试品溶液，分别在0、1、2、4、8和12h进行检测，直观指纹图谱全貌无明显变化，经中药色谱...