食品安全国家标准食品中二氧化氯的测定1范围本标准规定了蔬菜，水果，肉，水产品中二氧化氯的分光光度检测方法。本标准适用于蔬菜，水果，肉，水产品中二氧化氯的测定。2原理试样用磷酸盐缓冲溶液提取，经冷冻离心，过0.20μm膜，以丙二酸作掩蔽剂，加入DPD显色剂与二氧化氯显色，采用分光光度法在552nm处测定其最大吸光度，从而来确定冰鲜鸡肉中二氧化氯的含量。3试剂和材料注：除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。3.1试剂3.1.1丙二酸。3.1.2乙二胺四乙酸二钠（EDTA）。3.1.3无水硫酸钠。3.1.4氢氧化钠。3.1.5硫酸。3.1.6磷酸二氢钾。3.1.7N,N－二乙基－对苯二胺(DPD)。3.2试剂配制3.2.1DPD显色剂：无水硫酸钠:N,N－二乙基－对苯二胺(DPD):EDTA=91:5:4。3.2.2丙二酸溶液（10％）：取10ml丙二酸,用水溶解、定容至100ml。3.2.3氢氧化钠溶液：2mol/L：称取80g氢氧化钠,用水溶解、定容至1L。3.2.4氢氧化钠溶液：0.1mol/L：称取4g氢氧化钠,用水溶解、定容至1L。3.2.5硫酸溶液：1mol/L：称取98.4%的浓硫酸54mL，缓慢地加入约300mL蒸馏水中，冷却以后，转移到容量瓶中，把容器用约20mL蒸馏水洗涤3次，也转移到容量瓶中，然后加水，定容至1L。3.2.6磷酸二氢钾溶液：0.1mol/L：13.61g磷酸二氢钾溶液,用水溶解、定容至1L。3.2,7磷酸盐缓冲液（pH=6.2）：取500mL0.1mol/LKH2PO4＋81mL0.1mol/LNaOH稀释至1000mL。3.3标准品3.3.1碘化钾(纯度99.5%)。3.4标准溶液配制3.4.1碘酸钾：经120℃-140℃烘干2h。3.4.2碘酸钾标准储备溶液：称取1.006g碘酸钾，溶解于水，转入1000mL容量瓶中，稀释至刻度，混匀。3.4.3碘酸钾标准使用液：移取1.0mL碘酸钾标准储备溶液至100mL容量瓶中，稀释至刻度，浓度为10.06mg/L。4仪器和设备4.1紫外分光光度计。4.2均质器。4.3离心机：≥15000r/min。4.4具塞锥型瓶：100mL。4.5滤膜：0.20m。4.6移液管：1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml。5分析步骤5.1试样制备从所取全部样品中取出有代表性样品约1kg，经捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器内作为试样。密封并加贴标签。5.2试样保存将试样于-18℃以下冷冻保存。在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。5.3提取称取试样5.0g（精确至0.1g）于100mL具塞锥形瓶中，加入20mL磷酸盐缓冲液，均质提取3min。将提取液抽滤，残渣再用20mL磷酸盐缓冲液重复提取一次，合并滤液，同时做空白试验。将滤液移至离心管中，于高速离心机中冷冻离心10min，取出，用0.20m滤膜过滤于50mL具塞比色管中，以磷酸盐缓冲液定容，供分光光度法测定。5.4测定5.4.1标准曲线的绘制向一系列50mL具塞比色管中加入0.00mL，0.5mL，1.00mL，1.50mL，2.50mL，5.00mL，10.00mL碘酸钾标准使用溶液，各加入1.0g碘化钾，0.5mL硫酸，混匀后静置2min，然后加入0.5mL氢氧化钠溶液（2mol/L），稀释至刻度。则各管中的浓度相当于0.00mg/L，0.05mg/L，0.10mg/L，0.30mg/L，0.50mg/L，1.00mg/L，2.00mg/L的有效氯。分别加入2.5mL磷酸盐缓冲液和1.0g显色剂，摇匀，立即在2min内用1cm比色皿在552nm处测定吸光度，绘制标准曲线。5.4.2样品中二氧化氯的测定取50mL滤液，向滤液中加入1mL丙二酸溶液混合，加入1.5mL磷酸盐缓冲液和1.0gDPD指示剂混匀。立即在2min内，用1cm比色皿在552nm处测定吸光度，根据标准曲线求出二氧化氯的浓度。6分析结果的表述按公式（1）计算试样中二氧化氯残留量：(c－c0)·Ｖ×1.9Ｘ＝───────……………………（1）m式中：X——试样中ClO2残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；c——样液中ClO2的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；c0——试剂空白中ClO2的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；V——样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；m——最终样液所代表的试样质量，单位为克（g）；1.9——二氧化氯与有效氯间的换算系数。7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。8其他方法检出限为1mg/kg，定量限为3mg/kg。附录A二氧化氯的标准曲线图A.1给出了二氧化氯的标准曲线图A.1二氧化氯的标准曲线