健脾与补肾对脾虚模型大鼠脑内生长抑素水平和受体基因表达的影响作者：钱会南,王乐,胡雪琴,沈丽波【摘要】目的比较健脾与补肾对脾虚模型大鼠脑内生长抑素(SS)水平和受体基因表达的影响。方法采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,以免疫组化和原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层SS及生长抑素受体1(SSR1)mRNA基因表达变化。结果模型组上述脑区SS免疫阳性反应物及SSR1mRNA表达阳性反应物明显降低,与正常组比较差异显著；健脾组与补肾组上述脑区的SS免疫阳性反应物及SSR1mRNA表达阳性反应物明显升高,与模型组比较差异显著,与正常组比较无显著差异。结论脾虚模型大鼠脑内对学习记忆有促进作用的SS水平和SSR1mRNA基因表达有变化,健脾与补肾可能通过调节SS水平和SSR1基因表达而影响学习记忆能力。【关键词】脾虚模型；生长抑素；生长抑素受体1mRNA基因表达；大鼠Abstract：ObjectiveTocompareontheinfluenceofinvigoratingspleenandrestoringvirilitytotheSSlevelandSSR1geneexpressioninbrain.MethodThespleeninsufficiencymodelofratwasestablishedbyadoptingbitterdeclinediarrhea,wildeatingandoverworking.SSlevelandSSR1geneexpressionchangeofhypothalamusventralkernel,hippocampiCA1areaandforeheadcorteweredetectedbyimmunohistochemistryandinsituhybridizationtechniques.ResultInthemodelgroup,theimmunoreactionmasculinesubstanceofSSandSSR1mRNA,hypothalamusventralkernel,hippocampiCA1areaandforeheadcortexdecreasedobviously.TheimmunoreactionmasculinesubstanceofSSandSSR1mRNAonabovementionedpartsinthegroupofinvigoratingspleenandrestoringvirilityincreaseddistinctly.ConclusionInthemodelgroup,theSSlevelandSSR1geneexpressioninbraintopromotingstudymemoryabilitychanged.InvigoratingspleenandrestoringvirilitymayaffectstudymemoryabilitybyregulatingtheSSlevelandSSR1geneexpression.Keywords：invigoratingspleenandrestoringvirility；SS；SSR1mRNAgeneexpression；rat脾与肾在神志活动中具有重要作用,而且脾与肾先天与后天相互资生、相互促进。本研究从检测脾虚模型大鼠脑内与学习记忆相关的生长抑素(SS)水平和生长抑素受体1(SSR1)mRNA基因表达变化及健脾与补肾的干预影响,探讨脾藏意、肾藏志理论。---本文于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---1实验材料1.1动物清洁级雄性Wistar大鼠,体重(160±10)g,北京维通利华实验动物技术有限公司提供。1.2主要仪器OLYMPUS光学显微镜(日本)；OLYMPUS自动显微镜照相系统(日本)；DH3600AB电热恒温培养箱(天津)；TS-100脱色摇床(北京)；BDS1电热三用水浴箱(北京)；DHG9075A电热恒温鼓风干燥箱(上海)；Leitz切片机(德国)。1.3主要试剂SS(1抗多克隆兔抗),上海第二军医大学神经解剖教研室提供；正常羊血清、H2O2、2抗(生物素标记的IgG)、3抗(ABC复合物)、PBS、枸橼酸钠、3-3二氨基联苯胺(DAB)均购自北京中山生物公司。SS原位杂交试剂盒(包括杂交液、地高辛标记的SSR1cRNA探针、BCIP/NBT显色剂等),上海第二军医大学神经解剖教研室提供。Anti-Digoxigenin-AP(Roche公司)；牛血清蛋白冻干粉、蛋白酶K、DEPC为美国Sigma公司产品；tritonX-100、甘氨酸、多聚甲醛、Tris、EDTA购于北京鼎国生物公司。其它试剂均为国产分析纯。2实验方法2.1实验药物配制造模药物由大黄、厚朴、枳实组成,按2∶1∶1配备。健脾方为归脾汤原方；补肾方为六味地黄丸原方。药材由金象大药房提供。以上方药分别常规煎煮、过滤,常规浓缩为1g/mL药液,冰箱储存备用。2.2动物分组与处理常规适应性饲养1周后,40只大鼠随机分成正常组、模型组、健脾组、补肾组,每组10只。采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法造模[1]。造模组每日灌胃造模药7.5g/kg,隔日禁食,自由饮水,每日于25℃水中游泳至力竭。健脾组造模处理加胃饲归脾汤,每日7.5g/kg；补肾组造模处理加胃饲六味地黄丸,每日7.5g/kg。上午对除正常组外的3个组胃饲造模药,正常组予等量生理盐水；下午健脾组、补肾组分别胃饲相应...