3•耗基丁酸对体外培养的神经干细胞增殖及分化的影响杨志倩I,吕海侠2,焦倩2,李明川"王媛媛2,冯敏娟2,卢晓云I(1.西安交通大学生命学院,西安710049;2.西安交通大学医学院,西安710049)摘要:冃的:研究体外条件下3■梵基丁酸(3-HB)对神经干细胞(NSCs)增殖及分化的影响。方法:分离孕14.5天大鼠胚胎大脑皮质NSCs,进行原代培养;培养至第三代的NSCs分别用0.1、0.05、0.02、0.01g/l3-HB处理,未加药组作为对照,CCK-8试剂盒检测细胞增殖、活力,免疫细胞荧光化学观察NSCs分化情况。结果:与对照组相比,3-HB处理对NSCs的增殖、活力没有显著影响;3-HB处理组P-lubulin阳性细胞(神经元)比例增加,GFAP阳性细胞(胶质细胞)比例没有显著变化。结论:3-HB对分离培养的NSCs在体外的增殖和活力无明显影响,但能够促进具向神经元方向分化。关键词:3-耗基丁酸;神经干细胞;细胞增殖;细胞分化中图分类号:Q28Theeffectsof3-hydroxybutyrateontheproliferationanddifferentiationofneuralstemcellsinvitroYANGZhiqiam,LVHaixia2,JIAOQian?,LIMingchuam,WANGYuanyuan?,FENGMinjuan?,LUXiaoyum(1.Schooloflifescienceandtechnology,Xi*anJiaolongUniversity,Xi'an710049;2.MedicalSchool,Xi'anJiaotongUniversity,Xi'an710049)Abstract:Objective:Learntheeffectof3・hydroxybutyrate(3-HB)ontheviabilityanddifferentiationofneuralstemcellinvitro・Method:NSCswereisolatedfromthecerebralcortexofratembryosonembryonicday14-15,andP3cellswereused;NSCsweretreatedwithdifferentconcentration(0.1、0.05、0.02、0.0lg/l)of3-HB,untreatedascontrol.CellviabilitywasdetectedbyCCK-&“ndinmiunecellfluorescencechemistrywasusedtostudythedifferentiationofNSCs・Result:Cellviabilityhadnosignittcan【differeneebetween3-HBtreatedgroupandcontrol.Thepercentageof卩-tubulinpositivecellswasincreased,butthepercentageofGFAPpositivecellshadnodramaticallyalteration・Conclusion:Differentconcentrationof3・HBhadnosigniGcanlinlluenceonNSCsviability,butcouldpromoteNSCsdifferentiateintoneurons・Keywords:3-HB;neuralstemcell;cellproliferation;celldifferenlialion0引言随着人口老龄化,全球各种原因造成的脑损伤发病率呈现快速增长趋势,在我国,每年仅新发脑卒中病例超过200万,死亡约150万,病后伤残率高达28.7%(全球平均水平为25%),严重影响国民健康和生活质量。山此引发的离婚率和失业率的增加、以及治疗脑损伤的经济负担等己成为影响社会稳定的潜在因素。因此脑损伤后修复,尤其是神经功能重建己成为戻学和社会共同关注的问题,也是医学科学发展的终极挑战,是一项伟大的任务。基金项冃:教育部博上点新教师基金(200806981053):西安交通大学中央高校基本科研业务费方项资金(2010072,2011056)作者简介:杨志借(I987-),女,硕士研究生,细胞生物学通信联系人:卢晓云(1977-)•女,副教授,生化与分子生物E-mail:luxy05@mail.xjtu.cdu.cn神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)是具有自我更新能力的一类细胞,并具有多向分化潜能,可以分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。NSCs植入,会对脑损伤修复起到一•定作用,有研究表明,静脉注射NSCs可以改善脑缺血引起的空间学习障碍山。但是,单纯的NSCs移植效果并不理想,目前基于NSCs修饰、NSCs体外定向诱导分化后移植、混合细胞共移植⑵以及干细胞■生物材料共移植⑶等的一些尝试,在一定程度上取得了比较明显的效果,但是,离最终将NSCs用于脑损伤修复的临床应用仍有很大的距离。聚羟皋脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoaies,PHA)是一类新型的主物可降解高分子材料,PHA是山多种细菌合成的胞内能量和碳源贮藏物质,组成PHA的单体还可以通过改变碳源或者改变生长环境而控制⑷。PHA材料具有良好的生物相容性,其作为新型组织工程支架材料的研究己有报道⑸。纽I胞对PHA降解产物的反应对于评价这些聚合物在组织工程屮的应用有非常重要的参考价值。3■疑基丁酸(3-hydroxybutyrate,3-HB)是PHA材料降解的主要产物之一,它能引起多种细胞...